臺灣博碩士論文加值系統

微脂粒可以作為投藥時輸送藥物的一良好載體。然而當微脂粒在人體內，無可避免地會和血液中血漿蛋白質產生交互作用，影響微脂粒本身的穩定性和傳輸藥物的效能，結果將會導致微脂粒被人體的血液系統清除。為了瞭解血漿蛋白質對微脂粒造成的影響，本實驗以微脂粒包覆水溶性物質5(6)-carboxyfluorescein，藉由水溶性物質5(6)-carboxyfluorescein的釋放速率來探討微脂粒的穩定性，及其和血漿蛋白質交互作用的情形。
本研究最主要目的是藉由改質微脂粒的組成，如：添加膽固醇、PEG及選用不同的磷脂質，並模擬微脂粒在人體中和血漿蛋白間交互作用情形，希望能夠解決微脂粒在血液中不穩定的現象，進而提高微脂粒在血液中的穩定性。
實驗結果發現，具有長碳鏈飽和脂肪酸的磷脂質DSPC所組成的微脂粒在人體血漿蛋白質中具有較佳的穩定性；添加膽固醇可增加微脂粒膜表面的穩定性；除此之外，添加PEG可以在微脂粒表面形成一立體障礙，亦可提高微脂粒的穩定性。以上方式皆可降低微脂粒和血漿蛋白質交互作用的機會。

