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研究生:
孫國彬
研究生(外文):
Sun, Guo-Bin
論文名稱:
對亞砷酸鈉敏感之中國倉鼠卵巢細胞株之分離與鑑定
論文名稱(外文):
Isolation and characterization of aresenite sensitive mutants of Chinese hamster ovary cells
指導教授:
黃海美
指導教授(外文):
Huang, Hai-Mei
學位類別:
碩士
校院名稱:
國立清華大學
系所名稱:
輻射生物研究所
學門:
生命科學學門
學類:
生物學類
論文種類:
學術論文
論文出版年:
1993
畢業學年度:
81
語文別:
中文
論文頁數:
42
中文關鍵詞:
亞砷酸鈉
、
細胞
、
重金屬
、
輻射生物
、
生物學
、
核能
外文關鍵詞:
RADIATION-BIOLOGY
、
BIOLOGY
、
NUCLEAR-SCIENCE
相關次數:
被引用:0
點閱:98
評分:
下載:0
書目收藏:1
本研究藉由低濃度亞砷酸鈉及利用 BrdU-UV visible light enrichment 的方法處
理3x10 經致突變劑 Ethylnitrosourea (ENU) 處理過的中國倉鼠卵巢細胞,並從
其中篩選出對亞砷酸鈉敏感的細胞株。從全部挑出的197 個細胞聚落中,篩選到14
個對亞砷酸鈉敏感性較CHO-K1細胞有1.5 倍以上的細胞株。並對其中敏感程度表現
較高的兩個細胞株(B26,D21) 作進一步的特性分析。由細胞聚落形成法得知,此二
株細胞對亞砷酸鈉敏感的程度分別為CHO-K1細胞的3倍以及7倍。為了進一步探討
亞砷酸鈉對此二株細胞造成的基因,我們檢查了此二細胞中麩胱甘胜(GSH) 的含量
及麩胱甘胜轉移脢(GST) 的活性。雖然GSH 和GST 被証實可能和解除砷化物對細胞
造成的毒性有關,但在B26 及D21 細胞中並未發現此二株細胞內GSH 含量及GST 的
活性和CHO-K1細胞有所差異。另一方面,本研究利用原子吸收光譜法測定細胞受到
亞砷酸鈉處理過後,細胞內累積砷化物的情形。結果發現,在D21 細胞受到亞砷酸
鈉處理後,明顯在細胞中較同樣處理的CHO-K1細胞累積較多的砷化物在細胞之中的
現象。同時本實驗也觀察到處理過25μM SA 4小時的D21 細胞在不含SA的培養液中
一段時間後,此敏感細胞株對砷化物仍有累積較多的情形。此結果顯示:造成D21
細胞較CHO-K1 細胞對亞砷酸鈉敏感的原因可能和敏感細胞中砷化物的累積較多有
關。
在D21 細胞的敏感特性方面,以LD50而言,本研究也發現D21 細胞對DNA damage
agents:ENU、 順-雙氯雙鉑(Cisplatin) 及伽瑪射線 (γ-ray) 只有1.5 至2 倍
左右的敏感性。在對重金屬之細胞毒性方面,D21 細胞對五價的 sodium arsenate
較CHO-K1細胞高7倍的敏感性且對氯化汞 (HgCl) 也較CHO-K1細胞高3倍的敏感
性。但是對硫酸鋅 (ZnSO) 及氯化鎘 (CdCl) 只有1.5 到2 倍的敏感性。因此
,砷化物對D21 細胞所造成的毒性機制,可能和直接或間皆造成細胞DNA 的傷害無
關。另一方面,從D21 細胞在本實驗中只對亞砷酸鈉及砷酸鈉有七倍左右的敏感性
得知,砷化物對D21 細胞所造成的毒性機制可能和其他重金屬不相同。
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