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研究生:簡宣裕
研究生(外文):Chien, Shiuan-Yuh
論文名稱:開發有益微生物及添加於有機質肥料效益評估之研究
論文名稱(外文):Development of Beneficial Microorganisms Evaluation of the Effect on addition to Organic Fertilizers
指導教授:莊作權莊作權引用關係
指導教授(外文):Tzo-Chuan Juang
學位類別:博士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:土壤學系
學門:農業科學學門
學類:農業化學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1998
畢業學年度:86
語文別:中文
論文頁數:179
中文關鍵詞:米糠菌液蛋白質
外文關鍵詞:bacteriapromoted
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本研究目的是為利用遺傳工程技術將螢光基因轉植於野生溶磷細菌添加於
土壤及堆肥中探討其在堆肥,土壤與玉米根部之存活及族群數目之消長.篩
選溶細菌與固氮細菌添加於金針菇木屑堆肥評估其對作物生長之效益.
封面
目錄
中文摘要
英文摘要
表次
圖次
壹、前言
貳、前人研究
一、微生物肥料種類
(一)固氮菌
1.豆科共生根瘤菌
2.非豆科共生根瘤固氮菌
3.藍綠藻、滿江紅
4.單棲固氮細菌
(二)溶磷菌
1.菌根菌
2.非共生溶磷菌
二、溶磷菌之研究
(一)土壤中磷含量及溶磷菌分佈
(二)溶磷菌數與土壤種類的關係
(三)溶磷真菌與溶磷細菌比較
(四)溶磷菌增進土壤有效磷之機制
1.分泌磷酸酵素解離含磷有機化合物
2.非酵素性解離含磷無機化合物
(五)影響溶磷菌溶磷機制的因子
1.不同氮源及濃度的影響
2.有效性磷存在的影響
3.碳源、鉀源濃度之影響
三、枯草桿菌之研究
四、螢光基因之研究
五、有機質肥料之研究
(一)堆肥發酵過程中成分之變化
(二)堆肥腐熟之判斷
(三)堆肥中之重金屬含量
(四)堆肥製造過程中微生物變化
(五)堆肥過程中毒物質
參、材料與方法
一、供試固氮菌與溶磷菌之篩選
(一)固氮細菌的選用
(二)溶磷細菌的選用
二、螢光基因轉殖溶磷細菌的選殖與生理分析
(一)溶磷細菌的抗藥性分析
(二)螢光基因轉殖溶磷細菌的轉殖與選殖
1.載體的選用
2.質體之淬取
3.將螢光基因轉殖(transformation)於榕磷細菌細胞
(1)勝任細胞(competent Cells)的準備
(2)電孔法(electroporation)轉殖
(3)螢光基因轉殖溶磷細菌之篩選
(三)螢光轉殖溶磷細菌螢光(bioluminescence)的測定
(四)螢光轉殖溶磷細菌穩定性的觀察
1.於固體培養基觀察測定
2.液體培養基批式培養觀察測定
(五)螢光轉殖溶磷細菌與野生溶磷細菌之生理分析與比較
三、以螢光轉殖溶磷細菌當追蹤用菌株,探討外加的溶磷細菌於土壤、堆肥及玉米根部之存活與族群數消長
(一)本研究進行試驗所用的土壤及其性質分析
(二)溶磷細菌施用於土壤,菌株之存活及族群數目測定
(三)溶磷細菌與米糠施用於土壤,菌株之存活及族群數目測定
(四)溶磷細菌添加於堆肥,菌株之存活及族群數目測定
(五)溶磷細菌與米糠添加於堆肥,菌株之存活及族群數目測定
(六)溶磷細菌施用於土壤,溶磷細菌在玉米根部之存活及族群數目測定
四、有益微生物添加於堆肥對作物株重效益之評估