第一章 序論 1
第二章 文獻回顧 3
2.1 微脂粒 3
2.1.1 微脂粒的簡介 3
2.1.2 微脂粒的組成成分 4
2.1.3 微脂粒的結構 6
2.1.4 微脂粒的分類 7
2.2 微脂粒的穩定性 8
2.2.1 物理穩定性 8
2.2.2 化學穩定性 10
2.3 微脂粒在血液中的穩定性 11
2.3.1 影響微脂粒和血漿蛋白質交互作用的因子 11
2.3.2 微脂粒和血漿蛋白質的作用機制 13
2.3.3 避免微脂粒和血漿蛋白質產生交互作用的方法 15
2.4 螢光測量方法及原理 16
第三章 研究動機與目的 18
第四章 實驗藥品與方法 19
4.1 實驗藥品與儀器 19
4.1.1 實驗藥品 19
4.1.2 實驗儀器 20
4.2 實驗方法 20
4.2.1 溶液的配製 20
4.2.2 各式微脂粒的成分組成 21
4.2.3 各式微脂粒的製備 21
4.3 微脂粒穩定性的探討 22
4.3.1 微脂粒穩定性的測定 22
4.3.2 粒徑的測量 23
第五章 結果與討論 24
5.1 以HSPC為系統 25
5.1.1 磷脂質對微脂粒穩定性的影響 25
5.1.2 改質對微脂粒穩定性的影響 26
5.1.3 人體血漿蛋白質對微脂粒穩定性的影響 29
5.2 以DSPC為系統 31
5.2.1 磷脂質對微脂粒穩定性的影響 31
5.2.2 改質對微脂粒穩定性的影響 32
5.2.3 人體血漿蛋白質對微脂粒穩定性的影響 33
第六章 結論 67
參考文獻 69
圖目錄
圖2.1 磷脂質的化學結構 4
圖2.2 膽固醇的化學結構 6
圖2.3 微脂粒的構造 6
圖2.4 微脂粒的類型 8
圖2.5 微脂粒發生融合的機制 9
圖2.6 微脂粒和血漿蛋白質的作用機制 15
圖2.7 Carboxyfluroscein的螢光強度與濃度關係 17
圖5.1 EPC、HSPC微脂粒在37℃下，於牛血清白 35
蛋白及緩衝溶液下的釋放速率
圖5.2 EPC、HSPC微脂粒在37℃下，於牛血清白 36
蛋白及緩衝溶液下的粒徑變化
圖5.3 添加不同量膽固醇之EPC微脂粒在37℃ 37
50mg/ml牛血清白蛋白下的釋放速率
圖5.4 添加不同量膽固醇之EPC微脂粒在37℃ 38
50mg/ml牛血清白蛋白下的粒徑變化
圖5.5 添加不同量膽固醇之HSPC微脂粒在37℃ 39
50mg/ml牛血清白蛋白下的釋放速率
圖5.6 添加不同量膽固醇之HSPC微脂粒在37℃ 40
50mg/ml牛血清白蛋白下的粒徑變化
圖5.7 比較添加不同量膽固醇之EPC、HSPC微脂 41
粒於6小時後，37℃，50mg/ml牛血清白蛋
白下的穩定性
圖5.8 添加不同量膽固醇之HSPC-PEG微脂粒在37℃ 42
50mg/ml 牛血清白蛋白下的穩定性(PEG=1%)
圖5.9 添加不同量膽固醇之HSPC-PEG微脂粒在37℃ 43
50mg/ml 牛血清白蛋白下的粒徑變化(PEG=1%)
圖5.10 添加不同量膽固醇之HSPC-PEG微脂粒在37℃ 44
50mg/ml 牛血清白蛋白下的穩定性(PEG=5%)
圖5.11 添加不同量膽固醇之HSPC-PEG微脂粒在37℃ 45
50mg/ml 牛血清白蛋白下的粒徑變化(PEG=5%)
圖5.12 添加不同量膽固醇之HSPC-PEG微脂粒在37℃ 46
50mg/ml 牛血清白蛋白下的穩定性(PEG=7%)
圖5.13 添加不同量膽固醇之HSPC-PEG微脂粒在37℃ 47
50mg/ml 牛血清白蛋白下的粒徑變化(PEG=7%)
圖5.14 比較添加不同量PEG之HSPC微脂粒在37℃ 48
50mg/ml牛血清白蛋白下，於不同Chol/HSPC
比例下的穩定性
圖5.15 37℃下，HSPC微脂粒(HSPC:Chol:PEG=1:0.5:0.07) 49
在BSA和HSA下之穩定性
圖5.16 37℃下，HSPC微脂粒(HSPC:Chol:PEG=1:0.5:0.07) 50
在不同血漿蛋白質下的穩定性
圖5.17 37℃下，HSPC微脂粒(HSPC:Chol:PEG=1:0.5:0.07) 51
在不同血漿蛋白質下的粒徑變化
圖5.18 41℃下，HSPC微脂粒(HSPC:Chol:PEG=1:0.5:0.07) 52
在不同血漿蛋白質下的穩定性
圖5.19 41℃下，HSPC微脂粒(HSPC:Chol:PEG=1:0.5:0.07) 53
在不同血漿蛋白質下的粒徑變化
圖5.20 DSPC、HSPC微脂粒在37℃下，於HDL及 54
緩衝溶液下的釋放速率
圖5.21 DSPC、HSPC微脂粒在37℃下，於HDL及 55
緩衝溶液下的粒徑變化
圖5.22 添加不同量膽固醇之DSPC微脂粒，在37℃ 56
500μg/ml HDL下的釋放速率
圖5.23 添加不同量膽固醇之DSPC微脂粒，在37℃ 57
500μg/ml HDL下的粒徑變化
圖5.24 比較DSPC微脂粒在6小時後，37℃ 58
HDL和緩衝溶液中添加不同量膽固醇
對穩定性的影響
圖5.25 添加不同量膽固醇之DSPC-PEG微脂粒在37℃ 59
500μg/ml HDL中的穩定性(PEG=7%)
圖5.26 添加不同量膽固醇之DSPC-PEG微脂粒在37℃ 60
500μg/ml HDL中的粒徑變化(PEG=7%)
圖5.27 比較DSPC微脂粒添加不同量膽固醇及 61
PEG(0.07%)，在37℃，500μg/ml HDL
中的穩定性
圖5.28 比較DSPC微脂粒添加不同量膽固醇及 62
PEG(0.07%)，在37℃，500μg/ml HDL
中的粒徑變化
圖5.29 37℃下，DSPC微脂粒(DSPC:Chol:PEG=1:1:0.07) 63
在不同血漿蛋白質下的穩定性
圖5.30 37℃下，DSPC微脂粒(DSPC:Chol:PEG=1:1:0.07) 64
在不同血漿蛋白質下的粒徑變化
圖5.31 41℃下，DSPC微脂粒(DSPC:Chol:PEG=1:1:0.07) 65
在不同血漿蛋白質下的穩定性
圖5.32 41℃下，DSPC微脂粒(DSPC:Chol:PEG=1:1:0.07) 66
在不同血漿蛋白質下的粒徑變化
表目錄
表2.1 常見的磷脂質種類 5
符號表
reticuloendothelial system RES
5(6)-carboxyfluorescein CF
L-α-phosphotidylcholine EPC
Hydrogen soybean phosphotidylcholine HSPC
Distearylphosphatidylcholine DSPC
Human serum albumin HSA
Human serum immunoglobulin IgG
Human serum high density lipoprotein HDL
Albumin from Bovin Serum BSA
DSPE-PEG-2000 PEG

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