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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:梅惠卿
論文名稱:枯草蛋白酶YaB之蛋白質工程:基質特異性之修飾
論文名稱(外文):Protein engineering of subtilisin YaB:modification of the substrate specificity
指導教授:蔡英傑蔡英傑引用關係
學位類別:博士
校院名稱:國立陽明大學
系所名稱:生物化學研究所
學門:生命科學學門
學類:生物化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1997
畢業學年度:85
語文別:中文
論文頁數:133
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封面
誌謝
目錄
中文摘要
英文摘要
縮寫表
壹、緒論
一、鹼性枯草喊桿菌YaB(Alkalophilic Bacillus YaB)
二、Subtilisin YaB
三、Subtilisin YaB 之基因表現及其調控機制
四、Subtilisin 的基質特異性及蛋白質工程
五、研究策略
貳、材料與方法
一、材料
二、電腦比對模擬 (computer comparative modelling)
三、質體抽取法
四、質體轉形法
五、DNA洋菜膠 (agarose)電泳
六、自洋膠回收DNA片段
七、基因定位突變法
八、核酸定序反應
九、蛋白質含量之測定
十、肌肉纖維蛋白之萃取
十一、酵素純化
十二、SDS-PAGE 電泳
十三、酪蛋白分解活興測定法
十四、elastin-orcein 分解活性測定法
十五、彈性蛋白、膠原蛋白、肌肉纖維蛋白分解活性測定法
十六、酯類受質分解活性測定法
十七、以synthetic peptide 作為基質,測定酵素的 kcat及km
十八、以氧化之insulin A-或 B-chain 為基質,測定酵素反應之起始切點及完全反應切點位置
參、結果
一、以電腦模擬 Subtilisin YaB 高次結構
二、突變酵素的製備
三、酵素受質專一性之研究
四、酵素對胰島素蛋白切點位置之研究
肆、討論
一、酵素受質專一性
二、酵素對胰島素蛋白的切點研究
三、未來研究方向
伍、參考文獻
陸、圖表
含參考書目
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