1987年至1989年間自高雄地區醫院，泌尿道感染病患之尿液檢體中收集 E. coli，
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Enterobacter spp. 和Klebsiella spp. 等腸內菌，共1054株。
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採用瓊脂平板稀釋法測定菌株對trimethoprim之最小抑制濃度，若≧4μg trimet-
hoprim/ml 則視為具有抗藥性，若≧1000μg trimethoprim/ml 則判定為具有高程
度抗藥性。在三年調查中，trimethoprim抗藥性菌株由34﹪（1987年）增加為42﹪
（1989年），其中以E. coli 之trimethoprim抗藥頻率增加（28﹪∼41﹪）最為明
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顯。
在374 株抗藥性菌株中，90﹪以上屬高程度抗藥性，利用瓊脂醣明膠質體電泳法及
南方雜交反應，結果顯示這些高抗藥性菌株之trimethoprim抗藥性dihydrofolate
reductase (DHFR)基因皆由質體所攜帶。為探討374 株trimethoprim抗藥性菌株中
抗藥性 DHFR 基因分佈情形，因此進一步利用菌落雜交法分析其類別，結果顯示有
169 株（45.4﹪）與type I DHFR DNA 探針呈雜交，頻率最高，其次有39株（10.4
﹪）與type V DHFR DNA 探針呈陽性反應。此外不同菌屬間，DHFR分佈情形也有差
異，type I DHFR 抗藥基因主要存於E. coli ，而type V DHFR 抗藥基因則多數存
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於Enterobacter spp. 內。但所有的trimethoprim抗藥性菌株與type Ⅱ、Ⅲ DHFR
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探針並無雜交反應發生。
挑選兩株對trimethoprim呈高程度抗藥性(MIC≧1000μg/ml) 但卻無法以typeⅠ、
Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ等DHFR DNA探針分型之菌株，經分析其trimethoprim抗藥基因之內核酸
鑑識圖譜及核酸序列後，顯示新型trimethoprim抗藥基因存在。
為了深層了解trimethoprim抗藥基因是否藉轉位子Tn7 散佈，因此選取BamH Ｉ 內
核酸鑑識切取Tn7 所得之1Kb DNA 片段做探針，探討轉位子Tn7 存在情形，結果
在169 株屬於type I DHFR 抗藥基因之菌株中，發現與Tn7 探針雜交者只有15.4﹪
。因此另外探討dhfr I抗藥基因插入integron之可能性，所以製備了integrase 探
針，先取質體R388，以BamH Ｉ內核酸鑑識切割，並將攜帶integrase基因之2.06
Kb片段重新選殖到質體pUC19 上，所獲得之重組質體命名為pINT388。再以BamH Ｉ
及Hinf Ｉ 兩種內核酸鑑識進行雙重切割pINT388 ，再取1375bp片段做為特異性
integrase 探針來源，並進行菌落雜交反應，結果有87.6﹪菌株呈陽性反應。此結
果顯示dhfr I抗藥基因除了位在轉位子Tn7 外，大多數位於integron上。
另外，integron於 E. coli、Enterobacter spp. 及Klebsiella spp. 等425 株受
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試之膠內菌中，出現頻率亦高達為86.4﹪、84.8﹪及76.7﹪，可見integron普遍存
在這些菌屬間。南方雜交反應也指出integron主要位於質體上。因此從本研究中發
現在trimethoprim與sulphonamide藥物的雙重選擇壓力下，trimethoprim抗藥基因
藉轉位子Tn7 傳遞的頻率降低，而主要藉著嵌入integron，並靠質體的轉移來傳遞
trimethoprim抗藥基因。
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