(一)有益微生物添加於金針菇木屑堆肥之後,族群數消長測定
(二)有益微生物添加於金針茹木屑堆肥之後,對作物生長效益影響之評估
(三)有益微生物與米糠添加於堆肥及滅菌的有益微生物與米糠添加於堆肥對作物養分吸收影響之比較
五、蛋白分解菌基因改良及添加于有機質肥料效益之評估
(一)化學藥品及酵素
(二)菌株及質體
(三)含不同起動子(promoter DNA)質之構築
1.pCC1 質體之構築
2.含groEL起動子之DNA序列(如pWJ41)質體之構築
(四)蛋白分解酵素活之測定
(五)含有重組質體之B.subtilis菌株於2xSG固體培養基上蛋白質分解能力之比較
(六)含有重組質體之蛋白分解菌對有機質肥料水溶性無機氮生成量效益的評估
1.菌液之添加量對有機質肥料水溶性無機氮生成之影響
2.不同水分含量之黃豆粕粉與金針菇木屑堆肥於添加蛋白分解菌後水溶性無機氮含量之比較
3.含重組質體之蛋白分解菌對不同有機質肥料水溶性無機態氮含量之影響
肆、結果與討論
一、固氮細菌與溶磷細菌之選用
(一)固氮細菌的選用
(二)溶磷細菌的選用
二、螢光基因轉殖溶磷細菌的選殖與生理分析
(一)野生溶磷細菌的抗藥性分析
(二)螢光轉殖於野生溶磷細菌
(三)螢光轉殖溶磷細菌螢光表現之分析
(四)螢光轉殖溶磷細菌穩定性的分析
(五)螢光轉殖溶磷細菌TARIB9::pAB2與野生溶磷細菌生理比較
1.TARIB9::pAB2與TARIB9培養於液體培養基之pH值比較
2.TARIB9::pAB2與TARIB9於液體培養基所產生有機酸的種類與濃度
3.溶解無機磷能力的比較
三、外來溶磷細菌添加於土壤、堆肥中之存活及族群菌數之探討
(一)溶磷細菌添加於土壤,於群之存活及菌數之消長
(二)溶磷細菌與米糠同時添加於土壤,族群之存活及菌數之消長
(三)溶磷細菌添加於堆肥,族群之存活及菌數之消長
(四)溶磷細菌與米糠同時加入堆肥中,外來溶磷細菌於土壤中的存活及族群消長
四、外來溶磷細菌於玉米根部與土壤存活及族群數目
五、於金針菇木屑堆肥中增殖有益微生物之探討
六、有益微生物添加於金針菇木屑堆肥,對作物生長效益之評估
(一)堆肥添加有益微生物,於不同時間之後施用,對於物株重的影響
(二)有益微生物與米糠添加於堆肥及滅菌的有益微生物與米糠添加於堆肥對作物株重效益與養分吸收影響之比較
1.有益微生物與米糠添加於堆肥及滅菌的有益微生物與米糠添加於堆肥對作物株重效益影響之比較
2.有益微生物與米糠添加於堆肥及滅菌的有益微生物與米糠添加於堆肥對作物養分吸收影響之比較
(1)有益微生物與米糠添加於堆肥及滅菌的有益微生物與米糠添加於堆肥,對芥藍菜養分吸收的影響
(2)有益微生物與米糠添加於堆肥或滅菌的有益微生物與米糠添加於堆肥,對甘藍菜養分吸收的影響
(3)有益微生物與米糠添加於堆肥或滅菌的有益微生物與米糠添加於堆肥,對玉米養分吸收的影響
七、基因工程蛋白分解菌菌株間蛋白酵素活性之比較
(一)表達蛋白分質解酵素之重組質體之構築
(二)含重組質體蛋白分解菌株分泌蛋白酵素能力之增進
1.含重組質體蛋白分解菌於固體培養基上分解蛋白質之能力
2.含重組質體之蛋白分解菌分泌蛋白酵素活性的比較
八、蛋白分解菌液處理有機質對有機質中水溶性無機氮含量的影響
(一)菌液添加量對黃豆粕粉與金針菇木屑堆肥水溶性無機氮含量影響
1.菌液添加量對豆粕粉無機氮含量之影響
2.菌液添加量對金針菇木屑堆肥水溶性無機氮生成量之影響
(二)以菌液處理不同水分含量豆粕粉與金菇木屑堆肥效果之比較
(三)蛋白分解菌之添加對不同有機質肥料水溶性無機氮含量的影響
伍、結論
參考文獻
其他
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