近年來,微量元素在生物臨床醫學上的重要性已逐漸受到重視。微量元素 在人體中,可能影響體內代謝功能以及其它重要的生理作用;然而其對生 物體所造成之效應,往往卻無法直接從其總濃度看出,因此為進一步了解 微量元素對生物體的利用性和毒性,物種分析技術的發展將是一種不可或 缺的需求。本研究利用形體篩分層析法 ( size exclusion chromatography )與感應耦合電漿質譜儀( ICP-MS )的連線技術,發展生 物樣品中砷與硒 的物種分析方法。由於生物樣品的分析常涉及複雜基質 及待測物濃度極低的問題,因此一般物種分析必須具備以下兩個基本條 件: 包括好的分離效果和高靈敏的偵測能力,才能有效的達成分析目標。 本研究建立如下的分析方法,首先將樣品用pH 7.4 之0.1M Tris buffer 流洗液帶進BIOSEP-SEC- S2000 管柱(300×7.8mm),在流洗液的流速 為1.0 mL/min的條件下,將各別分子量的物種依序流洗出,並直接導入 ICP-MS作測定。由實驗的結果顯示,本研究方法除了能達到物種分離的效 果外,還可將儀器測定時造成干擾的基質予以分離。分離出的各物種經由 高靈敏之ICP - MS的偵測,可有效的達成生物樣品中砷與硒物種(與蛋白 質鍵結的物種)分子量及濃度分佈測定。為確認所建立分析方法對砷及硒 濃度測定的可靠性,本研究以標準參考物質( SeronormTM Trace Elements Serum )進行驗證。本方法之偵測極限,砷與硒分別為 0.36 及 5.56 ppb,層析峰滯留時間穩定性誤差在 1% 以內,濃度精密度在 15% 以內。本研究續以所建立的分析技術應用於實際的環境問題上,針對 臺灣西南沿岸罹患烏腳病病人的血液樣品進行分析。希望藉由所建立的分 析方法可提供國內生物及臨床醫學研究上的支援,並期能有助於尋求可能 與烏腳病致病相關的化學因子。
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