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在自然界中精子細胞與卵細胞的受精過程是非常奧妙及複雜。在嚙齒類、哺乳動物及 人類,其精子細胞於輸卵管峽部(oviductal isthmus) 進行活能化作用。當女性排卵 時卵細胞會與卵丘細胞(cumulus cells) 及濾泡細胞(follicular cells)一起排入輸 卵管中,同時也排入了富含蛋白醣 (proteoglycans)、玻尿酸(hyaluronic acid) 及 類固醇(steroids)的濾泡液。此時精子細胞也進入了輸卵管的壺腹部 (ampulla),精 子細胞產生過激活化游動 (hyperactivation),而後進行頂體反應 (acrosome reac- tion) ,產生了膜融合(fusion)及囊狀化(vesicularization),最後穿透卵透明層 ( zona pellucida) 而受精。近年來的研究已證實濾泡液有促進頂體反應的作用。本研 究乃進一步探討濾泡液與精子細胞過激活化游動間的關係。並將濾泡液作進一步純化 ,經 100℃加熱30分鐘、離心後上清液經Fractogel TSK DEAE 650(s) 層析管純化, 我們發現加熱後的耐熱分子及管柱層析純化部分可分別促進過激活化游動,若以透析 過的濾泡液的刺激當作100.0%,則前者精子活動力增加117.0%,而DEAE的部分則增加 142.0%(p<0.01,pair-t tset)。我們更藉由過膜游動法(TMMR method) 及電腦輔助精 子細胞游動分析(CASA),頂體單株抗體間接螢光染色法,精子細胞耗氧量偵測加以探 討DEAE部份的濾泡液對精子細胞的作用及產生的變化。結果發現DEAE部份使精子細胞 的游動力增加149.0%、前進游動力增加246.0%、平均軌跡速率增加 30.1%、直線速率 增加 69.3%、平均線性比例(straightness)增加 28.8%、頭移側幅增加 46.6%、移動 交叉頻率(BCF) 增加43.4%(以上 p<0.01,pair-t test)。然而祗有濾泡液對頂體反應 有促進作用增加了158% (由14.3% 增至36.0%)(p<0.01,pair-t test),而加熱後的部 份及DEAE部分都沒有誘發頂體反應。我們更証實濾泡液可以增加 40%的消耗速率,加 熱後的部份增加 91.2%,而DEAE部份增加了 90%(p<0.01,pair-t test)。 上述這些實驗結果顯示,人類濾泡液可促進精子細胞運動活力及頂體反應。而且,從 純化的各部份液之作用,我們認為刺激精子活動力的有效成分是分子量約53Kd或42Kd 且為安定的生化成分,但促進頂體反應的成份會受熱破壞(heat-labile) 的小分子。
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