跳到主要內容

臺灣博碩士論文加值系統

(44.197.230.180) 您好!臺灣時間:2022/08/20 14:20
字體大小: 字級放大   字級縮小   預設字形  
回查詢結果 :::

詳目顯示

我願授權國圖
: 
twitterline
研究生:施如佳
論文名稱:以膠束電泳毛細管層析法分析包裝茶飲品中甲基黃嘌呤類(methylxanthines)及兒茶素類(catechins)含量之探討
論文名稱(外文):Study on the analysis of methylxanthines and catechins in tea drinks by micellar capillary electrophoresis
指導教授:張正明張正明引用關係洪良邦洪良邦引用關係
學位類別:碩士
校院名稱:國立海洋大學
系所名稱:食品科學系碩士在職專班
學門:農業科學學門
學類:食品科學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2002
畢業學年度:90
語文別:中文
論文頁數:80
中文關鍵詞:膠束電泳毛細管層析法甲基黃嘌呤類兒茶素類
外文關鍵詞:micellar electrophoresis capillary chromatographyMECmethylxanthinescatechins
相關次數:
  • 被引用被引用:2
  • 點閱點閱:796
  • 評分評分:
  • 下載下載:0
  • 收藏至我的研究室書目清單書目收藏:3
本研究以毛細管電泳方法,建立包裝茶飲品中三種甲基黃嘌呤(methylxanthines)類衍生物,包括咖啡因(caffeine)、茶鹼(theophylline)、可可鹼(theobromine)等及五種兒茶素(catechins)類化合物,如(+)-catechin (C)、(-)-epigallocatechin (EGC)、(-)-epigallocatechin gallate(EGCG)、(-)-epicatechin(EC)、(-)-epicatechin gallate (ECG)含量之檢驗方法。罐裝、瓶裝及鋁箔包之茶飲料檢體,混合均勻後開封,精確量取1 mL,加入0.025% 偏磷酸溶液4 mL,激烈震盪萃取後,再以親水性PTFE樣品過濾匣過濾後,最後以膠束電泳毛細管層析法(micellar electrophoresis capillary chromatography, MECC)分析定量。利用60 cm × 75 m i.d.之毛細管柱,以含有50 mM SDS之25 mM 磷酸鹽/3 mM 硼酸鹽:乙(94:6,v/v)之pH 7.0緩衝溶液,於20分鐘內完成分析,分離效果及再現性均極佳。經添加八種標準品10、30、40、50 ppm至烏龍茶、梅子綠茶及菊花茶之回收試驗,結果顯示:烏龍茶之回收率為92.6-103.4%,變異係數介於0.12-7.9%;梅子綠茶之回收率為94.6-101.9%,變異係數介於0.9-7.9%;菊花茶之回收率為90.7-101.8%,變異係數介於0.3-5.6%。本方法在菊花茶的最低檢出限量為1 ppm。將方法應用於市售茶飲品中之含量分析,20件檢體均符合於行政院衛生署公告飲料中咖啡因含量標準的規定。
目 錄
頁 次
中文摘要………………………………………………………. I
英文摘要………………………………………………………. II
目錄……………………………………………………………. III
表次……………………………………………………………. IV
圖次……………………………………………………………. V
壹、前言…………………………………………………….… 1
貳、文獻整理…………………………………………………. 3
一、茶之緣起及茶飲料……………………………………. 3
二、茶及茶飲料中具生理活性物質簡介…………………. 4
(一)甲基黃嘌呤(methylxanthine)衍生物………….. 4
(二)兒茶素(catechins)……………………………… 5
三、高效毛細管電泳分析方法(HPCE, High Performance Capillary Electrophoresis ) ……………………. 6
(一)毛細管電泳技術的原理 ………………..………… 6
(二)分離原理…………………………………………… 6
1.電滲流………………………………………………. 7
2.電泳遷移率(e)…………………………………. 8
(三)分離模式 ……………………..…………………… 9
1. 毛細管區帶電泳法……………………………….. 9
2. 膠束電泳毛細管層析法………………………..… 9
3. 毛細管凝膠電泳法……………………………….. 9
4. 毛細管等電聚焦法………………………………… 9
(四)毛細管電泳法在食品分析上的應用……………… 9
四、傳統分析甲基黃嘌呤(methylxanthine)類和兒茶素(catechins)類物質之方法…………………………… 10
