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研究生:洪昇鵬
研究生(外文):Sheng-Peng Hong
論文名稱:以融合微滴電噴灑游離質譜法消除有機鹽類對蛋白質分析物的干擾
指導教授:謝建台
指導教授(外文):Jentaie Shiea
學位類別:碩士
校院名稱:國立中山大學
系所名稱:化學系研究所
學門:自然科學學門
學類:化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2002
畢業學年度:90
語文別:中文
論文頁數:67
中文關鍵詞:融合微滴電噴灑質譜法界面活性劑電噴灑游離法氣動式霧化器多頻道電噴灑游離質譜法
外文關鍵詞:ESIDetergentFD-ESI/MSMC-ESI/MSPneumatic nebulizer
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論文摘要
本論文的研究目標主要是利用融合微滴電噴灑游離質譜法( Fused-Droplet Electrospray Ionization Mass Spectrometry , FD-ESI/MS )來改進傳統電噴灑游離質譜法在偵測生化分析物所遇到的質譜干擾問題。在實驗中利用添加各式不同濃度比例的鹽類干擾物於分析物樣品中,比較上述兩種游離界面對於鹽類干擾物的容忍程度及其對分析物離子訊號的影響。
電噴灑游離法 ( Electrospray Ionization , ESI )在生化樣品的偵測上佔有非常重要的地位,因為其樣品的游離方式相較於其它的游離法是比較軟性( soft ) 的游離法,樣品不會在游離過程中碎裂成斷片,可以輕易的得到分子離子訊號,另一方面對於大分子量的分析物而言,經由電噴灑游離後會產生多價電荷的分子離子,使得質量掃描範圍上限為二至三千Da的四極柱質量分析器可以進行偵測,此外此游離源容易與各種層析介面相連接,因此使用上非常方便。
然而在使用電噴灑游離質譜法偵測生化樣品時常常會遭遇到鹽類干擾的問題,使得分析物的訊號無法被辨別出來,其中鹽類的來源主要有兩方面,一為樣品本身即含鹽類的存在,例如人類血液中的鈉離子、氯離子,另一方面來自於生化樣品的萃取、分離等製備過程中所加入的緩衝溶液及界面活性劑,所以在生化樣品中常常伴隨著大量的鹽類,而其造成干擾的原因主要在於過量的鹽類會抑制電噴灑的游離效率以及減少大分子離子進入質量分析器的機率;另外,鹽類分子會和分析物分子形成各式不同比例的加成離子更使得圖譜變的複雜,因此以電噴灑游離質譜法分析生化樣品前,一般都需經過去鹽類的步驟。
本研究即是針對解決此干擾現象,使用融合微滴電噴灑游離質譜法將干擾物去除。其作用機制是將電噴灑及游離分別進行,當分析物經霧化器霧化後與電噴灑液滴融合產生帶電荷的分析物液滴,當液滴經揮發與爆裂後便使得分析物帶有電荷,所以分析物得以被質譜儀偵測到;另一方面因為鹽類及干擾物無法溶於電噴灑溶液中,使得干擾物並不會被游離,如此便達到去除鹽類的效果。
在本實驗中利用融合微滴電噴灑游離質譜法成功的去除陽離子的界面活性劑 SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) 及陰離子的界面活性劑 CTAB (Cetyltrimethylammonium Bromide) ,此外對於處理生化樣品所常用的緩衝溶液Tris buffer 也有相當好的效果。相對於電噴灑游離質譜法,不但對於干擾物的容忍極限提高,更使的生化樣品的前處理過程大量的簡化。由以上的實驗證明融合微滴電噴灑游離質譜法對於有機生化樣品的偵測有相當大的幫助。
摘 要…………………………………………………….……………Ⅰ
目 錄…………………………………………………………….……Ⅲ
圖目錄………………………………………………………………….Ⅵ
壹、緒論………………………………………………………………….1
一、電噴灑游離質譜法簡介……………………………………….….1
1.電噴灑游離質譜游離法的發展歷史……………………………1
2.電噴灑游離質譜法中形成帶電離子的機制……………………3
(1) 帶電液滴的生成………………………………………….....4
(2) 溶劑的揮發與液滴的爆裂…………………………...……..5
(3) 氣相離子的生成原因探討………………….………………5
二、鹽類在生化樣品分析上的影響……………………………..……9
1.生化樣品中鹽類的來源…………………………………...……9
2.鹽類對於質譜訊號的干擾………………………………….…..9
3.鹽類中所含的界面活性劑…………………………………….10
(1)界面活性劑的定義……………………………………….10
(2)界面活性劑種類……………………………………….…11
(3)界面活性劑的基本化學性質…………………...………..13
4. 傳統去除鹽類干擾的方法………………………………...…..15
三、融合微滴電噴灑游離質譜法的發展歷史………………………17
1. 融合微滴電噴灑游離質譜法的演化………………………..17
2. 使用融合微滴電噴灑游離質譜法去除鹽類干擾的原理…..22
四、論文目標………………………………………………….…….26
