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臺灣博碩士論文加值系統

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研究生:江輝煌
研究生(外文):Hui Huang Chiang
論文名稱:含組織胺基酸官能基鍵結相毛細管柱之合成及應用
論文名稱(外文):The Synthesis and Analytical Application of Histidine Bonded Phase Capillary
指導教授:劉春櫻
指導教授(外文):Liu Chuen-Ying
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:化學研究所
學門:自然科學學門
學類:化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:1999
畢業學年度:87
語文別:中文
論文頁數:106
中文關鍵詞:組織胺基酸鍵結相毛細管柱毛細管電泳
外文關鍵詞:histidinebonded phase capillarycapillary electrophoresis
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摘 要
本研究以未去活化的毛細管柱(長度100cm×內徑100um,有效長度80cm)內蝕刻後,利用 3-氯三甲氧基丙矽烷將毛細管內壁活化,再將組織胺基酸官能基鍵結於毛細管內壁。所合成的毛細管柱分別以元素分析、紅外線光譜等方法鑑定以證明組織胺基酸官能基確實鍵結於毛細管壁,本研究並且由電滲透流的測定,以進一步了解其官能基化的情形,方法乃是利用苯甲醇 (benzyl alcohol) 分別測定未官能基化的毛細管及鍵結相的毛細管之電滲透流的大小及方向。由於在酸性溶液中組織胺基酸官能基鍵結相毛細管內壁具有高正電荷表面,使得電滲流流向反轉至正極,毛細管的分離選擇性較原來空管高。因此本研究進一步將所合成組織胺基酸官能基鍵結相毛細管配合紫外光-可見光吸收偵測器進行對沒食子酸(Gallic acid)、鄰羥基苯甲酸( Salicylic acid) 、兒茶酚( (+)-Catachin ) 、咖啡酸(Caffeic acid) 、表兒茶酚( (-)-Epicatechin)、楊梅黃酮(Myricetin) 、薰草酸(p-Coumaric acid) 及檞皮酮(Quercetin)等七種化合物之分析,藉由電壓、背景電解質種類、濃度、pH值、及分析波長等的改變探討毛細管之分離效果。由分析結果發現最佳偵測波長選擇在 280nm,利用pH 5,10mM 醋酸緩衝溶液為背景電解質,在-20kV的電壓下,可得到最佳的分離條件,七種苯環化合物可完全被分離出來,並且可得到良好的基線解析。
第一章 緒論
第一節 毛細管電泳簡介及原理 1
第二節 毛細管電泳的分離模式 5
2.1 毛細管區帶電泳 5
2.2 微胞電動毛細管層析 6
2.3 毛細管電層析 7
2.4 毛細管等速電泳 8
2.5 毛細管凝膠電泳 9
2.6 毛細管等電聚焦 10
第三節 毛細管電泳的偵測方法 13
1. 紫外光,可見光吸收偵測法 13
2. 螢光偵測法 13
3. 質譜偵測法 14
4. 核磁共振質譜法 15
5. 電化學偵測法 15
(a) 電導度偵測法 16
(b) 電位偵測法 16
(c) 安培偵測法 16
6. 間接偵測法 17
第四節 胺基酸之功能及重要性 19
4.1 組織胺基酸在生化上的重要性 20
4.2 組織胺基酸的代謝 21
4.3 因組織胺基酸代謝異常所引起之疾病 23
4.4 組織胺基酸在無機及生物化學上的應用 23
第五節 分析物之選擇 25
第二章 實驗部分 27
第一節 儀器 27
第二節 藥品 31
2.1 合成用藥 31
2.2 分析用藥 31
第三節 鍵結相毛細管壁的製備 33
3.1 毛細管的前處理 33
3.2 組織胺基酸在毛細管內的衍生化反應 33
3.3 毛細管靜相紅外線光譜鑑定 33
3.4 電滲流之比較 35
第四節 鍵結相毛細管柱之分析應用 36
4.1 標準分析樣品的配製 36
4.2 背景電解質配製 36
4.3 毛細管電泳的實驗過程 36
1. 毛細管的偵測視窗及毛細管的平衡 36
2. 分析前之預處理及分析步驟 37
2.1 分析前之預處理 37
2.2 分析步驟 38
第五節 官能基化矽膠之合成及其性質 39
5.1 矽膠之清洗 39
5.2 含組織胺基酸官能基矽膠之合成 39
5.3 樹脂紅外線光譜及元素分析的測定 39
5.4 樹脂的滴定曲線 40
第三章 結果與討論 41
第一節 未活化毛細管壁之修飾 41
1.1 含組織胺基酸官能基鍵結相毛細管柱的製備 41
1.1.1 組織胺基酸官能基與毛細管壁之反應 41
1.1.2 組織胺基酸在毛細管壁官能基化性質之鑑定 42
第二節 利用含組織胺基酸鍵結相毛細管柱進行電泳分析 52
2.1 植物酚類化合物之分析 52
2.1.1 最佳條件之探討 52
2.1.1.1 偵測波長之選定 52
2.1.1.2 緩衝溶液之選擇 52
第三節 緩衝溶液pH值對分析物的影響 55
第四節 緩衝液濃度對分析物的影響 63
第五節 組織胺基酸與分析物之間作用力的探討 72
5.1 由毛細管電泳法求得的分析物平衡常數
觀察鍵結相毛細管柱對分離的影響 73
5.2 電荷密度和管壁作用力對分離之影響 74
第六節 毛細管的平衡及吸附情況對分離效率的影響 79
第七節 進樣方式對分析之影響 86
第八節 毛細管內徑大小對分離效果的影響 92
第四章 結論 102
第五章 參考文獻 103
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QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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