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研究生:陳輿賢
研究生(外文):Jaosn Y. Chen
論文名稱:兩種蟲生線蟲Steinernemaabbasi及S.carpocapsae(線蟲目:斯氏線蟲科)對斜紋夜蛾(鳞翅目:夜蛾科)之侵染及致病力比較
論文名稱(外文):Infection and pathogenicity of two entomopathogenic nematodes Steinernema abbasi and S. carpocapsae (Nematoda: Steinernematidae) to Spodoptera litura (Lepidoptera: Noctuidae)
指導教授:侯豐男侯豐男引用關係唐立正
指導教授(外文):Roger F. HouLi-Cheng Tang
學位類別:碩士
校院名稱:國立中興大學
系所名稱:昆蟲學系
學門:生命科學學門
學類:生物學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2004
畢業學年度:92
語文別:中文
論文頁數:97
中文關鍵詞:蟲生線蟲斜紋夜蛾共生菌16S rDNA
外文關鍵詞:entomopathogenic nematodeSpodoptera liturasymbiotic bacterium16S rDNA
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本研究利用溫帶品系之蟲生線蟲Steinernema carpocapsae All品系及台灣本島所採集之Steinernema abbasi進行試驗,比較兩者對斜紋夜蛾(Spodoptera litura)第五齡幼蟲之致病力差異。發現以1、5及10隻侵染期幼蟲(infective juveniles, IJs)不同隻數處理下,均可造成寄主死亡,其中又以S. carpocapsae有較高的致病力表現。在25℃下,半致死濃度試驗中,S. carpocapsae之LD50僅需2.94 IJs,而S. abbasi則需4.28 IJs。兩者對於寄主搜尋能力方面則不具有差異。線蟲侵染寄主能力比較,發現S. carpocapsae比S. abbasi具有較強之侵染寄主能力,於不同溫度處理下,S. carpocapsae於高溫處理30℃下之侵染能力較低溫處理20℃下差,而S. abbasi則是於高溫下有較好的侵染能力。當以不同溫度 (15、20、25、30及35℃)下進行一對一生物試驗(one-on-one bioassay),結果顯示兩線蟲種類之致病力表現受溫度處理之影響,其中S. carpocapsae於較低溫度處理時有較好之致病力表現,而S. abbasi則於較高溫度處理時較好。於不同溫度培養兩種線蟲攜帶之共生菌後,兩者僅於活菌數形成單位之對數生長期有些許差異,注射不同濃度之共生菌液於寄主昆蟲體內,發現S. abbasi共生菌之致病力較S. carpocapsae高。此外,進一步利用兩共生菌之DNA,以聚合酶鏈鎖反應(PCR)增幅放大其16S rDNA片段,並經定序後與基因庫(GeneBank)中他種細菌序列以UPGMA分析其相似類群關係中也顯示,S. abbasi之共生菌應屬於Xenorhabdus sp.而非先前學者所認知之Pseudomonas oryzihabitans,再經六種限制酵素進行限制片段長度多型態(RFLP)截切後,推斷S. abbasi及S. carpocapsae之共生細菌應為不同種類。
Comparison of pathogenicity of Steinernema carpocapsae All strain and S. abbasi to Spodoptera litura 5th larvae was conducted in this study. When applied different numbers from 1, 5 and 10 infective juveniles (IJs), both could kill hosts, but the virulence of S. carpocapsae is higher than that of S. abbasi. The LD50 values of S. carpocapsae and S. abbasi to S. litura larva were 2.94 IJs/ larva and 4.28 IJs/ larva, respectively. The host searching ability was not significantly different between two species, however, at different temperatures, the invading ability of S. carpocapsae is higher than that of S. abbasi, but the invading ability of S. carpocapsae to S. litura larva is better at 20℃, than at 30℃, while the invading ability of S. abbasi was contrary. The one-on-one bioassay of two entomopathogenic nematodes at different temperatures showed that the pathogenicity of both species was influenced by temperatures, the pathogenicity of S. carpocapsae was better at lower temperature, whereas that of S. abbasi was better at higher temperatures. The symbiont growth rates of two entomopathogenic nematodes were similar at OD550nm absorbance but less different in log phase of colony forming units (CFUs) measurement when incubated in nutrient broth, but the larvicidal activity of S. abbasi symbiont is higher than that of S. carpocapsae symbiont to S. litura. After amplifying the symbiont partial 16S rDNA sequence of two entomopathogenic nematodes, we compared the similarity grouping dendrogram applied with UPGMA method and restriction fragment length polymorphism (RFLP) pattern digested with 6 restriction enzymes. It was suggested that the symbiotic bacterium of S. abbasi belongs to the genus Xenorhabdus but not conspecific to X. nematophilus.
中文摘要∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙1
英文摘要∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙2
前言∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙4
文獻摘述∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙6
材料與方法∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙20
結果∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙30
討論∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙40
結論∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙48
參考文獻∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙49
圖表∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙71
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