貳、 實驗…………………………………………….………………….28
一、儀器裝置…………………………………………………………28
二、融合微滴電噴灑游離質譜法的組裝…………………….…….30
三、實驗操作流程………………………………………………..…..34
四、試劑及藥品…………………………………………………….35
參、 結果與討論……………………………………………………….39
一、以融合微滴電噴灑游離質譜法去除陰離子型界面活性劑的干擾……………………………………………………..…………39
二、以融合微滴電噴灑游離質譜法去除陽離子型界面活性劑的干擾…………………………………………………….…………45
三、以融合微滴電噴灑游離質譜法去除生化緩衝溶液(Tris buffer)的干擾………………………………………………………….54
四、以融合微滴電噴灑游離質譜法來探討去除非離子型界面活性劑的成效……………………………………………………………58
肆、 結論………………………………………………..……………62
伍、 參考資料…………………………………..………
參 考 文 獻
1. Zeleny, J. “Industry application of electrospray technology,” Phys. Rev. 1917, 10, 1.
2.R. L. Hines, ”Electrostatic atomization, and spray painting”, J. Applied physics, 1966,37,2730.
3.Mack, L. L.; Kralic, P.; Rheude, A.; Dole, M. “Molecular beams of macroions Ⅱ,” J. Chem. Phys. 1970, 52, 4977.
4.Dole, M.; Mack, L. L.; Hines, R. L. “Molecular beams of macroions,” J. Chem. Phys. 1968, 49, 2240.
5.Wong, S. F.; Meng, C. K.; Fenn, J. B. “Multiple charging in electrospray ionization for poly(ethylene glycols),” J. Chem. Phys. 1988, 92, 546.
6.AlekSendriv, M. L.; Gall, L. N.; Shkurov, V. A.; Pavlenko, V. A.; Krasnov, N. V.; Nikolaev, V. I. “Mechanism of ion formation during the electrohydrodynamic sputtering of a liquid into a vacuum,” J. Anal. USSR. 1984, 39, 1268.
7.Bruins, A. P.; Covey, T. R.; Henion, J. D. “Ion-spray interface for combind liquid chromatography / atomospheric pressure ionization mass spectrometry,” Anal. Chem. 1987, 59, 2642.
8.Olivares, J. A.; Nguyen, N. T.; Yonker, C. R.; Smith, R. D. “On-Line mass spectrometric detection for capillary zone electrophoresis,” Anal. Chem. 1987, 59, 1232.
9.Wahl, J. A.; Goodlett, D. R.; Useth, H. R.; Smith, R. D. “Attomole level capillary electrophoresis mass spectrometric protein analysis using 5-μm-i. d. capillaries,” Anal. Chem. 1992, 64, 3194.
10.Gale, D. C.; Smith, R. D. “Small volume and low flow-rate electrospray ionization mass spectrometry of aqueous samples,” Rapid Commun. Mass Spetrom. 1993, 7, 1017.
11.Wilm, S.; Mann, M. “Electrospray and taylor-cone theory dole’s beam of macromolecules at last ﹖,” J. Mass Spectrom. Ion Processes. 1994, 136, 167.
12.Wilm, S.; Mann, M. “Analytical properties of the nanoelectrospray ion-source,” Anal. Chem. 1996, 68, 1.
