鈉鈣交換器存在於可激活及不可激活的細胞,對胞內鈣濃度的調節,扮演重要角色 。本論文主要探討NG108-15細胞其鈉鈣交換器之活性。首先以Fura-2鈣螢光染劑測 定已分化之NG108-15細胞胞內鈣離子之變化,在靜止狀態,胞內鈣濃度不因胞外鈉 濃度減少而改變。藉由高鉀或bradykinin提高胞內鈣離子濃度,胞內鈣濃度下降速 率在含鈉或不含鈉緩衝液中亦相同。使用粒線體抑制劑FCCP及內質網鈣邦浦抑制劑 Thapsigargin,胞內鈣濃度最高峰會隨胞外鈉濃度降低而增加。細胞經ouabain 處 理後,胞內鈣濃度於含鈉或不含鈉緩衝液下分別為67±7nM 及98±10nM。於不含鈉 緩衝液中Ouabain 或FCCP及TG對細胞所造成的較高胞內鈣濃度,可藉由鈉離子的加 入而降低。因此,於已分化之 NG108-15 細胞,鈉鈣交換器的活性,必需在胞內其 它可吸收鈣離子的胞器被抑制後,才能顯現。但在未分化的 NG108-15 細胞經bra- dykinin 刺激,即可顯示鈉鈣交換器的活性。利用ATP 將45Ca2+填裝入細胞後, 45Ca2+存留於細胞之量於不含鈉緩衝液較含鈉緩衝液高。經ouabain 處理後,細 胞攝取45Ca2+之量於不含鈉緩衝液亦較高。我們以NG108-15細胞之RNA 反轉錄成 互補DNA 為模板,並用對鈉鈣交換器特別設計的引物進行聚合連鎖反應,反應產 物進行DNA 定序,發現與狗心臟及人心臟細胞DNA 序列有75-80﹪相似性。
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