本實驗以前, 除發現在NG108-15細胞當中,BK,GTPγS和R59022可引起肌醇磷酸鹽類的
堆積, 也發現NEM 不但可以抑制GTPγS結合到G-蛋白質的活性, 也可以抑制肌醇磷脂
繪C 的活性。根據文獻指出氟鋁離子, 可以增加PI轉換率, 且其本身在adenylate cy
-clase系統當中也是G-蛋白質的活化劑。另外,sodium deoxycholate對從牛腦與大白
鼠腦中所純化的肌醇磷脂繪C 有活化或抑制的作用。
因此本實驗從事氟鋁離子和sodium deoxycholate 對NG108-15細胞, 觀察其對於 GTP
γS 結合到G-蛋白質的活性,G- 蛋白質的GTPase的活性及肌醇磷脂 C 作用的影響。
實驗結果發現在完整的NG108-15細胞實驗氟鋁離子和sodium deoxycholate(2.4mM)能
增加IP 的堆積。氟鋁離子可以增加GTPγS結合到G-蛋白質的結合速度, 但卻不改變
Kd值。對於GTPase沒有影響, 但卻抑制肌醇磷脂 C 的活性。而這種抑制作用會為GT
PγS給拮抗過來。而sodium deoxycholate 在2.4mM 時活化肌醇磷脂 C。 而高於這
個濃度則產生抑制作用。而且其對GTPase是抑制的作用。
根據我們的研究結果, 我們的結論是: 在完整的NG108-15細胞實驗氟鋁離子能增加IP
的堆積。氟鋁離子可增加GTPγS與G-蛋白質結合的最大結合速度, 但不改變Kd值,
因此氟鋁離子和GTPγS在G-蛋白質的結合位置可能不同。而其抑制肌醇磷脂 C 的活
性的作用被GTPγS所拮抗。這些作用可能與G-蛋白質有關。在磨碎的NC108-15細胞均
質液中, 三種實驗所用的清潔劑中sodium deoxycholate(2.4mM)能增加肌醇磷脂 C
之活性。而Triton x 100則抑制肌醇磷脂 C 之活性。至於sodium deoxycholate(2.
4mM)增加IP 堆積的能力, 是否與蛋白質有關, 值得進一步研究。