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近年來南台灣石斑養殖孵化場魚苗屢有病毒性神經壞死症 (Viral
nervous necrosis disease, NNV disease) 疫情發生，造成極高的死
亡率。為了解病毒基本特性以提供未 來防治方法之參考，本篇報告利
用本實驗室新建立的石斑魚鰭細胞株 (GF-1 cell line) 來分離罹患
VNN症石斑魚苗體中的病原體，並做特性的分析，包括：以光學及電子顯
微 鏡做病理觀察，用PCR檢定病毒核酸，用螢光免疫染色法檢測病毒
在感染細胞中出現的時 間，並探討溫度與酸鹼值因子對此病毒在細胞
株與活體中感染力之影響。 將石斑病魚分離出來的
病毒，利用GF-1細胞增殖、純化並萃取核酸，以條紋神經 壞死症病
毒 (Striped Jack Nervous Necrosis Virus, SJNNV) 鞘蛋白質基因的兩
組核 酸引子對，(F1,R3) 及 (F2,R3)，進行PCR檢測，結果可得到兩
個引子對的目標核酸片段 T2及T4，故證實病原體是屬於魚類結病毒
(Fish nodavirus)，並命名為GNNV (Grouper nervous necrosis
virus)。純化的GNNV在電子顯微鏡觀察下，為不具外套膜，直徑20-25
nm之圓形至20面體顆粒；經核酸萃取與電泳分析，測到兩段RNA，分子量
分別是1.02× 103 kDa 及0.5×103 kDa；純化GNNV在SDS-PAGE電泳分
析下，可得到兩條主要蛋白質，分 子量分別是為43 kDa及41 kDa。GNNV
在GF-1細胞株及活體中的複製能力受溫度影響，最適 複製溫度範圍是28
- 32℃，低溫則會降低病毒的複製量並延緩活體感染魚發病的時間。
GNNV在強鹼的環境 (pH10、pH12) 下感染力受到的抑制最大。比對臺灣養
殖石斑分離出 來的GNNV與日本養殖石斑魚分離出來的RGNNV的T2核酸
序列，相似度高達99％，顯示GNNV 與日本分離之RGNNV屬於同一類海水
魚NNV。本實驗結果除了建立GNNV的物化特性資料外 ，更證實了GF-1
細胞無論在分離或增殖GNNV方面都有很好的效率。由GF-1細胞所複製出
的GNNV，還能保有在活體內時的特性。
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