牛胰臟的去氧核糖核酸水解■-I(簡稱為核酸■)可以利用IAA
（iodoacetate)經由對單一個組胺酸(His-134)來進行特異性的烷基化作用
（alkylation)，而使得核酸■-I完全失去水解DNA的活性。故由此化學方法
可直接證明組胺酸-134是位於核酸■-I的活性中心。另外，從核酸■-I的
三度空間結構可以預測組胺酸-252也參與了此酵素的催化作用，這種現象
促使我們想進一步利用化學方法去證實組胺酸-252甚或其他組胺酸對酵素
活性的重要性。
我們利用DEPC(diethylpyrocarbonate)試劑來化學修飾組胺酸，得到
的結果顯示：核酸■-I的確可被DEPC所去活性(inactivated)，其最適當
pH反應條件是 7.0 (50 mM MES)，隨著DEPC濃度的增加，酵素被去活性的
速率也隨之上升，這種速率是屬於一級反應速率。另外，因為
hydroxylamine 可以將被DEPC作用過的組胺酸上的修飾基移走，而回復成
原來的組胺酸；我們就利用此一特性，把被DEPC所去活性的核酸■-I和
hydroxylamine 一起作用，發現 hydroxylamine 的確可以恢復核酸■-I的
活性， 此種結果清楚地顯示 DEPC 對核酸■-I 的去活性作用，是和組胺
酸有關的。再者， 若加入核酸■-I 的受質：DNA，則 DEPC 對核酸■-I
的去活性作用速率會明顯的下降，因此 DNA 具有保護核酸■-I 的能力。
如果我們對照核酸■-I 和 DEPC 反應前後的胰蛋白■水解■■圖譜作比較
，可以看到有部份■■會產生位移，再進一步分析其胺基酸序列後得知被
DEPC 所化學修飾的是組胺酸-121， 而利用碳-14 標的的放射性 DEPC 所
作的實驗也得到同樣的結果。
這和先前所預期的胺基酸-252 有所出入。可能有以下三種解釋：
1) 組胺酸-121 對核酸■-I 而言也是很重要的。 2) DEPC在本實驗中並
不具有專一性化學修飾功能，以致於產生很多副反應而影響實驗的結果。
3）組胺酸-252 被包埋在分子內而使 DEPC不容易進去反應。
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