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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:詹怡華
研究生(外文):Yi-Hua Jan
論文名稱:鎝-99m直接標幟人體免疫球蛋白G
論文名稱(外文):Direct Labelling of Human Immunoglobulin G with Technetium-99m
指導教授:羅建苗
指導教授(外文):Jem-Mu Lo
學位類別:碩士
校院名稱:國立清華大學
系所名稱:原子科學研究所
學門:工程學門
學類:核子工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1993
畢業學年度:81
語文別:中文
論文頁數:42
中文關鍵詞:免疫球蛋白G2-亞胺環硫丁烷標幟效率免疫活性解離率
外文關鍵詞:immunoglobulin G2-iminothiolanelabelling efficiency
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抗體具高度的親和力與專一性,以抗體做為放射核種之載體可準確地到達
病灶;本論文以2-亞胺環硫丁烷 (2- iminothiolane ; 2-IT) 修飾人體
免疫球蛋白G (immuno- globulin G ; IgG) ,植入額外的硫醇基,以利
鎝-99m之鍵結;藉各項特性分析,研究反應之動力參數並依最佳條件製備
適當的注射小瓶,以作為發炎病灶診斷之照影劑。本研究之特性分析包括
以瞬間薄層層析(ITLC)及高效率液相層析(HPLC)來鑑定標幟效率,以親和
層析測定免疫活性,以凝膠電泳(SDS-PAGE)分析其降解情形,藉紫外/可
見吸光分析測定硫醇基之數目。根據反應參數之探討,適當的乾粉注射小
瓶配方為:取1 mg已修飾 IgG,加入 0.25 ml酒石酸亞錫飽和溶液為還原
劑,並添加1 mg甘露醇為穩定劑。經冷凍乾燥後加入過鎝酸根食鹽水溶液
標幟之,標幟效率高達99%,免疫活性為85%。修飾抗體以2-IT的莫耳數
為IgG 之1100倍,室溫下培育三小時,經 PD-10管柱純化製備之。其穩定
度測試分別與0.67 mM 、6.7 mM之cysteine或glutathione 進行競爭反應
,於37℃下培育24小時,經cysteine考驗之解離率分別為13%及30%,而
glutathione 之解離率為10%及20%。分析不同時間之生物分佈,顯示此
標幟藥物係由腎、肝、脾等器官代謝。以2-IT修飾抗體分子,可植入有限
個硫醇基 (單位抗體約4∼8) ,不會改變抗體原來之特性;其標幟過程簡
單、可靠且容易製備注射小瓶,由其HPLC及SDS-PAGE分析,並無任何碎裂
或聚合反應發生,可保持抗體之完整性,故此2-IT修飾程序反應相當溫和
,可應用於標幟抗體注射小瓶之製備,極具臨床應用潛力。

Based on high affinity and specificity of the antibodies,
radiopharmaceuticals using antibodies as the carrier of
radionuclides can be preferent- ially localized in the target
organ. In this study ,Tc-99m is labelled to human
immunoglobulin G(IgG) where the antibody is modified by
2-iminothiolane (2-IT) to generate sulfhydryl groups for
Tc-99m binding. The reaction parameters for the Tc-99m
labelling are investigated and aimed to an optimum preparation
of a kit which can be used as a clini- cal imaging agent for
diagnosing infection and inflammation. The labelling
efficiency and proper- ties of the Tc-99m-IgG previously
produced are determined by the following analytical methods:
HPLC, ITLC, affinity chromatography, SDS-PAGE, sul- fhydryl
determination, cysteine and glutathione challenge reaction
etc. According to observed study , the suitable formulation
of a kit is that each vial is composed of 1mg of 2-IT modified
IgG, 0.25 ml of the saturated solution of tin tartrate,and 1 mg
of mannitol before lyophilization. The 2-IT modified IgG
is prepared by mixing 2-IT and IgG with the molar ratio of
1100:1, incubated at room temperature for 3 hr, and purified
by PD-10 column chromatography. The labelling efficiency of
Tc-99m -IgG of the kit reconstituted with a saline solu- tion
of TcO4- is higher than 99%, and its immuno- reactivity can
reach ca. 85%. The stability of the Tc-99m-IgG is determined by
a challenge test with 100 and 1000 molar excess of cysteine
and glutath- ione. After incubating at 37 degree for 24hr, the
corresponding dissociation of Tc-99m is 13% and 20% in the
medium of cysteine, 10% and 20% in the medi- um of glutathione,
respectively.

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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