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研究生:蔡佳嫈
研究生(外文):Jia-Ing Tsai
論文名稱:腦內注射誘發之小鼠實驗性自體免疫腦炎
論文名稱(外文):Induction of Experimental Allergic Encephalomyelitis by Intracerebral Injection
指導教授:黎煥耀黎煥耀引用關係
指導教授(外文):Huan-Yao Lei
學位類別:碩士
校院名稱:國立成功大學
系所名稱:微生物及免役學研究所
學門:生命科學學門
學類:微生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1994
畢業學年度:82
語文別:中文
論文頁數:90
中文關鍵詞:自體免疫腦炎多發性硬化症自體反應T細胞
外文關鍵詞:EAEMBPMultiple SclerosisB6
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  以標準敏感化步驟無法誘發自體免疫腦炎之小鼠,我們嘗試了數種再
刺激途徑,包括靜脈注射、腦內注射、腹腔注射,或合併腹腔與腦內注射
。發現只有合併腹腔注射 MBP/CFA 及腦內注射MBP,其間間隔 2 日,腦內
注射 2 天後,開始見到小鼠出現自體免疫腦炎病徵,包括尾巴貼地、後
肢無力、肢端麻痺,隨疾病之發展,有些小鼠會死 亡,有些則恢復,或
仍伴隨輕度行動失調之神經性殘存症狀,在腦部組織學檢視中,可見到血
球浸潤現象,浸潤範圍包括皮質與髓質區域,主要是單核血球浸潤,於腦
部左右半球對稱出現,除了血管周圍之 Virchow-Robin space 以外,亦
侵入到腦內實質部。在單做腹腔注射或腦內注射之小鼠,無病徵也無組織
學發炎現象。此種誘發小鼠自體免疫腦炎之方式,亦在數種原屬不反應性
品系之小鼠(如:A/J, ABY……等)造成疾病。腹腔注射時,必需配合完
全佐劑之使用,而腦內注射時,必需是給 MBP,才能誘發疾病產生,顯示
出小鼠實驗性自體免疫腦炎之發生,需要完全佐劑之再刺激,與 MBP 在
腦內注射吸引淋巴細胞通過腦血管障壁 ,進入腦內。  根據文獻指出
,腦內給予抗原注射,會吸收到頸部淋巴結,我們對經注射小鼠,比較頸
部與四肢部位淋巴細胞,發現在細胞表現型以及試管內給予 anti-CD3
或 MBP 刺激後之反應性,確有顯著差別,合併腹腔與腦內注射組,可誘
發病徵產生,同時其頸部區域淋巴細胞,在腦內注射之後 12 小時內數量
大為減少,隨後漸漸恢復,而四肢部位淋巴細胞無此現象,利用流體細胞
分析儀及螢光抗體染色,亦証明了只有合併注射組之頸部區域淋巴細胞,
在各種細胞表現型的比率上明顯不同,由動力學檢視,我們認為 CD4+,
Vb8.1,8.2+ 細胞可能便是致病的作用細胞。以 3 種螢光抗體染色,我們
亦發現 Vb8.1,8.2+, CD4-8- 細胞在疾病中有特別的變化,在合併處理之
注射後 12 小時,此群細胞之比例明顯降低,但 50 小時之後恢復與疾病
的發展階段相關,在正常小鼠之頸部區域淋巴細胞,表現 VLA4 之比率低
於四肢部位淋巴細胞,若給予腦內注射,可見到頸部區域淋巴細胞之
VLA4 比率明顯提高。總結以上結果,合併腹腔注射及腦內注射,能使不
發病品系小鼠發展出自體免疫腦炎,其疾病的誘發階段約在合併注射後
2 日內,Vb8.1,8.2 細胞之變化明顯相關。

The standard protocol of immunization (MBP/CFA plus B. pertusis
treatment) can not induce EAE in most strains of mice except
SJL, PL/J or (STL×PC/J) F1 mice. We have tried several
approachs including additional i.p., i.v., i.c. injection to
induce EAE in resistant B6 mice. We found that only combination
of i.p. and i.c. injection could induce EAE in B6 mice. B6 mice
were sensitized by standard procedure. Twenty days later, they
were given additional MBP/CFA i.p.. 2 day later followed by
another i.c. injection of MBP in normal saline. The mice will
develop clinical EAE symptoms (limp tail, hindleg weakness,..)
begining at day 24. The sympton will last several days.
Sometime, the mice will die. If they recover, there were also
some residual neural complication. The histological examination
can observe blood cell infiltration into meninges and
parenchyma. Single i.p. or i.c. injection did not induce
clinical EAE sympton nor histological cell infiltration. The
combination of additional i.p. and i.c. injection can also
induce EAE in other resistant strains such as A.BY. RIII ...
mice. The i.p. injection needs the presence of CFA suggesting
the additional activation of autoreactive lymphocytes. The
requirement of MBP in i.c. injection demonstrate the MBP
specificity of EAE and indicate the recruitment of MBP-specific
autoreactive T cell into the brain that across the BBB. It was
reported that deep cervical lymph nodes (cLN) are drainage
lymph node of brain and C.S.F.. We compared the cell phenotype
and MBP- or anti-CD3-activation between cLN and dLN (inguinal
and axillary). The FACS analysis of cLN cell phenotype also
found major changes during the development of EAE. The kinetic
analysis suggests that Vb8.1.8.2+, CD4+ and Vb8.1.8.2+, CD4-,
CD8- cells are involved and correlated with the development of
EAE. The expression of VLA4+ lymphocyte in cLN is lower than
that of dLN.

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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