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F-137 是由土壤中篩選所得的一株真菌,能生產乳糖氧化 。經菌種鑑定為Sarocla- dium oryzae。F-137菌株利用麩皮培養基添加1%乳糖,經固體醱酵培養10至14天,可 得到最高活性的乳糖氧化 。酵素之粗萃取液,經過硫酸銨劃分、DEAE離子交換層析 、butyl 疏水管柱層析及octyl 疏水管柱層析等步驟,可得到精製的酵素。其比活性 為5.324units/mg (以乳糖為基質) 。此酵素之分子量大約為 51,000,是由一個多 胜 鍵組成。酵素的等電點在pH4.5 到5.1 之間;最適反應溫度為45℃;最適反應pH 值為10∼11,其在50℃保溫1 小時,活性幾乎完全喪失;酵素在pH4.5∼9.5之間相當 穩定。酵素對纖維寡糖反應性最好,其次為乳糖。 乳糖氧化 經吸收光譜掃描,判斷為一含核黃素之蛋白質。以化學修飾劑TNM(tetra- nitromethane) 作用後,活性完全喪失;此一修飾作用,在有基質存在下,酵素可被 保護,故推測活性中心可能含有一個酷胺酸。而用金屬螯合劑(EDTA)處理,酵素活性 不受影響;由此推論,此酵素可能不含金屬離子的參與。 由於此酵素對乳糖及纖維寡糖之基質專一性;推測此酵素的基質結合位置,為辨認β -1,4鍵結的葡萄糖。更由於其對纖維寡糖的作用,認為此酵素在生理上的角色,可能 參與了纖維素的分解。 利用此酵素對乳糖之高專一性,希望以後能製備成酵素電極,應用於食品工業,以取 代傳統的乳糖測定法。
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