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研究生:蔡文杰
研究生(外文):Tsai, Wen-Jie
論文名稱:小老鼠腎臟15-羥基-前列腺素脫氫酵素基因選殖與核酸序列分析之研究
論文名稱(外文):Gene cloning and sequencing of mouse kidney 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase
指導教授:麥愛堂麥愛堂引用關係
指導教授(外文):Mak, Oi-Tong
學位類別:碩士
校院名稱:國立成功大學
系所名稱:生物學系
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1996
畢業學年度:84
語文別:中文
論文頁數:61
中文關鍵詞:前列腺素前列腺素脫氫酵素
外文關鍵詞:prostaglandinprostaglandin dehydrogenase
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前列腺素和其相關的化合物是調控各種生理功能的重要媒介,比較重要
的如血小板凝結,平滑肌的收縮、發炎、免疫反應、生殖系統、泌尿系統
、神經系統和腫瘤細胞的增長,都與前列腺素有直接或間接的關係,因此
,在不同組織細胞中,控制前列腺素的生成與代謝,即可間接調控相關器
官的生理反應。在不同類型的前列腺素,其化學結構上都有相同的
15-hydroxy group,當這 15-hydroxy group 轉變為 15-keto group 時
,前列腺素的生理活性差不多完全消失。在細胞中,此脫氫反應是前列腺
素的第一步代謝反應,而且也是最重要的反應步驟,以防止前列腺素轉移
至其它組織時所產生的生理反應。負責前列腺素第一步代謝的酵素為前列
腺素脫氫酵素(15-hydroxyprostaglandindehydrogenase,簡稱 (15-OH-
PGDH)。 本實驗的主要目的是希望能選殖出小老鼠腎臟 15-OH-PGDH
基因並分析其核酸序列,並與人類 15-OH-PGDH 做比較,以瞭解兩者間之
異同。且可以作為瞭解調控 15-OH-PGDH 基因機制的基礎。 本
實驗以人類胎盤 15-OH-PGDH cDNA 為探針,去篩選小老鼠腎臟 cDNA 基
因庫。篩選所得到的噬菌斑即可能含有小老鼠的 15-OH-PGDH cDNA。再將
這個構築於 lamda 載體中的 cDNA 轉殖到 pBluescript 上;然後再以南
方墨點轉漬法(southern blot analysis)確定之。確定之後即可做基因定
序。由基因定序的結果得知所篩選到的基因全長為 822 個核酸,可轉譯
出 274 個胺基酸。和人類胎盤 15-OH-PGDH cDNA 相比較,其核酸序列有
43﹪的相似性。

Prostaglandins are a family of biologically potent fatty
acids derived fromarachidonic acid. They are ubiquitously
present and have actions in almostevery mammalian tissue. The
important functions mediated by prostaglandinsinclude platelet
aggregation, smooth muscle contraction, growth of tumor cells,
inflammatory and immune response. Prostaglandins also act on
reproductive system, excretory system and nervous system.

Prostaglandins are relatively short-lived in vivo with many of
them being biologically inactivated by the enzyme NAD+-dependent
15-hydroxyprostaglandindehydrogenase (15-OH-PGDH). 15-OH-PGDH
catalyzes the first step in thecatabolic pathway of
prostaglandins. This enzyme oxidizes the 15-hydroxy group to a
keto group with subsequent reduction in biological activity of
prostaglandins. In this study, human placental 15-OH-PGDH
cDNA was used as probes to screen mouse kidney cDNA library. Two
15-OH-PGDH clones were obtained and one of themwas chosen and
excised the pBluscript phagemids containing the cDNA inserts
using helper phage. After infection with E. coli, the pBluscript
containing the cDNA insert was identified by southern blotting
and the cDNA was subjected to nucleotide sequencing by dideoxy
chain-termination method. The mouse kidney 15-OH-PGDH cDNA was
shown to contain 822 bp. Comparing with human placental15-OH-
PGDH, mouse kidney 15-OH-PGDH has 43% similarity with human
placental enzyme.

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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