跳到主要內容

臺灣博碩士論文加值系統

(44.210.99.209) 您好!臺灣時間:2024/04/15 13:18
字體大小: 字級放大   字級縮小   預設字形  
回查詢結果 :::

詳目顯示

我願授權國圖
: 
twitterline
研究生:鄭貽生
研究生(外文):Jeng Yi-Sheng
論文名稱:菠菜葉綠體threoninetRNA之轉錄與成熟
論文名稱(外文):Transcription and maturation of spinach chloroplast threonine RNA
指導教授:陳良築
指導教授(外文):Chen Liang-Jwu
學位類別:碩士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:分子生物研究所
學門:生命科學學門
學類:生物科技學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1995
畢業學年度:83
語文別:中文
論文頁數:72
中文關鍵詞:葉綠體tRNA轉錄
外文關鍵詞:chloroplastthreonine tRNAprocessingtranscription
相關次數:
  • 被引用被引用:0
  • 點閱點閱:152
  • 評分評分:
  • 下載下載:0
  • 收藏至我的研究室書目清單書目收藏:1
經由 55% 飽和度的硫銨沈澱而得之菠菜葉綠體酵素高鹽萃取液,不僅具
有轉錄活性,同時含有可促使 tRNA 成熟的酵素活性。本試驗利用這些酵
素活性進行生體外(in vitro)分析,研究菠菜葉綠體 tRNA 基因的轉錄與
成熟機制。首先利用 T7 RNA 聚合酵素轉錄合成 RNA 前驅物,其中包含
正股的 threonine tRNA (tRNAThr),再以菠菜葉綠體高鹽萃取液,進行
反應以觀察到 tRNA 的產生是由於酵素萃取液中,含內切核酸酵素的作用
。從反應過程的中間產物消長情形,可知菠菜葉綠體 tRNAThr 的成熟步
驟為(1) 5' 端的剪切;(2) 3' 端的剪切,且 3' 端的剪切作用可能受到
5' 端剪切作用的影響。以菠菜葉綠體高鹽萃取液,直接進行菠菜葉綠體
tRNAThr 生體外轉錄,發現在 tRNA 基因序列內,具有起動子的功能,
且 tRNAThr 的轉錄與 processing 可能是同時進行的。另外在葉綠體中
,由RNase P-like 的酵素參與 tRNA 的 processing 作用;經過測試
nucleotidyl transferase 活性試驗中,由 tRNA 形成片段的變化可得,
此葉綠體高鹽萃取液中,確實具有 nucleotidyl transferase 的酵素活
性,使葉綠體 tRNAThr 以第二型 tRNA 的成熟方式被轉錄與產成反應。
在 Gel retardation 的試驗中,亦可發現在 tRNA 基因內,具有可與葉
綠體蛋白結合的位置。

The spinach chloroplast high salt extract contains both the
transcription and tRNA processing activities. An in vitro
transcription and processing system using spinach chloroplast
high salt extract was used to study the transcription and
maturation of spinach chloroplast threonine tRNA. The tRNA
processing reaction was done with the precursor transcribed by
T7 RNA polymerase or was was directly coupled with the
transcription activity of spinach enzyme extract. Both assays
demonstrated that the 5' leader and 3' trailer were processed
endonucleotically and maturation of the 3' trailer was preceded
with processing of the 5' leader. Transcription study of the
threonine tRNA gene indicated that no termination function was
observed at its 3' end. However, a promoter activity was
observed from an RsaI DNA fragment containing the gene and its
59 bp upstream sequences. A mutant that has its 5' upstream
region completely deleted still produced the tRNA efficiently
indicating that transcription of the threonine tRNA gene does
not require upstream promoter sequences. A protein binding
assay with the tRNA gene indicated that there were protein
binding sites within the coding region. The activity of
nucleotidyl transferase that adds CCA to the 3' end of tRNA was
experimentally demonstrated to be present in the spinach
chloroplast enzyme extract. The results of nucleotidyl
transferase assay indicated that CCA was added one nucleotide
at a time.

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
第一頁 上一頁 下一頁 最後一頁 top