(一)紫外線吸收光譜法………………………………… 10
(二)氣相層析法………………………………………… 11
(三)高效液相層析法…………………………………… 11
五、以毛細管電泳法分析…………………………………… 12
(一)毛細管區帶電泳法(CZE)分析…………………… 12
(二)膠束電動毛細管層析法(MECC)分析……………… 13
參、材料與方法………………………………………………. 38
一、檢體來源………………………………………………. 38
二、試藥……………………………………………………. 38
(一)甲基黃嘌呤衍生物及兒茶素類之標準品 …………. 38
(二)溶劑與試藥………………………………………….. 38
(三)親水性PTFE樣品過濾匣…………………………… 38
三、儀器設備………………………………………………. 39
四、實驗溶液之調製………………………………………. 39
(一)標準原液…………………………………………… 39
(二)混合標準溶液……………………………………… 39
五、緩衝溶液之調製………………………………………. 39
六、檢液之製備…………………………………………….. 40
七、鑑別及定量分析…………………..…………………… 40
(一)高效毛細管電泳分析條件………………………….. 40
(二)標準曲線之製作…………………………………..… 40
(三)含量測定…………………………………………… 40
八、回收試驗………………………………………………. 41
九、最低檢出限量….………………………………………. 41
肆、結果與討論………………………………………………. 43
一、毛細管電泳分析條件之探討…………………………. 43
(一)最佳偵測波長之決定……………………………….. 43
(二)緩衝溶液成份及濃度……………………………….. 44
(三)緩衝溶液的pH值….……………………………….. 44
(四)有機修釋劑..………………………………………… 44
(五)電泳電壓強度的影響……………………………….. 44
二、檢體前處理……………………………………………… 45
(一)稀釋液之探討……………………………………….. 45
(三)檢液淨化之探討…………………………………….. 46
三、標準曲線之製作及添加回收試驗…………………….. 46
四、本研究建立之檢驗方法與相關文獻之比較………….. 47
五、市售包裝茶飲品之含量調查………………………….. 48
伍、結論……….………………………………………………. 50
陸、參考文獻…………………………………………………. 74
表 次
頁 次
表一、飲料類衛生標準………………………………………… 16
表二、茶葉成份之機能性分類……………………………….. 17
表三、兒茶素類機能性一覽表……………………………….. 18
表四、數種主要兒茶素經不同濾材過濾後的回收率………. 19
表五、八種茶中物質以高效電泳層析法分析之線性關係….. 20
表六、以毛細管區帶電泳法分析茶中成分…………………. 21
表七之一、以膠束毛細管電泳法分析茶中成分………….…. 22
表七之二、以膠束毛細管電泳法分析茶中成分…………….. 23
表八、Lee and Ong(2000)以液相層析法和毛細管電泳法分析茶中成分………………………………………….. 24
表九、數種主要兒茶素經不同濾材過濾後的回收率……….. 25
表十、八種茶中物質以高效電泳層析法分析之線性關係….. 51
表十一、烏龍茶中添加甲基黃嘌呤類及兒茶素類之回收率….. 52
表十二、梅子綠茶中添加甲基黃嘌呤類及兒茶素類之回收率.. 53
表十三、菊花茶中添加甲基黃嘌呤類及兒茶素類之回收率.. 54
表十四、抽驗市售包裝茶飲品之methylxanthines含量…….. 55
表十五、抽驗市售包裝茶飲品之catechins含量………………. 56
表十六、以CNS方法、HPLC方法及HPCE方法分析茶飲品中caffeine含量之比較……………………………… 57
圖 次
頁 次
圖一、三甲基黃嘌呤類化合物之結構式………….………… 26
圖二、咖啡因和相關化合物的構造………………………… 27
圖三、兒茶素類的結構式…………………………………… 28
圖四、毛細管電泳系統之基本結構……………………….. 29
圖五、電滲流之產生……………………………………….. 30
圖六、以梯度沖提方式的HPLC分離catechins, gallic acid和methylxanthins…………………………………… 31
圖七、咖啡因和兒茶素標準品之毛細管電泳圖…………….. 32
圖八、多元酚混合標準品之毛細管電泳圖, (D,E,F)為比較緩衝液之濃度圖………………………………………… 33
圖九、Horie 和 Kohata以MECC方式分離咖啡因和兒茶素之毛細管電泳圖……………………………………… 34
