臺灣博碩士論文加值系統

由於Horseradish Peroxidase（HRP）能有效催化luminol與H2O2反應產生化學冷光，且尿酸（UA）與尿酸氧化□（uricase）反應會產生H2O2，所以本研究以luminol-HRP-CL系統，藉由偵測H2O2，間接測得尿酸濃度。而一般固定酵素的方法以共價鍵鍵結較穩定，所以在此以一種NHS-activated Sepharose Fast Flow的beads分別與酵素HRP, uricase形成共價鍵結來作偵測，其尿酸偵測極限為50 nM，線性範圍到250 μM，相對標準偏差（RSD）為2.14%（10 μM UA, n=20）。血清標準品（含3 μM UA）回收率為91.4%，所加尿酸（4, 6, 8, 10, 12μM）在尿液中的回收率分別為101.5, 100.5, 95.4, 102.3, 104.5％，表示此方法的可行性。

目錄
謝誌………………………………………………………………………….I
摘要………………………………………………………………………….II
目錄…………………………………………………………………….…. III
圖目錄……………………………………………………………………….V
表目錄……………………………………………………………………. VII
第一章尿酸的簡介………………………………………………………….1
1.1尿酸的概說……………………………………………………………1
1.2□呤代謝過程…………………………………………………….…...3
1.3尿酸在臨床上的偵測…………………………………………….…...5
1.4尿酸為某些疾病的指標……………………………………………....9
第二章以化學冷光對尿酸的偵測………………………………………...10
2.1 化學冷光的簡介……………………………………………………..10
2.2 化學冷光的原理……………………………………………………..13
2.3 化學冷光的演進及反應……………………………………………..15
2.4 實驗目的……………………………………………………………..26
第三章實驗裝置…………………………………………………………...31
3.1 儀器裝置……………………………………………………………...31
3.2 實驗試劑……………………………………………………...…….33
3.3 溶液配製..………………………………………………………..….34
3.4 酵素的固定…..………………………………………..………….....36
3.5 流動注入分析系統………………………….…………………….…38第四章 結果與討論……………………….…………………………….….40
4.1溶液流速對luminol-H2O2-HRP化學冷光系統的影響………....…..40
4.2 pH值對H2O2校正曲線的影響…………………………………..….40
4.3 luminol濃度對H2O2校正曲線的影響……………………………...42
4.4 以化學冷光法對H2O2之偵測……………………………………...44
4.5 利用luminol-HRP-CL系統對H2O2偵測的再現性…………….…44
4.6 以化學冷光法對uric acid之偵測……………………………….…49
4.7 利用luminol-HRP-CL系統對uric acid偵測的再現性…………...49
4.8 血清標準品的偵測……………………………………………….…54
4.9 尿酸在尿液中的回收率………………………………………..…...57
4.10 利用luminol-HRP-CL系統對尿液偵測的再現性………...……..57
4.11 本研究方法與一些利用化學冷光偵測uric acid 方法的比較…...57
第五章 結論………………………………………………………………..62
第六章 參考文獻…………………………………………………………..63

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