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研究生:文爾雅
研究生(外文):Erh-Ya Wen
論文名稱:8-anilinonaphthalene-1-sulfonate與phospholipaseA2結合所需之結構因子
論文名稱(外文):Identifying the structure determinants related to the binding of phospholipase A2 with 8- anilinonaphthalene-1-sulfoante
指導教授:張均昌 張榮賢
指導教授(外文):Chun-Chang Chang ; Long Shung Chang
學位類別:碩士
校院名稱:高雄醫學院
系所名稱:醫學研究所
學門:醫藥衛生學門
學類:醫學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1995
畢業學年度:83
語文別:中文
中文關鍵詞:磷脂脢螢光光譜
外文關鍵詞:phospholipase A2fluorescence spectraANS
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在 ANS-NNA-PLA2 complex 中, ANS 的螢光強度對 pH 的變化隨著 pH的
上升而降低,顯示 ANS 與 NNA-PLA2 的結合是受到離子性作用的影響。
Trp 對 ANS 的能量轉移 -pH 的變化曲線中, 在 pH6.0 左右有一轉折點
, 為 His-48 的 pK , 顯示 PLA2 與 ANS 之間的離子作用是來自
His-48 。 以 p-nitrobenzene methyl ester 甲基化 His-48 ,結果增
加 His-48 周圍環境的疏水性,使得 ANS 的螢光強度及 Trp 對 ANS 能
量轉移皆增強, 在能量轉移對 pH 的變化曲線中, 有兩個轉折點在
pH4.0 及 8.0 ,顯示在 native PLA2 中 ANS 與 PLA2 之間的離子作用
主要是 His-48 , 而 His 周圍的氨基酸電荷亦有關。 此外, 當
NNA-PLA2 的氮端區域被切除後, ANS 與能量轉移立即減弱, 轉折點皆
消失,顯示疏水性作用對 ANS 的結合是絕對必要的,在氮端疏水環境下
, ANS 與 PLA2 的離子作用才存在。在 BM-PLA2 與 ANS 的結合作用中
也有類似的結果, ANS 對 pH 的變化曲線在 pH6.0 及 pH8.0 左右有轉
折點, 為 His-48 及氮端的 a-amino group 的 pK ,顯示 ANS 的結合
主要是靠離子性作用, 而 Trp 對 ANS 的能量轉移對 pH 的變化曲線在
pH4.0 及 pH8.0 也有轉折點, 為 carboxyl group 與氮端 a-amino
group 的 pK , 顯示出 ANS 與 BM-PLA2 的結合主要是靠離子性作用,
而此作用來自 His-48 及周圍的氨基酸電荷。 當 His-48 被甲基化後,
ANS 的螢光與 Trp 對 ANS 的能量轉移增強, 但仍受 pH 的影響,顯示
His-48 及周圍的氨基酸電荷的確參與 ANS 的結合。 此外,以 CNBr 切
除疏水性的氮端區域後, ANS 的螢光強度與能量的轉移皆降低,但是隨
著 pH 的上升而減弱, 顯示仍有離子性作用的存在。 總之, NNA-PLA2
及 BM-PLA2 對 ANS 的結合歸因於疏水性及離子性結合作用。 在
NNA-PLA2 中, 主要是疏水性作用,而在 BM-PLA2 中則是離子性作用。
此外, His-48 的電荷皆參與這兩種 PLA2 對 ANS 的結合。有人曾經報
告 ANS 結合在 PLA2 的活性部位,因此以 ANS 作為探針 (probe) 可以
反應出 PLA2 分子活性部位的結構特性及周圍環境狀態, 因此本實驗結
果對於不同的 PLA2s 和磷脂質作用所必需的結構因子可提供有益資料。

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