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研究生:鍾嫈嫈
研究生(外文):Chung Ying Ying
論文名稱:榕樹透翅毒蛾核多角體病毒與苜蓿尺蠖蛾核多角體病毒共轉染之研究
論文名稱(外文):The cotransfection of Perina nuda nuclear polyhedrosis virus (PnNPV) with Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (AcNPV)
指導教授:王重雄;崔文慧
指導教授(外文):Wang Chung Hsiung;Tsuei Wen Huey
學位類別:碩士
校院名稱:輔仁大學
系所名稱:生物學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1995
畢業學年度:83
語文別:中文
論文頁數:64
中文關鍵詞:共轉染核多角體病毒多角體蛋白
外文關鍵詞:cotransfectionnuclear polyhedrosis viruspolyhedrin
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利用兩種共轉染之方法(一)窄寄主域之 PnNPV 及廣寄主域之 AcNPV共
轉染(二) PnNPV 與含 B 型肝炎表面抗原蛋白基因取代多角體基因之
AcNPV 的重組病毒( LCH- 1 )共轉染;前者所獲得之重組病毒以 R 代
表,而後者則以 PL ( PL6 、 PL16 )代表。由吸附係數結果可知,夜
行軍蟲細胞株 ( IPLB SF-21AE ) 細胞及透翅毒蛾細胞株 ( PN-HH )
細胞對 R1 皆有高接受力, PL 對 PN-HH 細胞較 IPLB SF-21AE 細胞接
受力低, R 及 PL 皆可使 IPLB SF-21AE 及 PN-HH 細胞產生核多角體但
感染 PN-HH細胞多角體之產生則較晚表現,在感染後約 20 天可觀察到
。 重組病毒蛋白質表現及病毒基因組之限制圖譜之比較可知,與
AcNPV 之多角體蛋白基因較相似。 NPVs 早期感染率之偵測證實,
AcNPV 及 PnMNPV 之病毒懸浮液內含 690 PFU / ml 即可由多角體基因之
高保守性引子 primer 35 、 primer 36 以 PCR 合成 680bp 之產物;
而含有 5 個 PIB 之 PnMNPV 即可由 PCR 反應偵測出。 比較 PCR 及
ELISA 偵測細胞培養之感染率, PnMNPV DNA 在感染後 12 小時後 PCR
產物有減弱之趨勢, 24 小時即又上升;而病毒之蛋白質在 ELISA 測定
之結果,發現感染後 24 小時才下降,感染後 48 小時即又上升,二者之
間的表現相差 24 小時, DNA 之表現直接影響蛋白質之表現,由此可確
定此早期感染率偵測法之可行性。

Recombinant baculoviruses, R strain and PL strain, with host
range extension were obtained by cotransfections of insect
cells, IPLB SF-21AE and PN-HH cells with two viral
combinations, (1) Perina nuda multiple nuclear polyhedrosis
virus (PnMNPV) and Autographa californica multiple
nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV); (2) PnMNPV and LCH-1
virus (AcMNPV without polyhedrin gene substituted by
hepatitis B virus surface antigen) respectively. In the
test of absorption index, IPLB SF-21AE and PN-HH cells
showed a high susceptibility to R1 virus whereas PN-HH to
PL viruses (PL6 and PL16) was much lower than IPLB SF-21
AE to PL viruses. Both of R and PL viruses have a
PIB-forming capacity in both infected cell lines although
the delayed PIB-forming times of the infected PN-HH cell with
R and PL viruses, about 20 days postinfection, is
observed. The comparison of Protein profile and DNA
restriction endonuclease profile of recombinant viruses with
their parental viruses was also carried out and the
evidence showed the similarity of recombinant viruses
with AcMNPV is much higher than that with PnMNPV. Detection
of NPV infectivity by PCR amplification was also done in this
thesis. Primers 35 and 36 designated from the high
conservative polyhedrin gene were used for detecting PnMNPV
and AcMNPV by the synthetic product of 680 bp
polyhedrin gene fragment. The results had shown that 690 PFU/
ml and 5 PIBs/ml can be detected by this method. It revealed
that this method has a high potential for detecting NPV
infection of insect population in the lab and field.

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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