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本研究探討廣鹽性吳郭魚(Oreochromis mossambicus)鰓是否表現不同型 Na,K-ATPase α subunit基因。本實驗確定TG3(α1)、TH23、TH6、 S23-2、S34-9是Na,K-ATPase α subunit isoform 基因之證據包括: 1.在GCG bank作比對,氨基酸相似性最高的前20個蛋白質都是 Na,K- ATPase α subunit ,有75%-84%以上的相似性。 2.Na,K-ATPase α subunit 的active site氨基酸都相同。 3.除TH6外,以其餘四種作DNA探 針,進行各組織RNA北方式點墨法,都具有Na,K-ATPase α subunit 相近 位置。此外以RT-PCR方法得到一個較大的吳郭魚Na,K-ATPase α subunit DNA片段,長約1685bp,命名為OMα1,可轉譯為一個含565個氨 基酸的蛋白質,進入GCG bank作氨基酸相似性比對,皆與已知動物Na,K- ATPase α1 subunit 有85%以上的相似性,而且active site的氨基酸都 相同,因此推測OMα1是屬於哺乳類Na,K-ATPase α1 subunit的相似基因 。本實驗以2種方法證明不論海水或淡水鰓都具有不同型的Na,K-ATPase α subunit基因表現。海水魚鰓與淡水魚鰓都具有TG3(α1)這型Na,K- ATPaseα subunit,而且基因表現較其它的isoform高。在TG3(α1) isoform,海水魚鰓的基因表現量高於淡水魚鰓。在TH23 isoform,海水 魚鰓基因表現量非常少;淡水魚鰓相對於海水魚而言,基因表現量較高。 至於S34-2與 S34-9 isoform基因只表現在淡水魚鰓。淡水魚鰓比海水魚 鰓表現較多型 Na,K-ATPase α subunit,可以解釋淡水魚鰓和海水魚鰓 完全不一樣的功能機制。本實驗是第一次直接證明廣鹽性吳郭魚鰓有不同 型Na,K-ATPase α subunit基因表現,而且不論是海水或淡水吳郭魚鰓表 現最多的Na,K-ATP ase α subunit是α1 。
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