臺灣博碩士論文加值系統

摘要
鯉魚消化道組織含有高濃度之鋅，目前已知此鋅來自「與鋅結合之膜蛋白質」。魚體中鋅的代謝與血液之輸送有關，本研究欲了解鯉魚血液中鋅的分佈情形，並了解其對65Zn的親和性，以得知鯉魚血液中是否也有此「與鋅結合之膜蛋白質」，並進一步了解高鋅於鯉魚生理上的意義。
和其他魚類相比，鯉魚全血之鋅含量並未較高。但經過分劃全血後，發現鯉魚血液中的鋅主要是存在於紅血球，其他魚類（如草魚、鰱魚和吳郭魚）卻是主要存在於plasma中。在不同個體之鯉魚，其全血之鋅含量的變化可相差3倍以上；而此鋅濃度的變化主要來自紅血球；白血球及plasma之鋅濃度則幾乎不會變化。草魚、鰱魚和吳郭魚全血鋅濃度之變化主要來自plasma的鋅含量，紅血球與白血球之鋅濃度之變化則較少。
以特異性結合鋅的螯合劑1,10-phenanthroline（1.0 mM）分別與鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚的紅血球反應，抽取其紅血球外膜的鋅，發現鯉魚紅血球大部分的鋅皆會從紅血球的外膜掉落，亦即鯉魚血液中鋅分佈最多的位置在於其外膜（noncytosolic side of the plasma membrane）。鯉魚紅血球鋅濃度的高低取決於其紅血球外膜鋅濃度的高低，紅血球外膜的鋅濃度高時，其紅血球全鋅濃度即高。草魚、鰱魚和吳郭魚紅血球外膜的鋅含量很少，且其外膜之鋅濃度幾乎不會變化；草魚、鰱魚和吳郭魚紅血球之鋅主要位於細胞膜內。
以結構和1,10-phenanthroline相近之1,7-phenanthroline 1.0 mM，和完整之鯉魚紅血球反應，測定紅血球外膜之鋅脫落的量，結果發現1,7-phenanthroline所能抽出鋅的量遠小於1,10-phenanthroline所能抽出的量，且與控制組無甚分別。由此可知1,7-phenanthroline完全沒有將紅血球外膜之鋅抽出的能力，1,10-Phenanthroline能將鋅抽出應為其對鋅特異之螯合能力所致，鋅並非是因為其他物理因素而脫落。比較1,10-phenanthroline於4℃與25℃時，螯合鋅能力之差異，發現1,10-phenanthroline於4℃與25℃抽取鯉魚紅血球外膜之鋅的能力並無不同。測定不同量之鋅被抽出時，其外膜bound-SH group之濃度，由結果可知，當紅血球外膜之鋅掉落越多時，Bound-SH group之濃度亦相對增加，兩者之間呈現高度正相關，可知鯉魚紅血球外膜之鋅似乎是結合在其SH group上，而鯉魚紅血球外膜之「與鋅結合物質」似乎為蛋白質。
以不同量之鯉魚紅血球和一定量的65Zn反應，可知隨著紅血球數量的增加，鯉魚紅血球與65Zn結合之量也隨之增加，然後逐漸達到飽和；鯉魚紅血球和65Zn的”總結合”大於”非特異性結合”。以相同方法將鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚的”特異性結合”進行比較，發現鯉魚紅血球和65Zn”特異性結合”的量遠高於草魚、鰱魚和吳郭魚。即鯉魚紅血球對65Zn之親和性高於草魚、鰱魚與吳郭魚之紅血球。

目錄
中文摘要………………..…………………………………………… .V
英文摘要………………………..…………………………..……… VIII
第一章 研究背景、研究目的與文獻整理…………….….…… 1
第一節 研究背景………………………………………………….…… 1
第二節 研究目的………………………………………………….…… 4
第三節 文獻整理………………………………………………….…… 5
（1）鯉魚………………………....……………….…………….……5
（2）魚類對鋅之需求………………...…...…………………………5
（3）鋅的生理機能……………………………………..…….……...6
（4）血液之一般組成………………………………..………………6
（5）鋅於紅血球細胞膜之轉移……………………………………..7
（6）鋅對紅血球細胞之影響………………………………………..8
（7）紅血球細胞吸收鋅之影響因素………………………………..8
第二章 鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚全血中，鋅之分佈.... 10
第一節 前言……………………………………………….……...…... 10
第二節 材料與方法……………………………………….………...... 11
（1）實驗材料……………………………………………..………. 11
（2）實驗方法……………………………….……………………... 13
第三節 結果…………………………………………………………....18
（1）鯉魚全血及plasma、WBC/thrombocytes和RBC之鋅
濃度……………………………………………………………18
（2）草魚、鰱魚和吳郭魚全血，及plasma、WBC/ thrombocytes和RBC之鋅濃度…………………………..…. 19
（3）鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚血液中蛋白質之分佈……...…..19
（4）鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚血液中鋅分佈之差異………… 20
（5）鯉魚、草魚、鰱魚與吳郭魚血液之一般分析…………...…..21
第三章 鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚紅血球中， 鋅之分佈……………………………...……………………..22
第一節 前言…………………………………………………………... 22
第二節 材料與方法…………………………………………………... 23
（1）實驗材料…………………………………………………….....23
（2）實驗方法………………………………………………..….…. 24
第三節 結果…………………………………………………….….…. 30
（1）以1,10-phenanthroline抽取鯉魚紅血球外膜之鋅………..… 30
（2）以1,7-phenanthroline抽取鯉魚紅血球外膜之鋅………….... 30
（3）不同溫度下，1,10-phenanthroline抽取鯉魚紅血球外膜 之鋅之差別………………………………………………….... 31
（4）鯉魚紅血球外膜之鋅濃度與bound-SH group之關係………31
（5）以1,10-phenanthroline抽取草魚、鰱魚和吳郭魚 紅血球外膜之鋅………………………………………….……32
（6）鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚紅血球中，鋅之分佈…...….…. 32
第四章 鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚紅血球與65Zn之親和性………………………………………………………...……34
第一節 前言…………………………………………………………… 34
第二節 材料與方法………………………………………………….... 35
（1）實驗材料………………………………………………….……35
（2）實驗方法………………………………………………….…... 35
第三節 結果…………………………………………………………… 38
（1）鯉魚紅血球與65Zn之親和性………………………….…….. 38
（2）草魚、鰱魚和吳郭魚紅血球與65Zn之親和性………………38
（3）鯉魚、草魚、鰱魚和吳郭魚紅血球對65Zn結合之比較……39
第五章 綜合討論…………………………..……………………….40
圖表………………………...…………………………………………. 43
參考文獻………………………………………………..……………. 66
謝辭……………………...……………………………………………. 71

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