圖十、Watanabe 等人以MEKC方法來分析兒茶素, 咖啡因和維生素C之毛細管電泳圖………………………….. 35
圖十一、Barroso 和Werken 以MEKC方法來分析咖啡因和兒茶素類等物質之HPCE圖譜…………………….. 36
圖十二、Aucamp 等人以MEKC方法來分析兒茶素類, 咖啡因和維生素C等物質之HPCE圖譜……………. 37
圖十三、茶中八種主要成份依據Watanabe 等學者 (1998) 所提之MECC condition分析之HPCE圖譜………… 58
圖十四、茶中八種主要成份依據Aucamp 等學者 (2000) 所提之MECC condition分析之HPCE圖譜…………. 59
圖十五、methylxanthines及catechins在不同吸光波長下之 HPCE圖譜…………………………………………….. 60
圖十六、不同磷酸鹽離子濃度對methylxanthinesand及 catechins之影響之HPCE圖譜……………………… 61
圖十七、不同硼酸鹽離子濃度對methylxanthines及catechins.之影響之HPCE圖譜……………………………..….. 62
圖十八、不同SDS離子濃度對methylxanthines及catechins之影響之HPCE圖譜……………………………. 63
圖十九、電泳緩衝溶液中pH值對methylxanthines及catechins分析之影響之HPCE圖譜……………………………. 64
圖二十、電泳緩衝溶液中添加有機修飾劑對methylxanthines及catechins分析之影響之HPCE圖譜…………… 65
圖二十一、電泳緩衝溶液添加不同濃度的acetonitrile對methylxanthines及catechins分析之影響…….……… 66
圖二十二、不同電泳電壓對methylxanthines及catechins之影響之HPCE圖譜………………………………. 67
圖二十三、methylxanthines及catechins等八種標準品之毛細管電泳圖……………………………… … … 68
圖二十四、不同種類的稀釋劑對茶檢體中methylxanthines及catechins萃取之影響之HPCE圖譜…………… 69
圖二十五、檢液製備流程圖 ………………………………… 70
圖二十六、烏龍茶中添加40 ppm methylxanthines 及catechins標準品 之對照空白檢體和回收試驗高效毛細管層析圖譜……………….…………….. 71
圖二十七、梅子綠茶中添加40 ppm methylxanthines 及catechins標準品之對照空白檢體和回收試驗高效毛細管層析圖譜…………………….……….. 72
圖二十八、菊花茶中添加40 ppm methylxanthines 及catechins標準品之對照空白檢體和回收試驗高效毛細管層析圖譜……………………………. 73
圖二十九、菊花茶檢體中methylxanthines 及catechins最低檢出限量之高效毛細管層析圖譜…………………. 74
參考文獻
陳清泉,1999。兒茶素之抗癌及抗腫瘤效應。食品工業月刊,(31):9,1-15。
林淑芬,1997。咖啡因(Caffeine)引起之疾患。台北市藥師公會會刊,16(5):50-61。
陳岱全,1982。藥理學。P.269。合記圖書出版社,台北。
陳清泉,2001。茶兒茶素之吸收及代謝。食品工業月刊,33(5):1-13。
郭智宏,1999。自然界抗氧化高手之一∼兒茶素∼兒茶素在生理抗氧化上之作用。食品工業月刊,(31):27-33。
蘇淑珠、黃美齡、張碧秋、劉兆宏、周薰修,2000。利用毛細管電泳分析膠囊及錠狀食品中水溶性維生素之研究。行政院衛生署藥物食品檢驗局調查研究年報第17號,p.331。
林炳承,1996。毛細管電泳導論。pp.1-4。科學出版社,北京,中國人民共和國。
吳振鐸,1982。茶葉的分類(上)。食品工業月刊,14(7):20-24。
尤新輝,1997。簡介茶多元酚成分之機能性及其應用。食品工業,29(3):10-18。
徐發政,2001。台灣製茶工業與市場消長概況。食品資訊,185:33-35。
廖慶樑,2000。茶葉中兒茶素的用途與萃取製程。食品資訊,6:22-25。
錢阜甯,1998。罐裝茶飲料之最適化探討。食品工業月刊,30(10):36-47。
徐英祥,1996。綠茶與健康--(+)利用於機能性食品之可能性。茶訊,No.2,p.26。
尤新輝,1992。從茶葉原料探討茶飲料的品質。食品工業,24(12):16-27。
尤新輝,1993。從茶抽出液探討茶飲料的品質。食品工業,25(8):21-29。
尤新輝,1994。影響茶葉及茶飲料品質因素之探討。食品工業,26(10):36-43。
廖俊清,1994。罐裝茶飲料之製造。食品工業月刊,26(11):43-58。
甘子能,1983。茶中的咖啡因。食品工業月刊, 12(7):19-23。
