寡醣類及烷基醣甘等醣甘類衍生物對生物生理機能之研究越來越多，也
越發現其重要性，因此在各領域之應用需求也不斷增加。利用醣類酵素
可以特異性催化合成寡醣類及其衍生物，本實驗室於Aspergillus niger
培養液中純化出之b-glucosidaseII穩定性高，且有高轉移活性。本研究
利用該酵素之轉移性質探討合成烷基葡萄醣甘(alkyl-glucosides)和纖維
寡醣(cello-oligosaccharides)之最適條件，為提高酵素之利用率，同時
探討酵素之最適固定化條件及固定化後酵素之性質。 b-glucosidaseII
在室溫下可保存長達六個月以上。酵素於20% methanol存在下活性提
高80%，最適溫度和溫度穩定度都由60oC降至50oC。b-glucosidaseII在50
℃下24小時之內可維持溫度穩定，考慮methanol對酵素穩定性之影響，將
反應溫度固定在40℃。在30% methanol和ethanol存在下，分別與2%
cellobiose進行轉移反應6 hr後，分別有83% methyl-glucoside和55%
ethyl-glucoside產生。以15% cellobiose為基質進行轉移反應6hr後，有
超過30% trisaccharide和gentiobiose轉移產物。分析cellobiose、
methyl-glucoside和gentiobiose之KM和kcat知酵素對其水解能力為
gentiobiose > cellobiose > methyl-glucoside，透過轉移反應中
glucose之添加和對水解pNP-cellobioside產物之分析，推測酵素催化轉
移反應之機制。 利用比活性140U/mg之部分純化b-glucosidaseII，以3%
alginate對15U/mL酵素做包埋固定，有最高固定量1.6U/g-bead，固定效
率為9%。以chitopearl為固定載體之共價固定法，使用15U酵素及2.5%
glutaraldehyde活化條件下可達最高固定活性55U/g-bead，和36% 之固定
效率。將酵素與chitopearl bead吸附後之enzyme-chitopearl complex以
glutar-aldehyde (1.5%) 做交聯處理後，酵素之穩定性有明顯提昇。固
定化後酵素之最適反應溫度由60℃上升至65℃。free酵素在55℃、60℃
和65℃下之半生期為35hr、2.3hr和0.33hr，固定化後則延長為125hr
、33.5hr和5.4hr。固定化後酵素之最適pH值均略微向下偏移，固定化前
酵素pH穩定度在pH4.0-5.5，以chitopearl固定後在pH3.0-8.8之間皆可保
持80%以上活性之穩定。