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研究生:黃冠博
研究生(外文):Hwang Guan-Bor
論文名稱:水稻銅鋅超氧歧化�L的cDNA選殖與性質研究
論文名稱(外文):cDNA cloning and charaterization of Cu/Zn superoxide dismutase of rice
指導教授:潘素美;葉開溫
指導教授(外文):Pan Shu-Mei;Yeh Kai-Wun
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:植物學系
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1993
畢業學年度:81
語文別:中文
中文關鍵詞:超氧歧化聚合連鎖反應
外文關鍵詞:superoxide dismutase(SOD)polymerase chain reaction(PCR)
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Atsushi Sakamoto 等人已經篩選出水稻超氧歧化 Cu/Zn sodB 基因,因
此我們比較水稻 Cu/Zn sodB gene coding region與玉米 Cu/Zn SOD
cDNA 全長序列後,依據水稻 Cu/Zn sodB gene co- ding region,選擇兩
段同源性較高序列,分別合成兩段寡酸(oligo mers) sodB-1 與
sodB-2,當作引子(primer),以水稻 poly(A)RNA為模板,先後進行 cDNA
的合成與聚合連鎖反應(PCR),結果 PCR合成的產物,經過序列分析長度
為 298bp,證實與 Atsushi Sakamoto等人所發表的水稻 Cu/Zn sodB 基因
coding region上 +122 到 +420之間的序列相同。以此 298bp DNA 為探
針(probe),從水稻 λgt11 cDNA 庫中,共篩選到 4 個正反應株.其中一株
經序列分析證實其含有 Cu/Zn SOD-1 cDNA (799 bp)。其序列與文獻中玉
米 Cu/Zn SOD之序列至少有 83% 相同,與近年日人發表Cu/Zn SODA 序列
有99.1%相同。將此 Cu/Zn SOD-1 cDNA 內 coding region 的部份以PCR
增值後,接合入pGEX-2T 載體,送入大腸桿菌,XL1-Blue strain中,以 IPTG
誘導,發現產生一條約 93KD 的融合蛋白質,它具有酵素活性。另外將水稻
植株分別以二價金屬離子 (鎘,銅),鹽(NaCl),乾燥及熱(42℃)處理後,分
離各處理植株之total RNA.以Cu/Zn SODB-298bp DNA為探針,進行北方轉
印法(northern blot) 分析,發現 100μM 銅, 200mM NaCl,乾燥及熱處
理,Cu/Zn SOD基因的 mRNA 含量隨處理時間加長而增加;但50μM鎘處理,
Cu/Zn SOD 基因的 mRNA 含量降低。
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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