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臺灣博碩士論文加值系統

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Author:廖美玲
Author (Eng.):Mei-Ling Liao
Title:利用單分子層技術探討脂質和白蛋白作用力之研究
Title (Eng.):The Study on the Interactions between Lipids and Albumin via Monolayer Technology
Advisor:朱一民朱一民 author reflink
degree:Master
Institution:國立清華大學
Department:化學工程學系
Narrow Field:工程學門
Detailed Field:化學工程學類
Types of papers:Academic thesis/ dissertation
Publication Year:2002
Graduated Academic Year:90
language:Chinese
number of pages:69
keyword (chi):單分子層白蛋白高密度脂蛋白胎牛血清膽固醇
keyword (eng):monolayeralbuminHDLFBScholesterolDSPE-PEG2000EggPCHSPC
Ncl record status:
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本研究主要是藉由各種單分子層實驗,來研究微脂粒界面與血液中蛋白質的相互影響程度。選擇最常被應用且價格最合理的脂質(EggPC、HSPC),及血液中含量最多的白蛋白(Albumin)、作用機制特別的高密度脂蛋白(HDL)和胎牛血清(FBS),探討脂質和蛋白質間的作用情形,並適度添加膽固醇(cholesterol)和DSPE-PEG2000以穩定及修飾脂質。拫據氣/液界面表面張力和表面壓力的變化,推測分子間的相行為和交互作用。結果顯示Albumin可以經自然吸脫附穿透到氣/液界面中,也可插入表層散布的脂質單分子中。其中,Albumin穿入HSPC單分子層中的程度小於EggPC;適度添加cholesterol能阻止Albumin的穿入;添加DSPE-PEG2000會與Albumin有較明顯的作用。驗証長碳鏈脂肪酸的飽和度和脂質組成,會影響Albumin和脂單層膜間的相互作用。至於HDL實驗中,添加cholesterol的脂單層膜有較多HDL穿入其中。胎牛血清(FBS)對純的HSPC影響較少,添加cholesterol、DSPE-PEG2000,反而會因為界面不同組成的分子重組,導致表面壓力下降。其中以HSPC/cholesterol/ DSPE-PEG2000為1/1/0.07的組成下降最明顯。由此可知,近水相的PEG鏈段並未阻擋蛋白質,反而增加蛋白質和脂質膜的作用。微脂粒表面帶有PEG,因而延長生體之循環時間的機制,應不是由於阻止蛋白質吸附。推測PEG會因為親水的性質,和生體內含量多的蛋白質產生鍵結,包覆整體微脂粒,阻擋補體吸附至微脂粒上,免疫系統無法辨識其為外來物,因此延長微脂粒在生物體中循環的時間。

目 錄
摘要 I
目錄 II
表目錄 III
圖目錄 VI
第一章 前言 1
第二章 文獻回顧 1
2.1 單分子層 3
2.1.1 單分子層的形成 3
2.1.2 單分子層的狀態 3
2.1.3 單分子層的鬆弛現象 5
2.1.4 單分子層和雙層結構的相關性………………… ……...6
2.1.5 單分子層技術……………………… ………...9
2.2 微脂粒 10
2.2.1 微脂粒的組成 10
2.2.2 微脂粒的種類 12
2.2.3 微脂粒應用上的瓶頸 13
2.3 血中蛋白質-Albumin 14
2.4 脂質/蛋白質間的作用力 15
第三章 實驗 17
3.1 藥品 17
3.2 儀器 17
3.2.1 表面張力儀(Surface Tensiometer) 17
3.2.2 單分子模型槽(Langmuir-Blodgett Trough) 19
3.2.3 量測原理 19
3.3 方法 20
3.3.1 表面張力的測量 20
3.3.2 單分子層平衡散布表面張力的測量 22
3.3.3 表面壓-每分子佔據面積等溫線的測量 22
3.3.4 固定單分子層佔據面積的表面壓鬆弛曲線 23
3.3.5 蛋白質和磷脂質單分子層的作用情形 23
3.3.5.1 使用表面張力儀量測Albumin穿透到脂質單分子層 23
3.3.5.2 單分子模型槽量測蛋白質和表層脂單層膜的作用情形 24
第四章 結果與討論 26
4.1脂質和白蛋白(Albumin)的界面性質 26
4.1.1 氣/液界面上各脂質成分的界面性質 26
4.1.1.1水溶液中EggPC吸附至氣/液界面的程度 26
4.1.1.2 EggPC、HSPC的平衡散布表面張力 27
4.1.1.3各組成脂質的表面壓-每分子佔據面積等溫線 28
4.1.1.3.1 EggPC和HSPC表面壓-每分子佔據面積等溫線 28
4.1.1.3.2 比較各組成的表面壓-每分子佔據面積等溫線 29
4.1.2 白蛋白(Albumin)吸附及散布到氣/液界面的性質 30
4.1.2.1 Abumin水溶液的表面吸脫附行為 30
4.1.2.2高濃度Albumin注入下層水相的分佈行為 30
4.1.2.3 Albumin的平衡散布表面張力值 30
4.2固定起始表壓下,蛋白質與脂單層膜的作用情形 31
4.2.1 表面張力的量測 31
4.2.2 單分子模型槽的測定 32
4.2.2.1表面壓16.4mN/m,脂質和白蛋白(Albumin)的作用 33
4.2.2.2表面壓30mN/m,脂質和白蛋白(Albumin)的作用 34
4.3壓縮至特定的表面壓後,蛋白質和脂單層膜的作用 35
4.3.1表面壓力為零時, Albumin穿入脂單層膜的程度 35
4.3.2表面壓力為30mN/m時,脂質和Albumin的作用 35
4.3.3表面壓力為30mN/m時,脂質和Albumin的作用 35
4.4壓縮至特定表面壓,固定總面積鬆弛後,蛋白質和脂質膜的作用 36
4.4.1 脂分子層的鬆弛行為 37
4.4.2脂單層經鬆弛作用達穩定後,和Albumin的關係 37
4.4.3 比較脂單層膜鬆弛行為前後和Albumin的相互作用 38
4.5壓縮至特定表面壓,固定壓力鬆弛後,蛋白質和脂質膜的作用 38
4.5.1 界面的脂質單分子層,和白蛋白(Albumin)的關係 38
4.5.2 界面的脂質單分子層,和高密度脂蛋白(HDL)的關係 39
4.5.3 界面的脂質單分子層,和胎牛血清(FBS)的關係 40
第五章 結論 64
參考文獻 66

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