王文正、李安榮、黃偉展,1999。最新實用藥理學。Pp.74-75。合記圖書出版社,台北。
黃建才、陳介甫、蔡東湖,1999。茶葉及咖啡中咖啡因之含量分析。中醫藥雜誌,10(2):135-141。
原征彥,1998。茶兒茶素(Catechins)類的生理活性作用(1)。In”茶葉多元酚在食品/保健食品產業之製造及應用研討會” p.11。食品工業發展研究所,新竹,台灣,中華民國。
村松敬一郎。1991。茶之科學。P.206。朝倉書店,日本。
石正玲,朱延和。2001。毛細管電泳於生物分子辯識及組合化學之應用。化學,59(3):391-398。
許順吉。1996。毛細管電泳技術及其在中藥分析上的應用。化學,54(3):55-63。
Hewlett-Packard毛細管電泳操作手冊。1992。台灣安捷倫科技股份有限公司,台北。
Beckman coulter中文操作手冊--毛細管電泳分析法之原理及應用。Pp.7-13。美商貝克曼儀器有限公司,台北。
林玉含、徐源泰。1997。以毛細管電泳法分析蜜餞中人工甜味劑與防腐劑之研究。國立臺灣大學園藝學研究所碩士論文。
黃建才、陳介甫、蔡東湖,1999。茶葉及咖啡中咖啡因之含量分析。中醫藥雜誌,10(2):135-141。
蔡右任、阮逸明。1987。茶葉中咖啡因快速簡便測定法之研究。臺灣茶葉研究彙報,6:1-7。
中國國家標準(CNS):飲料類製品檢驗法-咖啡因含量之測定。1982。總號:9432。類號N6174.5。
王美苓、李敏雄。1995。飲料中咖啡因之簡易快速分析。中國農業化學會誌,33(1):114-123。
林玉含、饒麥玲、李樹其。1992。以分光光度法、高效能液相層析法以及氣相層析法分析飲料中咖啡因含量方法之探討。行政院衛生署藥物食品檢驗局調查研究年報第12號,p.130。
A.O.A.C.: Caffeine in tea, Modified Bailey-Andrew method. 15.046, pp.274(1984).
A.O.A.C.: Caffeine in instant tea, Ultraviolet spectrophotomertic and gas chromatography method. 15.047, pp.275(1984).
A.O.A.C.: Caffeine in instant tea, Ultraviolet spectrophotomertic and gas Chromatography method. 15.052, pp.275(1984).
Aucamp, J. P., Hara, Y., Apostolides, Z.. 2000. Simultaneous analysis of tea catechins, caffeine, gallic acid, theanine and ascorbiic acid by micellar electrokinetic capillary chromattography. J. Chromatogr.aphy A. 876:235-242.
Arce Lourdes, Ri’os Angel, Valca’rcel Miguel. 1998. Determination of anti-carcinogenic polyphenols present in green tea using capillary electrophoresis coupled to a flow injection system. J. Chromatogr. A, 827:113-120.
Ascione, P. P. and Chrekian, G.P.. 1975. Automated high pressure liquid chromatographic analysis of aspirin, phenacetin, and caffeine. J. Pharm. Sci., 64:1029-1033.
Barroso, M. B. and Werken, G. van de. 1999. Determination of green and black tea composition by capillary electrophoresis. J. of high resolution chromatography , 22:225-230.
Bonati, M., Castelli D., Latini, R. and Garattini S.. 1979. Comparison of gas liquid chromatography with nitrogen-phosphorus selective detection and high-performance liquid chromatography methods for caffeine determination in plasma and tissues. J. Chromatogr., 164:109-113.
