低溫顯微鏡系統是用來觀察生物細胞在低溫下形態變化之主要儀器。本研 究的目的即在研製微電腦方向式低溫顯微鏡系統,同時測試其性能。方向 式冷凍臺是以承載玻片兩端不同溫度的銅塊當作玻片的冷熱源,以產生玻 片的溫度梯度,而藉由調整冷熱源與玻片樣本區之相對位置來控制生物樣 本之溫度。 本研究中所研製之低溫顯微鏡系統可分為方向式冷凍臺與 微電腦樣本溫度控制系統兩部分。冷凍臺以工業用溫度控制器維持冷熱源 銅塊的恆溫,而生物樣本之溫度控制是由微電腦藉溫度讀取電路擷取樣本 溫度資料,應用PID 控制法則控制步進馬達自動調整冷熱源與樣本區之相 對位置,經由熱傳導以間接控制待觀察樣本的溫度。所完成之低溫顯微鏡 系統可控制之最低樣本溫度為攝氏溫度 -50度,最快之冷凍速率可達每分 鐘攝氏溫度60度。恆溫控制時,實測溫度與設定溫度誤差在攝氏溫度 1度 以內。在降溫控制時,誤差在攝氏溫度 1.5度以內。系統操作程式以C語 言設計,可由電腦介面輸入實驗中之各項參數觀察生物樣本在低溫下之凍 結過程。 利用本方向式低溫顯微鏡系統,實際以牡蠣卵與胚體進行低 溫冷凍實驗,以探討其細胞內凍結溫度( IIF)特性。實驗結果顯示,時間 與溫度均為對 IIF之重要影響因子。當維持於水溶液凍結點以下之恆溫時 ,隨時間的增長,發生 IIF的機率也隨之增加,而愈低溫時其 IIF機率亦 愈高;而在卵與胚體低溫特性比較實驗方面,實驗結果顯示,在同一低溫 情形下,胚體發生 IIF之機率較卵為高。
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