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為進行禽痘病毒的研究，本實驗首先建立了一套萃取禽痘病毒核酸的方法。將感染
病毒的細胞經超音波擊碎及低速離心後，以40% 蔗糖溶液墊底離心純化病毒。 純
化後的禽痘病毒顆粒以proteinase K 及phenol/chloroform處理，萃取其中的核酸
。萃取出的核酸並以聚合 連鎖反應與限制 圖譜分析驗證其正確性及純度。純化
的禽痘病毒核酸以限制 HindⅢ切割後與質體pUC18 接合， 篩檢後共選出七個含
有0.7至51kbp 禽痘病毒基因體片段的重組質體。 選擇含 5.1kbp 嵌入片段的實體
pFH28進行核酸定序，經定序後共判讀出長度 5,183bp 的核 酸序列。 整個片段
內含有十個開收讀碼區中，ORF1 ，ORF5及ORF10預測的氨基酸序列分別與牛痘病毒
D6R ,A37R 與E4L 蛋白有 27.9%，35.1%及53.1%相同；ORF3的氨基酸序列與人類巨
細胞病毒的UL9 蛋白質先質有232%相同。
#9306467
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