Bradbrook, I.D., 1979. Comparison of thin layer and gas chromatography assays for caffeine in plasma. J. Chromatogr., 163:118-222.
Carlson, Marvin and Thompson, Richard D., 1998. Liquid Chromatographic Determination of Methylxanthines and Catechins in Herbal Preparations Containing Guaran’. J. A.O.A.C. International, 81(4):691-701.
Collins T. F. X., Welsh J. J., Black T. N., and Ruggles D. I.. 1983. A study of the teratogenic potential of caffeine ingested in drinking-water. Food Chem Toxic, 21:763-768.
Darrsgh A., Lambe R.F., Hakkinan D., and D.A. Okelly. 1979. Caffeine in the soft drinks. Lacent I, 1196-1198.
Delbeke, F. T. and Debackere M.. 1983. Simple and rapid method for the determination of caffeine in urine using Extrelut-1 column. J. Chromatogr., 278:418-423.
Fernandez P. L., Martin M. J., Gonzalez A. G. and Pablos F. 2000. HPLC determination of catechins and caffeine in tea. Differentiation of green, black and instant teas. Analyst, 125:421-425.
Finn T., and Cohen H. N.. 1978. Food allergy: fact or fiction? Lacent I, 426-429.
Goto Tetsuhisa, Yoshida Yuko, Kiso Masaaki, and Nagashima Hitoshi. 1996. Simultaneous analysis of individual catechins and caffeine in green tea. J. Chromatogr. A, 749:295-299.
Gupta, V.D.. 1980. Simultaneous quantitation of acetaminophen, aspirin, caffeine, codeine phosphate, phenacetin and salicylamide by high-pressure liquid chromatography. J. Pharm. Sci., 69:110-112.
Gurtto, H. L. and Phillips, B.M.. 1973. Determination of total salicylates, phenacetin and/or total N-acetyl-p-aminophenol, and caffeine in biological samples and analgesic formulations. J. Pharm. Sci., 62(3):383-387.
Holllman, P. C. H., Tijburg, L. B. M., and Chung, S. Yang. 1997. Bioavailability of flavonoids from tea. Critical reviews in food science and nutrition, 37(8):719-738.
Honigberg, I. L., Stewart, J. T. and Smith, M.. 1978. Liquid chromatography in pharmaceutical analysis, IX:determination of muscle relaxant-analgesic mixtures using normal phase chromatography. J. Pharm. Sci., 67(5):675-678.
Horie, H. and Kohata, K. 1998. Application of capillary electrophoresis to tea quality estimation. J. Chromatogr. A, 802:219-223.
Horie, H., Mukai, T., and Kohata, K.. 1997. Simultaneous determination of qualitatively important components in green tea infusions using capillary electrophoresis. J. Chromatogr. A, 758:332-335.
Kwon, K. I., Bourne, D. W. A., Ho, P. C.. 1985. Effect of caffeine on the plasma protein binding and the disposition of ceftriaxone. J. Pharm Pharmacol, 37:836-839.
Larger, P. J., Jones, A. D., Dacombe, C.. 1998. Separation of tea polyphenols using micellar electrokinetic chromatography with diode array detection. J. Chromatogr. A, 799:309-320.
Lee, A. R., Sung, K. S., and Huang, W. H.. 1993. Simultaneous of caffeine, ethoxybenzamide and propylphenazone in oral analgesic tablets by high pressure liquid chromatography. J. Food Drug Anal., 1:351-356.
Lin Jen-Kun, Lin Chih-Li, Liang Yu-Chin, Shoei-Yn Lin-Shiau, and Juan I-Ming. 1998. Survey of catechins, gallic acid, and methylxanthines in green, Oolong, Pu-erh, and black Teas. J. Agric. Food Chem. 46:3635-3642.
Mitoma, C., Sorich, T.J., Neubauer, S.E., 1968. The effect of caffeine on drug metabolism. Life Sci, 7:145-148.
Milon, H. and Antonioli, J.A., 1979. Caffeine determination in rat plasma comparative study of micromethods. J. Chromatogr., 162:223-228.
