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研究生:陳靜瑩
研究生(外文):Chen,Ching-Ying
論文名稱:有絲真菌(Syncephalastrumracemosum)去氧核糖核酸�@其蛋白構造及生合成之研究
論文名稱(外文):The Protein Structure and Biosynthsis of Syncephalastrum racemosum Deoxyribonuclease
指導教授:廖大修
指導教授(外文):Liao,Ta-Hsiu
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:生化學研究所
學門:醫藥衛生學門
學類:醫學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1993
畢業學年度:81
語文別:中文
中文關鍵詞:有絲真菌核酸次單元醣基
外文關鍵詞:Syncephalastrum racemosumDNaseSubunitCarbohydrate group
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有絲真菌(Syncephalastrum racemosum)可生產相當高量之去氧核糖核
酸( 簡稱核酸 ),培養基中的營養成分會影響核酸產生 。如在
馬鈴薯葡萄糖洋菜皿中添加濃度為 30 mg/ml之NaNO,則粗萃取液中核酸
活性產量可增加約五倍。以麩皮培養之菌絲粗萃取液通過 DEAE-
cellulose、Hydroxylapaide、Blue dextran 管柱,可得到純化之核酸
。利用此核酸免疫兔子所得抗核酸之多株抗體,進行免疫螢光染色
,在柱孢子囊上有明顯發光反應,推論核酸主要產生位置在柱孢子囊
上 。先前研究指出本真菌之核酸是由兩條相同之蛋白次單元所構成 。
次單元分子量為28 KDa。在多次純化此核酸當中,發現在SDS-電泳膠片
上除28KDa 蛋白帶外,還出現另一 26KDa 之蛋白帶。如果以純化之核酸
誘導兔子產生之多株抗體進行西氏點墨法(western blotting)分析
,則28KDa 及26KDa 兩個蛋白帶均可與抗體反應。 而且如果利用刀豆素
(ConA)染色法分析,則只有28KDa才有反應。因此推論為:兩種次單元
之間蛋白構造應十分相似,而其間之差異是28KDa 含醣基而26KDa 不含醣
基。另外只有含有28KDa次單元之核酸才能對ConA 管柱有親和力。利用
此親和性質可把只含26KDa 之核酸與含有28KDa 之核酸分離。當粗萃
取液放置多天後分析,則有26KDa增加28KDa 減少之現象 。由此得知26
KDa 是由28KDa 切除醣基而生成。如果兩種次單元同時存在時,理論上可
組成三種核酸(28/28、28/26、26/ 26 )。實驗結果亦證明由28/28
核酸切除醣基成26/26核酸的過程中,有28/26 核酸之存在。利用
等電膠聚與活性染色法分析得知,此三種核酸之等電點均為4.6。由胺
基酸組成及N- 端蛋白順序分析結果可推論,兩種次單元之順序應完全相
同。

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