13.Gomez, A.; Tang, K. “On the structure of an electrostatic spray of monodispers droplets, ” Phys. Fluid. 1994, 65, 404.
14.Dole, D.; Mack, L. L.; Hines, R. L.; Mobley, R. C.; Ferguson, L. D.; Alice, M. B. “Evidence of charge inversion in the reaction of single charged anions with multiply charged macroions,” Chem. Phys. 1968, 49, 2240.
15.Iribarne, J. V.; Thornson, B. A.; “On the evaporation of small ion from charged droplets,” J. Chem. Phys. 1976, 64, 15.
16.Rollgen, F. W.; Bramer-Wegner, E.; Butfering, L. “Field-ion emission from liquid solutions-ion evaporation against electrohydrodynamic disintegration,” J. Phys. 1987, 48, 253-256.
17.Westermeier, R. Electrophoersis in practice, 1th ed.; VCH, 1993
18.L. Tang,; P. Kebarle, “Effect of the conductivity of the electrosprayed solution on the electrospray current. Factors determining analyte sensitivity in electrospray mass spectrometry”,Anal. Chem., 1991, 63,2709.
19.趙承琛; 界面活性基礎, 新改定版; 復文書局; 台灣, 1995.
20.莊恭旭; “Treatment of PAHs in Wastewater Using Surfactant and PAHs Degradation Bacterua”; 國立中山大學海洋環境及工程學系碩士論文, 2000.
21.廖明隆; 界面化學與界面活性劑; 文源書局有限公司, 1994.
22.J. T. Stults,; J. C. Marsters, “ Rapid Commun. Mass Spectrom”., 1991, 5, 359.
23.E. Nordhoff.; A. Ingendoh,; R. Cramer,; A. Overberg,; B. Stahl.; M. Karas,; F. Hillenkamp, “Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry of nucleic acids with wavelength in the ultraviolet and infrared”, Rapid Commun. Mass Spectrom., 1992, 6, 771.
24.M. R. Emmett,; R. M. Caprioli, “Micro-electrospray mass spectrometry: Ultra-high-sensitivity analysis of peptide and proteins”, J. Am. Soc. Mass Spectrom., 1994, 5, 605.
25.C. Liu,; Q. Wu,; A. C. Harm,; R. D. Smith, “On-line microdialysis sample cleanup for electrospray ionization mass spectrometry of nucleic acid samples”, Anal. Chem., 1996, 68, 3295.
26.Loo, R. P. O.; Udseth, H. R.; Smith, R. D. “Evidence of charge inversion in the reaction of singly charged anions with multiply charged macroions, ” J. Phys. Chem. 1991, 95, 6412.
27.Loo, R. P. O.; Udseth, H. R.; Smith, R. D. “A new approach for the study of gas-phase ion-ion reactions using electrospray ionization,” J. Am. Soc. Mass Spectrom. 1992, 3, 695.
28.Loo, R. P. O.; Smith, R. D. “Investigation of gas-phase structure of electrosprayed proteins using ion-molecule reaction,” J. Am. Soc. Mass Spectrom. 1994, 5, 207.
29.Rulison, A. J.; Flagan, R. C. “Scale-up of electrospray atomization using linear arrays of taylor-cones,” Rev. Sci. Instrum. 1993, 64, 683.
30.Kostiainen, R.; Bruins, A. P. “Effect of multiple sprayers on dynamic range and flow rate limitation in electrospray and ion spray mass spectrometry,” Rapid Commun. Mass Spectrom. 1994, 8, 549.
31.Wang, C. S.; Shiea, J. “Applications of multiple-channel electrospray ionization sources for biological sample analysis, ” J. Mass Spectrom. 1997, 32, 247.
32.Lee, C. Y.; Shiea, J. “Gas chromatography connected to multiple -channel electrospray ionization mass spectrometry for the detection of volatile organic compounds,” Anal. Chem. 1998, 70, 2757.
33.Hong, C. M.; Tsai, F. C.; Shiea, J. “A multiple-channel electrospray source used to detect highly reactive ketenes from a flow pyrolyzer,” Anal. Chem. 2000, 72, 1175.
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