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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:唐自強
研究生(外文):Tzyh-Chyang Tang
論文名稱:以電化學法及化學冷光法對DNA分析之研究
論文名稱(外文):DNA Analysis with the Electrochemical and Chemiluminescence Methods
指導教授:黃宣容
指導教授(外文):Hsuan-Jung Huang
學位類別:博士
校院名稱:國立中山大學
系所名稱:化學系
學門:自然科學學門
學類:化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1999
畢業學年度:87
語文別:中文
中文關鍵詞:去氧核糖核酸嘌呤活化玻璃碳電極電化學化學冷光結合常數
外文關鍵詞:DNApurineactivated glassy carbon electrodeelectrochemistrychemiluminescencebinding constant
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論 文 提 要
玻璃碳電極在電化學分析法中為極常用之工作電極,藉由簡單的電化學前處理,就能具有降低DNA中嘌呤的氧化波峰電位、增大偵測靈敏度的效應。在批次溶液中,以差波伏安法偵測時,其線性範圍:鳥糞嘌呤為 0.60 - 30.0μM,腺嘌呤為0.60 - 10.0μM (積聚時間1分鐘,積聚電位0 mV);而在流動注入分析系統中,以安培計量法偵測時,其線性範圍:鳥糞嘌呤為 0.6 - 10.0μM,腺嘌呤為3.0 - 1.0μM(樣品迴管體積 75μl),對於使用樣品量很少的毛細管電泳分離系統而言,可作為DNA分離後的偵測工具之另一種選擇。此外由於能防止嘌呤氧化物吸附於工作電極表面,使得研究學者能夠更方便的以此活化後的玻璃碳工作電極,對DNA進行研究。
EB應用在DNA的分離、偵測及鑑定上已經有很長的時間,但是其方法都侷限於以光譜學之吸收度、螢光光譜分析等方式。本實驗先以活化玻璃碳電極,探討對EB的電化學偵測特性,包括降低EB氧化波峰電位、增大偵測靈敏度,以及防止工作電極表面的鈍化等, 其偵測線性範圍8.0 nM - 5.0μM。這些結果對於以電化學分析法,進行EB/DNA之間反應機制、濃度偵測等的研究,能提供研究學者另一種有效、方便的工具。
而應用前述建立之偵測系統,由推導出之嵌合物與DNA結合反應方程式,進行EB-ctDNA結合常數研究,所獲得的結果,與文獻值有相近的結果;此外應用在ctDNA濃度偵測上,藉由偵測未與DNA結合之EB濃度,可間接測得DNA濃度,在1.5至50.0μM(bp)範圍內,其線性相關係數可達0.9999。
化學冷光可藉由金屬離子催化而增加其發光強度,利用金屬離子與DNA結合之性質,以及自由金屬離子可催化化學冷光之特性,配合前述所推導之公式,可以應用於雙股DNA之濃度偵測。實驗中以銅離子作為DNA之嵌合離子及化學冷光催化劑,對ctDNA之間接偵測,可獲得1.5 - 30.0μM之線性範圍(R = 0.9983)。
封面
謝忱
論文提要
目錄
圖目錄
表目錄
第一章 DNA簡介
1.1 DNA概說
1.2 DNA鹽基的配對及雙螺旋構造
1.3 DNA分子的長度
1.4 DNA分子的熔解
1.5 DNA的超螺旋結構
1.6 參考文獻
第二章 以電化學法對DNA鹼基之分析研究
2.1 DNA鹼基電化學偵測簡介
2.2 實驗部份
2.3 結果與討論
2.4 結論
2.5 參考文獻
第三章 以電化學法對DNA結合常數之研究
3.1 Ethidium Bromide簡介
3.2 實驗部份
3.3 結果與討論
3.5 結論
3.6 參考文獻
第四章 以化學冷光法對DNA之分析研究
4.1 化學冷光法簡介
4.2 實驗部分
4.3 結果與討論
4.4 結論
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