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研究生:楊文沛
研究生(外文):Yang Wen Pei
論文名稱:愛玉子果膠酯酵素基因的分析
論文名稱(外文):Analysis of Pectin Methyl Esterase Gene of Ficus awkeotsang Makino
指導教授:林彩雲林彩雲引用關係
指導教授(外文):Lin Tsai Yun
學位類別:碩士
校院名稱:國立清華大學
系所名稱:生命科學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1993
畢業學年度:81
語文別:中文
中文關鍵詞:愛玉子果膠酯酵素瘦果
外文關鍵詞:Ficus awkeotsangpectin methyl esterasepericarp
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愛玉子為台灣特有的植物,其瘦果 (pericarp) 中富含果膠,揉洗後可形
成愛玉凍,為台灣夏季極受歡迎的清涼飲料。愛子果膠酯酵素在愛玉子成
熟期間會在果皮中大量表現,在食品工業上可用來使果汁澄清,具有應用
價值。為了研究愛玉子果膠酯酵素的生理功能及量產果膠酯酵素,我們希
望能分離愛玉子果膠酯酵素的基因。愛玉子目前尚無可用基因庫存在,所
以我們要先以愛玉子瘦果為材料,製作一個基因庫 (cDNA library)。由
於一個良好的基因庫之建立,端賴 mRNA 萃取之成功。但是愛玉子果實中
含大量果膠(果膠佔果實一半以上的重量),很嚴重地影響了RNA的品質。
因此我們嘗試及比較數種 RNA 萃取的方法並以試管外轉譯(in vitro
translation)試驗所得到的 RNA 的品質,從其中我們找到兩種可行的方
法 ─ 以兩次 CsCl gradient 的超高速離心來去除高量膠狀物質或利用
RNA 在低溫中分布於 phenol 的特性分離出RNA,並以分離出的 mRNA製備
了一個愛玉子基因庫。我們以蕃茄的果膠酯酵素基因的cDNA 作為探針分
別和雌雄植株的染色體 DNA 及果實的 RNA 作南方及北方墨點雜交反應(
southern and northern blots),發現有明顯的雜交圖譜,表示蕃茄和
愛玉子的果膠酯酵素基因具有一定的相似性,並由圖譜推測愛玉子果膠酯
酵素的基因可能有兩組以上。另外我們也藉由簡單的水溶性蛋白質圖譜來
判別愛玉子的雌雄植株。

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