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聚三氫氧基丁酸 (poly-b-hydroxybutyrate, PHB)為細菌體內碳源及 能源的儲存物。此類可由生物分解之聚合物,在許多應用方面,均與傳統石 化原料合成之塑膠相似。我們選用Alcaligenes eutrophus H16為標準菌, 以建立生產PHB細菌及合成基因篩選系統。本研究首先選出高碳氮比例(C/ N=76)及糖蜜(5%)培養基用以生產PHB。結果顯示PHB產量可達到 Alcaligenes eutrophus菌體乾重的44%。使用長度780 bp之phbC基因高保 留片段為探針,利用菌落雜合選殖帶有Alcaligenes eutrophus PHB合成基 因之重組大腸桿菌。為篩選具PHB合成能力之本土菌株,利用PCR篩選並配 合南方雜合法與PHB萃取進行驗證。本研究結果顯示五株本土細菌菌株( Corynebacterium sp. CB, Pseudomonas fluorescenceND, Alcaligenes faecalis NE與未定名菌株T2,NF),經雜合反應,於780 bp處有訊號顯示。 同時,Corynebacterium sp. CB也有長條狀(smear)訊號出現。經由PHB萃 取與穿透式電子顯微鏡觀察,證明本土細菌菌株Corynebacterium sp. CB 與菌株T2的PHB產量分別為0.1 g/l及0.08 g/l。
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