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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:莊珮君
研究生(外文):Chuang, Pei-Chun
論文名稱:人類T細胞白血病病毒第一型第二型之基因重組蛋白質疫苗及DNA疫苗之研究
論文名稱(外文):The Development of Human T Cell Leukemia Virus Type I and Type II Recombinant Protein Vaccine and DNA Vaccine
指導教授:陳宜民陳宜民引用關係
指導教授(外文):Chen, Yi-Ming
學位類別:碩士
校院名稱:國立陽明大學
系所名稱:公共衛生學系
學門:醫藥衛生學門
學類:公共衛生學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1996
畢業學年度:84
語文別:中文
中文關鍵詞:人類T細胞白血病病毒試管內轉譯法融合細胞抑制法
外文關鍵詞:in vitro translationpre-immunized serumPost-immunized serumsyncytium inhibition assayHuman T cell Leukemia Virus
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人類T 細胞白血病病毒第一型及第二型(Human T cell Leukemia Virus type I an
d type II,HTLV-I and HTLV-II) 的基因序列約有65% 的相似性。HTLV-I的流行地
區主要是分佈在日本西南部,中部非洲及加勒比海地區。與HTLV-I相關的疾病包括
有成人T 細胞白血病(Adult T cell Leukemia/Lymphoma,ATL)及HTLV-I相關脊髓神
經病變(HTLV-I associated myelopathy/tropical spastic parapraesis,HAM/TSP
) 。HTLV-II 的流行地區則是在中南美洲,其最早是由毛細胞白血病(atipical ha
iry cell leukemia)病人身上所分離出來。而在DNA 疫苗部份,目前已知應用在B
型肝炎、流行性感冒及愛滋病等研究上,並發現DNA 疫苗是可以誘導宿主產生體液
性免疫反應及細胞性免疫反應。因此在本實驗中,即利用HTLV-I及HTLV-II 基因重
組蛋白質疫苗及DNA 疫苗,以兔子做為動物模型,進行免疫注射以觀察其保護性抗
體反應。
在基因重組蛋白質疫苗的部份,我們利用大腸桿菌表現並純化基因重組蛋白質RP-B
1 及RP-IIB,為分別為表現HTLV-I及HTLV-II 外套膜蛋白質第116 至201 胺基酸及
第96至235 胺基酸序列,做為疫苗,對兔子進行六次皮下免疫注射後,再給予HTLV
-I或HTLV-II 的感染,利用西方墨點法及放射免疫沈澱法觀察兔子的抗體反應。由
實驗結果發現,在接受疫苗免疫注射的兔子中,RP-B1 所誘導約免疫反應較RP-IIB
的誘導效果差,且接受RP-B1 疫苗注射的兔子最後並無法免於HTLV-I的感染。而在
RP-IIB疫苗的實驗中,接受疫苗注射的七隻兔子中有六隻兔子可以產生明顯的anti
-HTLV-II外套膜蛋白質的抗體,且其中一隻兔子(R7)於接受HTLV-II 感染細胞chal
lenge 後仍未出現感染。因此RP-IIB基因重組蛋白質疫苗繼續進行第二次的實驗以
再確定其保護的免疫效果。
此外,我們利用融合細胞抑制法(syncytium inhibition assay)發現,R7其免疫注
射後之血清(Post-immunized serum)也含有對抗HTLV-II 病毒融合作用的抗體,與
R7免疫注射前之血清(pre-immunized serum) 相比,其免疫注射後之血清經1:10及
1:40的倍數稀釋後,可抑制HTLV-II 病毒81% 及48% 的融合作用。
由以上基因重組蛋白質疫苗實驗的結果,我們認為RP-IIB的140 個胺基酸為包含HT
LV-II 外套膜蛋白質Bloop ,較僅含36個胺基酸的RP-B1 免疫原性好,因此將此相
對之HTLV-I及HTLV-II 的140 個胺基酸其DNA 基因序列選殖入pcDNA3載體,形成HT
LV-I及HTLV-II DNA 疫苗,命名為pcDNA3-envl 及pcDNA3-envII,同時以這兩種質
體DN A為模版,利用試管內轉譯法(in vitro translation)可以表現HTLV-I及HTLV
-II 外套膜蛋白質,因此將此DNA 疫苗以肌肉注射的方式對兔子進行免疫注射。

QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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