壹、 多種同型金屬硫蛋白在豬肝中的表現中文摘要同源基因是彼此之間
高度相似的基因，而且由於過於類似而經常難以分辨，例如：金屬硫蛋白
。金屬硫蛋白是富含半胱氨酸的金屬結合蛋白，在不同的生物中，由一種
或多種同源基因所控制。獲得不同金屬硫蛋白的傳統方法是仰賴離子交換
管柱層析法分離純化，或是將其基因從基因庫中篩選個別基因，分別送入
重組基因表現系統表現而得之。肝臟是動物體內大量誘發性基因表現的器
官，本論文中，結合RT-PCR及部份蛋白質定序分析法，鑑定豬肝中金屬硫
蛋白的表現受制於一組或多組的同源基因。結果顯示，藉由此方法可推定
所表現的金屬硫蛋白同源基因有十種之多。利用演化樹分析，其中七種是
屬於目前已知的四類金屬硫蛋白中的第一類MT-1，兩種則與第二類MT-2相
近，另外一種可能為偽基因(psuedogene)，但無發現第三類及(MT-3)第四
類(MT-4)。這些金屬硫蛋白同源基因在此命名為pMT-1a至-1g，以及pMT-2
a和pMT-2b。它們皆有其獨自的DNA序列。pMT-1e1和pMT-1e2的 DNA序列
雖然不同但卻載有相同序列的氨基酸密碼。pMT-1b和pMT-1g的cDNA 序列
不同，其中半胱氨酸(cysteine)的密碼被精氨酸(arginine)的密碼所取代
。半胱氨酸在金屬硫蛋白中的保守性極高，所有的動物金屬硫蛋白均是20
個半胱氨酸，缺少一個半胱氨酸的這種情形是首次被發現的。MT-2在位
置10或11通常都載有酸性氨基酸，pMT-2a和pMT-2b卻有異於此，但根據演
化樹分析仍應歸類於MT-2。另外，氨基酸序列比較結果顯示，人與豬的
MT-1相關性很遠，可能暗示人與豬的MT-1同源基因是在人與豬演化分歧之
前即各自獨立演化。由於有十種不同的金屬硫蛋白同源基因在肝臟中大量
表現，本論文指出金屬硫蛋白是由superfamily的基因所轉譯，而且可能
具有組織和功能的專一性，控制每一種基因表現的時間，在發生發育上應
具有重要意義。貳、酵母菌RNA結合蛋白質RBP1之研究中文摘要RBP1是帶
有兩個RNA結合區(RRM)的RNA結合蛋白質。本論文顯示RBP1基因缺陷(
knockout)的酵母菌PSY581生長速率較野生型快，將RBP1蛋白質過量表現
於RBP1基因缺陷(knockout)的酵母菌時，可使酵母菌生長速率明顯減緩，
相較之下，僅有表現載體之酵母菌的生長速率卻無顯著影響，顯示RBP1蛋
白質對細胞生長的影響是專一性的，而且可抑制酵母菌的生長；此外，將
NH2及COOH端除去一部分，僅含RRM1和RRM2區域的蛋白質過量表現時，其
生長速率並無顯著影響，換言之，RBP1蛋白質的NH2-及COOH-端對其抑制
細胞生長的活性是必需的。另外，為了探討RBP1抑制細胞生長的分子機制
以及其可能的生物功能，以差異性顯示法(differential display) 比較
野生型與RBP1基因缺陷的酵母菌中基因表現的情形，發現至少有兩種基因
的表現有差異。其一為與訊號傳遞及能量代謝有關的adenylate kinase
gene (ADK1)，在RBP1基因缺陷之酵母菌中其mRNA表現減少。此外，有一
基因在RBP1基因缺陷之酵母菌中mRNA表現增加，由Northern blot分析得
知其mRNA約為0.75 kb，可能為核醣體蛋白RPL13。由cDNA推測的氨基酸序
列經比對後，與人類breast basic conserved gene 1 (BBC1) 有48.1%相
同，而BBC1是普遍存在於各種生物的，在快速生長的腫瘤和胚胎細胞中表
現量較高。以上結果顯示: RBP1蛋白質的確可透過影響相關基因的表現而
調節細胞的生長速率。
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