利用聚合霉連鎖反應來偵測牛病毒性下痢病毒,比一般用傳統的方法更加的快速且確 實。本實驗主要是利用反轉錄聚合霉連鎖反應,來大量的複製牛病毒性下痢病毒的二 段DNA 片段,根據牛病毒性下痢病毒NADL strain 的p80 及gp53DNA 序列設計二組不 同的引子,這兩組引子可在適宜的條件下經過反轉錄聚合霉連鎖反應偵測到牛病毒性 下痢病毒的存在,且可以藉此區分牛病毒性下痢病毒和豬瘟病毒。對於聚合霉連鎖反 應的靈敏度,經過洋菜膠電泳分析後在p80 這一組引子可以偵測到0.001-0.10001 TCID50/ml ,而gp53這組能偵測到10-1 TCID20/ml,經過南方吸漬法、雜交試驗後發 現p80 之引子靈敏度可以再增加10-100位,而gp53這組引子其靈敏度並無明顯的增加 ,顯示以p80 之引子進行偵測病毒可獲得較理想的結果。聚合霉連鎖反應的速度快且 特異性高,是目前對於研究牛病毒性下痢病毒本身及其致病的機制的一個好方法。
|