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研究生:王昱豐
研究生(外文):Yuh-Feng Weng
論文名稱:人類胚胎瘤細胞株NT2之神經分化及應用於侏儒症大白鼠基因治療之研究
論文名稱(外文):Differentiation of human embryonal carcinoma NTera-2 cells into neurons and application for gene therapy of dwarfism rats
指導教授:陳立光陳立光引用關係
指導教授(外文):Li-Kung Chen
學位類別:碩士
校院名稱:國防醫學院
系所名稱:微生物及免役學研究所
學門:生命科學學門
學類:微生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1994
畢業學年度:82
語文別:中文
外文關鍵詞:NT2 細胞維生素甲酸反轉錄病毒載體NT2 cellRetinoic acidRetroviral vector
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近年來利用胎兒的神經組織作移植,被報告可以改善一些因神經內分泌系
統缺失所導致的疾病症狀, 如巴金森氏病 ( Parkinsonism ) 或侏儒症
( Dwarfism ) 等,但囿於法律和人道的問題,胎兒組織的獲得非常困難
。因此尋找一種新的人類神經細胞來源,並以動物模式評估應用基因轉植
和細胞移植來治療上述疾病之可行性,是本論文所要探討的主題。 NT2
細胞為一人類胚胎瘤細胞株,在適當的培養下,NT2 細胞可在體外不斷增
殖, 經維生素甲酸 ( retinoic acid ) 的引導, NT2細胞可分化為包含
神經細胞在內的多種細胞;在此論文中,NT2 細胞在含有 10-5M 之維生
素甲酸的培養液中 4 週,引導其分化成神經細胞,未分化之非神經細胞
以細胞繁殖抑制劑除去後,在倒立顯微鏡下觀察,發現其形態具有標準的
神經細胞特徵,除了緻密的細胞體及細長延伸的突起外並有突觸形成。
此種細胞的純度可達 90% 以上,免疫螢光法顯示已有高分子量神經絲
( high molecular weight neu- rofilament ) 的形成;此種分化後的
NT2 細胞經氚-胸腺嘧啶併入試驗 ( 3H-thymidine incorporation
test )和裸鼠移植試驗証實不再具有腫瘤發生性。經上述實驗証實,利用
此種方式可以作為體外神經細胞培養的一種新的來源。本論文中更進一步
, 將豬的生長激素基因經由反轉錄病毒載體 ( retroviral vector )
轉植入未分化的 NT2 細胞中, 能表現轉植基因的細胞經篩檢葯物篩選後
,以西方點墨法 ( Western blot ) 証實此種細胞可於體外合成及分泌生
長激素, 帶轉植基因的 NT2 細胞經維生素甲酸之引導分化後,經免疫螢
光法確定仍有生長激素合成。此種可分泌生長激素的細胞植入去腦下垂體
之大白鼠體內,由體重之變化顯示可改善其生長遲滯之症狀。所以,根據
本論文的實驗顯示,利用基因轉植後的 NT2 細胞對於改善因神經功能障
礙所導致的疾病具有相當的發展潛力。

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