跳到主要內容

臺灣博碩士論文加值系統

(18.204.56.185) 您好!臺灣時間:2022/08/17 14:32
字體大小: 字級放大   字級縮小   預設字形  
回查詢結果 :::

詳目顯示

我願授權國圖
: 
twitterline
研究生:簡家豪
研究生(外文):Jia-Hau Jian
論文名稱:利用幾丁聚醣固定CandidarugosaTypeⅦ脂肪分解酵素之研究
論文名稱(外文):The Immobilization of Candida rugosa Type Ⅶ Lipase on Chitosan Beads
指導教授:吳文騰
指導教授(外文):Wen-Teng Wu
學位類別:碩士
校院名稱:國立清華大學
系所名稱:化學工程學系
學門:工程學門
學類:化學工程學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2002
畢業學年度:90
語文別:中文
論文頁數:76
中文關鍵詞:幾丁聚醣Candida rugosa Type Ⅶ 脂肪分解酵素
外文關鍵詞:Glutaraldehyde
相關次數:
  • 被引用被引用:5
  • 點閱點閱:173
  • 評分評分:
  • 下載下載:0
  • 收藏至我的研究室書目清單書目收藏:0
游離酵素因為反應時環境因子的變化,如溫度、pH值等,而導致活性的喪失,所以使用一次後即需丟棄,相當浪費。經固定化後的酵素不僅對於環境變化穩定性高,且因為固定於擔體上的緣故,使其在回收再利用上變的相當方便。不過雖然固定化酵素有許多優點,但是酵素固定化的效率卻常常不甚理想,因此藉由探討酵素固定化反應的最適條件來提升固定化的效率,是酵素固定化研究中相當重要的一環。
本研究係將Candida rugosa Type Ⅶ 脂肪分解酵素在液相中分別以交聯(cross-linking)及吸附(absorption)兩種方式固定在幾丁聚醣顆粒上。本研究所使用之交聯劑為戊二醛(Glutaraldehyde)。在交聯方面,經實驗後發現,在pH 7.0下,使用0.0025 %(v/v)之Glutaraldehyde和幾丁聚醣進行預先交聯30分鐘後,再使用1%(w/v)之脂肪分解酵素進行固定化反應1小時,可得較佳之固定化比活性30.33 U/mg-protein,其固定化效率為40.3%。吸附方面,在pH9.0下,以1%(w/v)之脂肪分解酵素進行固定化反應2小時,可得較佳之固定化比活性 54.62 U/mg-protein,其固定化效率為64%。在生化性質性質探討方面,水解反應最適pH值由游離酵素的pH9.0變動為pH8.0;水解反應最適溫度則提高至50℃。經固定化後的酵素其pH安定性可由原來游離酵素的pH在5~7延長至pH在5~8;而溫度安定性可由原來游離酵素之40℃以內增加到50℃。當使用批次方式來進行水解反應時,以吸附法所製備之固定化酵素在經過連續10次的回收後,其比活性僅存20%;但以交聯法所製備之固定化酵素回收10次後卻仍可保有64 %以上之比活性。
圖目錄 Ⅲ
表目錄 Ⅴ
第一章 前言 1
第二章 文獻回顧 2
2-1 幾丁質與幾丁聚醣之簡介 2
2-1-1 幾丁質/幾丁聚醣之特性 3
2-1-2 幾丁質/幾丁聚醣之來源 4
2-1-3 幾丁聚醣之應用與發展現況 10
2-2 脂肪酶(Lipase) 10
2-3 酵素固定化 15
2-3-1 酵素固定化的方法 15
2-3-2 利用固定化增加酵素之穩定性 19
2-3-3 穩定性的探討 19
2-4 固定化之擔體 24
2-4-1 非可溶解型擔體 24
2-4-2 可逆溶解型擔體 24
第三章 材料與方法 26
3-1 實驗材料 26
3-2 實驗設備 26
3-3 實驗方法 26
3-3-1 固定化酵素擔體的製備方法 26
3-3-2 酵素活性測定方法 27
3-3-3 蛋白質定量方法 27
3-3-4 酵素固定化方法 28
3-3-5 Glutaraldehyde濃度對酵素固定化的影響 28
3-3-6 交聯(cross-linking)時間對酵素固定化的影響 28
3-3-7 固定化時間對酵素固定化的影響 30
3-3-8 不同pH值對酵素固定化的影響 30
3-3-9 酵素濃度對酵素吸附的影響 30
3-3-10不同pH值對酵素吸附的影響 30
3-3-11不同pH值對固定化酵素脫附的影響 31
3-3-12 酵素水解反應之最適pH值測定方法 31
3-3-13 酵素pH安定性測定方法 31
3-3-14 酵素水解反應之最適溫度測定方法 31
3-3-15 酵素溫度安定性測定方法 32
3-3-16 固定化酵素在批次水解反應下的回收次數 32
第四章 結果與討論 34
4-1 酵素固定化反應之最適條件探討 34
4-1-1 Glutaraldehyde濃度對酵素固定化的影響 35
4-1-2 交聯時間對酵素固定化的影響 36
4-1-3 固定化時間對酵素固定化的影響 44
4-1-4 不同pH值對酵素固定化的影響 46
4-1-5 酵素濃度對吸附法進行酵素固定化的影響 50
4-1-6 pH值對吸附法進行酵素固定化的影響 58
4-1-7 固定化酵素的脫附探討 59
4-2 游離與固定化酵素之水解反應最適pH值和pH安定性 64
4-3 游離與固定化酵素之水解反應最適溫度和溫度安定性 64
4-4 固定化酵素在批次反應下的回收次數 65
第五章 結論與未來展望 72
5-1 結論 72
5-2 未來展望 73
參考文獻 74
Allan, G. G. , Fox, J. R. and Kong, N. A critical evaluation of potential sources of chitin and chitosan , Proc. 1st Int. Conf. on Chitin and Chitosan., MIT Press, Cambridge, MA. 64-78(1977)
An-Lac, N. and Luong, J. H. Diffusion in -carrageenan gel beads. Biotech. and Bioeng. , 28:1261-1267(1986)
Ashford, N. A. , Hattis, D. and Murray, A. E. Industrial prospects for chitin and protein from shellfish wastes , Report no. MIT Sea Grant 77-3, MIT Press, Cambridge, MA, (1977)
Austin, R. R. , Brine, C. J. , Castle, J. E. and Zikakis, J. P. Chitin:New facts of research , Science, 212 : 744-753(1981)
Axen, R. , Heilbronn, E. and Weetall, H. H. Prepara-tion and properties of cholinesterase covalently bound to Seoha-rous. Biochim. Biophys. Acta. , 191:478-481(1969)
Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities — f protein utilizing the protein-dye binding, Anal. Biochem. , 70 : 248-254 (1976)
Cabral, J. M. , Novais, J. M. , Cardoso, J. P. and Kennedy, J. F. Design of immobilized glucoamylase reactor using a simple kinetic for hydrolysis of Starch. J. Chem. Tech. Biotech. , 36:247-254(1986)
Castillo, E. , Casas, R. L. , Quintero, R. and Lopez-Munguia, A. Design of two immobilized cell catalysts by Entrap-ment on gelatin:internal Diffusion Aspects. Enzyme Microb. Technol. , 13:127-133(1991)
Chaplin, M. F. and Bucke, C. Enzyme Technology, P.80, Press Syndicate of the University of Cambridge, New York(1990)
Dalvie, S. K. and Baltus, R. E. Distribution of immo-bilized enzymes on porous membranes. Biotech. and Bioeng. , 40:1173-1180(1992)
Fujii, M. and Tsniguchi, M. TIBTECHJUNE , 9:191-196(1991)
Knorr, D. Use of Chitinous Polymers in Food - A challenge for food research and development , Food Technology. , 38(1) : 85-97(1988)
Lilly, M. D. Stability of immobilized β-galactosidase on prolonged storage. Biotech. and Bioeng. , 13:589-592(1971)
Martinek, K. , Klibanov, A. M. , Goldmacher, V. S. and Berezin, I. V. Biochim. Biophys. Acta. , 485:1-6(1977)
Masa-Aki, S. , Yoshihide, K. and Tsuneo, Y. Immobi-lization of yeast cells with cross-linked chitosan beads. J. Fermen. and Bioeng. , 74(2):90-94(1992)
Muzzarelli, R. A. A. , Tanfani, F. , Emanuelli, M. , Muzzarelli, M. G. and Celia, G. Production of chitosan of superior quality , J. Appl. Biochem. , 3 : 316-321(1981)
Reginald, H. G. and Charles, M. G. Biochemistry, 2nd ed. , Saunders College Publishing(1999)
Sanroman, A. , Chamy, R. , Nunez, M. J. and Lema, J. M. Enzymatic Hydrolysis of Starch in a fixed-bed pulsed flow reactor. Appl. Biochem. Biotech. , 28:527(1991)
Stanley, K. L. , Waters, G. G. , Kelly, S. H. , Chan, B. G. , Garibaldi, J. A. and Schade, J. E. Immobilization of glucose isomerase on chitin with glutaraldehyde and by simple adsorption. Biotech. and Bioeng. , 18:439-442(1976)
Synowiecki, J. , Sihorski, Z. E. and Naczk, M. Immo-bilization of Invertase on krill chitin. Biotech. and Bioeng. , 23:231(1981)
Tanaka, H. , Matsumura, M. and Veliky, I. A. Diffu-sion characteristics of substrates in Ca-Alginate gel beeds. Biotech. and Bioeng. , 26:53-58(1984)
Taylor, R. F. Protein immobilization fundamental and applications.Marcel Dekker, INC. Hong Kong, :105-133(1991)
Tsyn, H. Y. and Tasi, S. Y. Comparison of kinetic and factors affecting the stability of chitin-immobilized naringinases from two fungal sources. J. Ferment Technol. , 66:193(1988)
劉英俊, 汪金追 酵素工程, 中央圖書出版社(1987)
陳國誠 酵素工程學, 藝軒圖書出版社(1989)
王三郎 生物工學入門, 藝軒圖書出版社(1991)
王三郎 應用微生物學, 高立圖書出版社(1994)
江晃榮 幾丁質與幾丁聚醣產業現況與展望, 財團法人生物技術開發中心, (民85)
李正吉 澱粉切枝酵素固定於幾丁質與高分子共聚物之各種生化性質與穩定性的研究, 國立臺灣大學化學工程研究所碩士論文(1996)
邱少華 利用綠膿桿菌K-187發酵蝦蟹殼廢棄物所生產Chitinase之固定化研究, 大葉大學食品工程研究所碩士論文, (1997)
黃定國 多重網狀導流板之氣舉式反應器的設計及其在幾丁聚醣生產上的應用, 清華大學化學工程研究所碩士論文, (1999)
陳國誠, 生物固定化技術與產業應用, 茂昌圖書有限公司, (2000)
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
第一頁 上一頁 下一頁 最後一頁 top