Piskula, M. K. and Terao. J. 1998. Accumulation of (-)-epicatechin metabolites in rat plasma after oral administration and distribution of conjugation enzymes in rat tissues. Jul; 128(7):1172-8.
Rall TW, 1982. Pharmacologist 24, 277; in The Pharmacological Basis of Therapeutics 1985. 7th Ed,. Eds. By Gilman AG, Goodman LS, Rall T, Murad F, Macmillan, New York, p.594.
Sccott, N.R., Chakraborty, J. and Marks, V.. 1986. Determination of the urinary metabolites of caffeine and theophyllines by high performance liquid chromatography-A comparative study of a direct injection and an ionpair extraction procedure. J. Chromatogr., 375:321-329.
Stagg, G. V. and Millin, D. J. 1439. J. Sci. Food Agr. 26, 1439 .
Strahi, N.R., Lewis, H. and Fargen, R.. 1977. Comparison of gas chromatography and spectrophotomertric methods for determination of caffeines and teas. J. Agric. Food Chem., 25:233-235.
Terada, H., and Sakabe, Y. 1984. High-performance liquid chromatographic determination of theobromine, theophylline and caffeine in food product. J. Chromatogr., 291: 453-456.
Takino, Y., Imagawa, H., Horikawa, H., and Tanaka, A. 1964. The mechianism of tea leaf catechins. III. Formation of a reddish-orange pigment and its spectral relation to spme benzotropolone derivateives. Agric Biol Chem. 28:64-71.
Tan, HIS and Salvador, GC. 1983. Assay of mixtures of phenylpropanolamine hydrochloride and caffeine in appetite suppressant formulations by high-performance liquid chromatography. J. Chromatogr., 261:111-115.
Walker, Jeffrey C., Zaugg, Spencer E., and Walker, Edward B..1997. Analysis of beverages by capillary electrophoresis. J. Chromatogr. A,781:481-485.
Yang, T. T. and Koo, M. W. 1997. Hypocholesterolemic effect of Chinese tea. Pharma. Res. 35(6):505-12.
Zhao Yeping, and Lunte, Craig E.. 1997. Determination of caffeine and its metabolites by micellar electrokinetic capillary electrophoresis. J. Chromatogr.B, 688:265-274.
Yang, T. T. and Koo, M. W. 1997. Hypocholesterolemic effect of Chinese tea. Pharma. Res. 35(6):505-12.
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
第一頁 上一頁 下一頁 最後一頁 top
1. 尤新輝,1992。從茶葉原料探討茶飲料的品質。食品工業,24(12):16-27。
2. 錢阜甯,1998。罐裝茶飲料之最適化探討。食品工業月刊,30(10):36-47。
3. 廖慶樑,2000。茶葉中兒茶素的用途與萃取製程。食品資訊,6:22-25。
4. 王美苓、李敏雄。1995。飲料中咖啡因之簡易快速分析。中國農業化學會誌,33(1):114-123。
5. 尤新輝,1993。從茶抽出液探討茶飲料的品質。食品工業,25(8):21-29。
6. 吳振鐸,1982。茶葉的分類(上)。食品工業月刊,14(7):20-24。
7. 許順吉。1996。毛細管電泳技術及其在中藥分析上的應用。化學,54(3):55-63。
8. 黃建才、陳介甫、蔡東湖,1999。茶葉及咖啡中咖啡因之含量分析。中醫藥雜誌,10(2):135-141。
9. 郭智宏,1999。自然界抗氧化高手之一∼兒茶素∼兒茶素在生理抗氧化上之作用。食品工業月刊,(31):27-33。
10. 尤新輝,1994。影響茶葉及茶飲料品質因素之探討。食品工業,26(10):36-43。
11. 徐發政,2001。台灣製茶工業與市場消長概況。食品資訊,185:33-35。
12. 尤新輝,1997。簡介茶多元酚成分之機能性及其應用。食品工業,29(3):10-18。
13. 黃建才、陳介甫、蔡東湖,1999。茶葉及咖啡中咖啡因之含量分析。中醫藥雜誌,10(2):135-141。
14. 石正玲,朱延和。2001。毛細管電泳於生物分子辯識及組合化學之應用。化學,59(3):391-398。
15. 陳清泉,2001。茶兒茶素之吸收及代謝。食品工業月刊,33(5):1-13。