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研究生:鄭光峰
研究生(外文):Kuang-Fang Cheng
論文名稱:正常與杜顯型肌肉萎縮症之肌母細胞初代培養及生長特性之研究
論文名稱(外文):Study on Growth Characteristics of Normal and Dystrophic Myoblast in Primary Myoblast Cultures
指導教授:劉克明 和 陳世杰
指導教授(外文):Keh-Min Liu & Shih-Chieh Chen
學位類別:碩士
校院名稱:高雄醫學院
系所名稱:醫學研究所
學門:醫藥衛生學門
學類:醫學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1995
畢業學年度:83
語文別:中文
中文關鍵詞:肌母細胞培養肌生
外文關鍵詞:myoblast culturesmyogenesis
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本研究利用細胞免疫化學染色及甲苯藍對比染色的方法,針對初級正常肌
母細胞培養的個樣條件,包括來自肌母細胞的肌肉年齡,酵素的選擇,預
植的時間,種植的細胞密度,及補充的血清濃度,和培養箱的二氧化碳濃
度。藉著培養中每日肌母細胞的增殖與融合的變化,來評估培養條件的差
異,進而得到一個培養常模。且利用這個常模,來比較正常與杜顯型肌肉
萎縮症之肌母細胞的生長特性。實驗結果顯示:在正常的初代肌母細胞培
養,肌母細胞的培養年齡,以剛出生的鼷鼠其體外培養的生長情形較好;
酵素的選擇以 0.25% 胰蛋白酵素 ( trypsin ) 和 0.2% 膠原酵素 (
collagenase )(1:1)混合為佳;而最適當的預植時間 (preplating time)
大約是 15-20 分鐘;種植密度 (seeding density) 應控制在 1 × 105
cells/ml 。 另外,肌母細胞長在 Dulbecco's MEM ,加上 15% 胎牛血
清,在 10% CO2 的培養箱裡, 其增殖能力表現較佳。藉著這個較佳的培
養條件,可發現一個理想良好的肌母細胞生長,在培養第四至第五天時,
大量的肌母細胞增殖會達到高峰,在正常與杜顯型肌母細胞的生長特性方
面: 兩者的倍增時間並不相同,也顯出兩種不同的增殖分化形態。基本
上,正常肌母細胞比杜顯型肌母細胞的倍增時間較短 (約 24-30 小時
),而杜顯型則與纖維母細胞相若 (約三十五小時 ) 。此外,在同一培養
天數肌母細胞融合的百分比而言,杜顯型肌母細胞比正常肌母細胞有較早
融合的傾向,尤其是第五天以後,兩者之比例約為 7 : 5 ( 第七天 )。
本研究提供各種不同之培養條件,肌母細胞肌生的變化情形,並從中建立
了一個培養常模後,可作未來作肌母細胞移植療法的應用;在另一方面,
了解到正常與杜顯型肌母細胞的生長特性後, 除可窺知兩者肌母細胞的
增殖與融合的差異外,並且也提供活體中,杜顯型肌肉組織再生能力不足
,被纖維組織取代過程的解釋依據。

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