(18.204.227.34) 您好!臺灣時間:2021/05/17 05:18
字體大小: 字級放大   字級縮小   預設字形  
回查詢結果

詳目顯示:::

我願授權國圖
: 
twitterline
研究生:蔣先慧
研究生(外文):Chiang, Shian-Huey
論文名稱:人類增生細胞核抗原與拓樸酵素I基因在細胞生長週期中之調控
論文名稱(外文):Cell cycle regulation of human PCNA and topoisomerase I genes
指導教授:黃昭蓮
指導教授(外文):Jaulang Hwang
學位類別:碩士
校院名稱:國立陽明大學
系所名稱:生物化學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1994
畢業學年度:82
語文別:英文
中文關鍵詞:生物化學生物學科學增生細胞核拓樸酵素
外文關鍵詞:BIOCHEMISTRYBIOLOGYSCIENCE
相關次數:
  • 被引用被引用:0
  • 點閱點閱:171
  • 評分評分:
  • 下載下載:0
  • 收藏至我的研究室書目清單書目收藏:0
增生細胞核抗原 (proliferating cell nuclear antigen)是一種受到細胞週期調控的蛋白質。過去的研究發現,增生細胞核抗原基因的轉錄在細胞週期中Gl/s過渡時期會有被活化的現象,但是此現象並非由由它基因上的啟動子所負責。 近年來對基因上內插序列(intron)的研究證實,內插序列對基因的調控扮演了重要的角色,而在不同物種之間增生細胞核抗原基因中內插序列的核酸排列又具有高度的相似性,這些發現使我們很有興趣去探討人類增生細胞核抗原基因的內插序列對其基因在細胞週期中表現的重要性。
我們在增生細胞核抗原基因上第一個內插序列中發現了兩個類似轉錄因子E2F結合區域的核酸序列﹔E2P是一種負責調控一些去氧核酸合成所需之蛋白質其基因在Gl/S過渡時期表現的因子。我們利用細胞轉染及核酸一蛋白質結合分析 來探討R2F是否能夠影響增生細胞核抗原基因的表現。結果發現E2F-1的確可以結合在第一個內插序列中期的結合區域上,而且E2F-1可以活化含有第一個內插序列的增生細胞核抗原報導基因六至七倍。但若將內插序列中含有E2F結合區域的一段序列刪除,則失去報導基因被活化的能力。如果將E2F結合序列放入另一個報導基因,SV2-CAT,上則會使此基因被E2F-1所活化。
過去認為抗癌蛋白RB在細胞週期中的G1時期會與E2F結合而抑制E2F的活性,在本結果中,除了證實RB蛋白質會直接地作用在E2F-1的轉錄活化區域而抑制E2F-1的活化能力之外,也發現RB可以經由與E2F,-1的結合而達到調控增生細胞核抗原基因的目的。另外,在細胞週期中E2F-1活化基因轉錄的能力在G1/S過渡時期達到高峰,與增生細胞核抗原基因的週期性表現相互配合。這些結果表示增生細胞核抗原基 因上第一個內插序列與E2F-1和RB的作用很可能便是造成基因在細胞週期中受到嚴格調控的關鍵。
Proliferating cell nuclear antigen (PCNA), as the cofactor of DNA polymerase delta, is an important cell cycle regulatory protein. PCNA transcription is activated at the Gl/S boundary. However, recent studies found that the promoter sequence does not confer the PCNA gene to be cell-cycle regulated. In highly conserved intron 1 sequences, potential binding sites recognized by the transcription factor E2F, which can regulate expression of mouse DHFR and cdc2 genes at the G1/S cell-cycle transition were found.
Through co-transfection and DNA-protein binding experiments, we showed that E2F-1 can bind to PCNA intron l sequences in vitro and transactivate the PCNA-intron l containing reporter gene but not the PCNA intronless reporter gene. 318 bp deletion containing the E2F sites in the PCNA intron l abolishes the E2F-1 responsiveness; while reinsertion of a E2F binding oligonucleotide located in PCNA intron 1 will confer E2F-1 inducibility to the deleted PCNA and heterologous reporter genes.
Overexpression of pRB suppresses E2F-1-mediated stimulation of PCNA activity. The PCNA gene is paralleled by the transactivation ability of E2F-1 which reaches to its maximum at Gl/S transition. These results suggest that the interaction of E2F-1 and pRB with PCNA intron 1 sequence is required for efficient expression of the PCNA gene during the cell cycle.



QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
第一頁 上一頁 下一頁 最後一頁 top
無相關期刊