在發展中國家腸病原性大腸桿菌是造成嬰兒下痢的主要原因之一。目前已知腸病原性
大腸桿菌在組織細胞上所呈現局部附著性為其重特徵，近年來的研究顯示，腸病原性
大腸桿菌所產生的一種特殊線毛為造成其局部附著性的主要原因，且此線毛構造基因
在腸病原性大腸桿菌之中具相當高之同源性。本研究的目的即在針對已發表的bfpA基
因序列設計出具專一性的PCR 引子組，並期望能與EHEC及ETEC之PCR 引子組合併，建
立短時間檢測EPEC/ETEC/EHEC之多套式PCR 系統。
經由基因序列比對，本實驗室自行設計具檢測專一性的BFP 1 和BFP 2 引子，實驗用
的4 株EPEC菌株皆產生了大小為338bp 之片段。其PCR 條件為94℃，20秒；60℃，30
秒；72℃，30秒進行35個循環，且在此條件下其他的菌株包括腸毒性大腸桿菌，腸侵
入性大腸桿菌，腸凝集性大腸桿菌等以此為PCR 引子均無PCR 反應產物。BFP 1 和
BFP 2 引子針對目標菌之檢測靈敏度可達10 0∼10 1之生菌數，應用於牛奶中腸病原
性大腸桿菌之檢測若配合以MacConkey broth 預培養6∼8小時二組引子之PCR 檢測靈
敏度可達10 0∼10 1之原生菌數。合併BFP 1/BFP2，SLT I5/SLTI3和SLT II5/SLTII3
等引子所發展之多套式PCR ，在牛奶中的EPEC和EHEC檢測應用上，若在進行PCR 前配
合6 ∼8 小時之預培養，其檢測靈敏度可達10 0∼10 1之原生菌數，然於應用在臨床
檢體之檢測上，未經預培養之過程其檢測靈敏度可達10 4∼10 5之原生菌數。
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