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研究生:王意雯
研究生(外文):Wang, Yi-Wen
論文名稱:單純皰疹病毒第一型於小鼠及組織培養中感染之研究
論文名稱(外文):Study of infection of herpes simplex virus type I in mice and tissue culture
指導教授:陳世輝陳世輝引用關係
指導教授(外文):Chen, Shi-Hui
學位類別:碩士
校院名稱:國立成功大學
系所名稱:微生物學及免疫學研究所
學門:生命科學學門
學類:微生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1994
畢業學年度:82
語文別:中文
論文頁數:89
中文關鍵詞:"單純泡疹病毒微生物學免疫學單純■疹病毒第一型潛伏性感染復發感染"
外文關鍵詞:"MICROBIOLOGYIMMUNOLOGYHrpes simplex virus type 1Latent infectionRecurrent infection"MICROBIOLOGY
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單純■疹病毒第一型是人類族群常見的病原體,首次感染後,易潛伏
在感覺神經節中,並伺機復發,對免疫缺陷之病人,易造成全身性感染而
導致死亡。本論文藉由小鼠模式,探討小鼠免疫接種病毒外膜抗原性醣蛋
白合成胜■對首次,潛伏及復發感染之影響另以抗血清分析病毒醣蛋白
gH 與 gL 於細胞培養中抗原性之變化。 BALB/c 小鼠經由腹腔免疫接
種病毒外膜醣蛋白合成胜■ gB/892-903、gB/64-78、gH/175-181、
gH/295-308、gH/561-579、gH/710-718、gL/ 130-139,或蛇毒抗凝血因
子 Rhodostomin 之合成胜■ Rho/45-59(阿拉伯數字代表各胜■之胺基
酸序列),再由腹腔注射 1 倍50% 致死劑量之 KOS 品系病毒,以小鼠
致病率(即後肢麻痺)降低的程度,來評估保護力。發現僅 gH/561-579
確具顯著保護力。若以 gH/561-579 與 gB/64-78胜■混合免疫注射小鼠
,並改以更高濃度之 KOS 品系病毒 (100LD50) 進行挑戰試驗,結果與注
射單一 gH/561-579 胜■具相同之保護力。然因 gH/561-579 之小鼠抗血
清與病毒顆粒吸附力很弱,若以免疫轉漬法分析抗血清與病毒組成蛋白之
作用,結果亦呈陰性反應,推測gH/561-579 免疫接種提供之保護力可有細
胞性免疫之參與 以小鼠眼睛感染路徑建立潛伏及復發感染動物模式之結
果顯示,KOS品系病毒確能於 BALB/c 雌性小鼠,造成潛伏感染;MacIntyre
品系則否。若感染病毒之前,預先注射合成胜■ gH/561-579,可發現小
鼠眼睛疾病較控制組輕微,感染 42 天後,小鼠之三叉神經節均可測到潛
伏之病毒 (潛伏率達 100%),大幅提高病毒之潛伏率。小鼠續經靜脈注
射 cyclophosphoamide 及 dexomethasone 之誘導後,三叉神經節之病毒
效價即遽降,顯示經此動物模式處理可成功地讓病毒復發,擬續進一步擴
大實驗證明之。 採用「免疫螢光法」及「過氧化氫■─抗過氧化氫■
複合體染色技術,測試病毒於細胞培養中 gH 與 gL 醣蛋白抗原性表現之
變化,及成熟病毒形成之動力學研究中,發現 gL 之表現較 gH 病毒顆粒
早,於感染 1小時後即可偵測到;然於感染 4 小時後,卻呈陰性反應,暗
示此時可能已形成 gH/gL 二元體,組成成熟病毒外膜醣蛋白,而改變了
原來游離醣蛋白之抗原性,以至於 gL 胜■抗體再也無法與之反應。擬續
測試 gH 及 gL 其它部位胜■抗體之反應。

Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) can establish latent
infections in sensory ganglia after primary infection.
Subsequent reactivation is usually fatal in immunocompromised
patients. We planed to study the effect of immunization in mice
with synthetic viral peptides on HSV-1 infection and
reactivation. Expression kinetics of gH&gL glycoproteins in
cells infected with HSV-1 were also studied using antisera
against viral gH and gL peptides. After i.p. immunization with
synthetic peptides mimicking various viral glycoproteins,and
Rho/45-59 pepeides mimicking anticlotting factor,rhodostomin,
BALB/c mice were i.p.challenged with HSV-1 KOS strain. Mice
paralysis percentage was recorded and protection efficiency was
evaluated. Only gH/561-579 peptide (1 LD50 KOS) and mixed
peptides of gH/561-579 and gB/64-78 (100 LD50 KOS) offered
significant protection. The binding activity of gH/561- 579
anti-serum to HSV-1 virions was very weak.This suggests that
the cellular immunity may be involved in the protective
response. The HSV-1 latent infection in BALB/c mice could be
established by ocular inoculation with KOS strain. BALB/c mice
primed with gH /561-579-OVA conjugate before virus inoculation,
eye disease of mice were less severe and virus were detectable
in trigeminal ganglia. Priming with gH/561-579 could thus
increase the efficiency of latency. Subsequent treatment of
latently infected mice with cyclophosphoamide and dexamethasone
was able to amply reduce virus titer in trigeminal ganglia,
indicating the induction of reactivation is successful.
Experiments done by use of "Fluorecent antibody" and
"Peroxidase anti-peroxidase" techniques revealed that the
expression of gL was earlier than that of gH or virions. gL was
detectable 1 hr after infection; but only virions were
detectable 4hr later,indicating gH/gL heterodimer were formed
and gL antigenicity was thus lost.

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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