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本論文以3T3-L1脂肪細胞為模型,探討游離脂肪酸是否會影響細胞攝取葡萄糖。實驗 總共檢測5 種脂肪酸 (palmitate,oleate,linoleate,linoleneate 和arachidonate) ,發現其中只有花生四烯(arachidonate,20:4) 以0.2mM 的濃度與細胞接觸兩小時之 後,能夠增加細胞攝取3H-2-deoxy-glucose的速率將近兩倍。其作用可維持至少4 天 ,且胰島素刺激細胞攝取葡萄糖的作用也略有增加。 動力學研究顯示20:4是增加葡萄糖轉運時的最大速率(Vmax),至於葡萄糖轉運子對2- DG的親和度(Km)並無明顯改變。 利用GLUT4 合成胜 與兔血清白蛋白偶合,對兔子做免疫反應製得抗GLUT4 免疫血清 ,然後用Western blot分析得知20:4不會改變細胞的GLUT4 蛋白質含量。而利用GLUT 1 CDNA為探討,在Northern blot 上發現20:4也不改變細胞中GLUT1 mRNA含量。而以 cycloheximide 處理細胞後20:4的作用有下降趨勢,但actinomycin D 前處理則不影 響20:4的作用。僅用cycloheximide 或actinomycin D 處理細胞就能增加其2-DG攝取 ,且後者作用比前者明顯,但機制不明。綜合以上結果顯示20:4的作用是在葡萄糖轉 運子的轉錄後層次。 另外20:4的作用不需要protein kinase C參與,因為以20:4處理細胞並不改變其對PM A 的反應,而且先用PMA 處理24小時除去細胞PKC 活性,20:4仍然會增加2-DG攝取。 最後20:4的作用與dibutyryl-CAMP(db-CAMP) 似乎有所關連,因為db-CAMP 會增加2- DG攝取,而20:4的作用與db-CAMP 不會加成。 總結而言,本論文說明: (1) 在5 種檢測過的脂肪酸中只有20:4 能促使 3T3-L1脂肪細胞攝取2-deoxyglucose 。 (2) 其作用是增加攝取2-DG時的Vmax。 (3) 20:4的作用機制可以歸入到葡萄糖轉運子的轉錄後層次。 (4) Protein Kinase C與20:4的作用並無牽涉。 (5) 20:4的作用機制與CAMP可能有所關連。
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