本研究之目的為利用含腈水合酶(nitrile hydratase, NHase)與醯胺酶(amidase)兩酵素系統的丙烯醯胺生成菌，以生物處理法將丙烯腈轉換至高價值的商業產品丙烯醯胺，並控制不同的生長環境因子，使菌株具有較佳轉換丙烯腈速率，且藉由添加化學物質以抑制醯胺酶的活性，使所獲得的丙烯醯胺能持續累積不易轉換至丙烯酸與氨。實驗結果顯示由PAN人造纖維製造廠廢水處理廠活性污泥中所分離篩選出菌株Mesorhizobium sp.具有轉換丙烯腈累積丙烯醯胺的能力，且該菌不具有質體；其最佳生長溫度在以R2A作為培養基時是37oC。
由菌株Mesorhizobium sp.轉換丙烯腈累積丙烯醯胺的特性可知，於丙烯腈濃度小於976.2 mg/l與培養環境的pH值為7.5~8.2時，菌株具有較佳轉換丙烯腈累積丙烯醯胺的能力。由額外添加基質之實驗結果顯示，添加濃度494.0 mg/l酵母抽出物對菌株生長有所助益，可增加菌株轉換丙烯腈累積丙烯醯胺效率，於26.7小時濃度964.5 mg/l丙烯腈的轉換率約100%；但添加葡萄糖與丙酮酸鈉卻會降低菌株Mesorhizobium sp.轉換丙烯腈的效率，於反應時間45.4小時濃度964.5 mg/l丙烯腈之轉換率約52.6%。
促進菌株腈水合酶與抑制其醯胺酶的活性之不同影響因子研究結果發現，所添加化學物質中，尿素、丙醛與丁醛皆能抑制醯胺酶活性，亦能誘導促進腈水合酶的活性，使丙烯腈轉換丙烯醯胺百分率增加，其中以丙醛效果最好，添加濃度207.4 mg/l丙醛時，於3.8小時丙烯腈轉換丙烯醯胺百分率約近似100%；而添加苯基醛則會輕微抑制菌株腈水合酶活性，對抑制其醯胺酶活性則無助益。對菌株腈水合酶而言，其以鈷離子作為輔助因子時具有較佳活性；而添加0.1 mg/l Ag2SO4時會輕微抑制腈水合酶的活性影響其轉換丙烯腈能力，濃度492.9 mg/l丙烯腈於29.1小時其轉換率為54.9%，當Ag2SO4濃度增加至0.5 mg/l時菌株轉換丙烯腈能力完全喪失；此外，添加EDTA、己內醯胺與丙烯醯胺對菌株腈水合酶沒有影響。
綜合上述研究結果，若要將菌株Mesorhizobium sp.運用於處理含丙烯腈(濃度約495.0 mg/l)的廢水以產生丙烯醯胺，可將反應條件設定為：添加丙醛於含鈷離子之磷酸鹽緩衝溶液中，並控制培養環境的pH值在7.5~8.2間，則菌株Mesorhizobium sp.應能於短時間內將丙烯腈轉換成丙烯醯胺，且丙烯醯胺不易轉換至丙烯酸與氨。

Acrylamide, a commodity chemical widely used to produce polymers for application in sewage treatment, petroleum recovery papermaking and textile sizing industrial processes, is manufactured from acrylonitrile mainly by chemical processes. Nevertheless, acrylonitrile biotransformation to acrylamide has been also developed up to the industrial scale.
Based on the high-value of acrylamide, the purpose of this study was to use the microorganisms that have both enzymes of nitrile hydratase (NHase) and amidase to produce acrylamide from acrylonitrile. In order to obtain acrylamide, it was necessary to realize the physiological conditions of the bacteria and adjust the suitable environmental factors for the bacteria to convert acrylonitrile into acrylamide effectively. Furthermore, the percentage of acrylonitrile converted to acrylamide could be raised by adding chemicals to enhance the activity of NHase and inactivate amidase.
Mesorhizobium sp., which was isolated from the activated sludge of the polyacrylonitrile (PAN) fiber manufacture wastewater treatment system, contained both enzymes NHase and amidase, and could convert acrylonitrile to acrylamide. The optimum growth temperature of Mesorhizobium sp. was 37oC by utilizing R2A as growth medium. When the pH values were between 7.5 and 8.2, Mesorhizobium sp. had the better ability to convert acrylonitrile to acrylamide.
The growth of Mesorhizobium sp. and the percentage of acrylonitrile converted to acrylamide could be increased by adding yeast extract. In the presence of yeast extract concentration was added about 494.0 mg/l, 964.5 mg/l acrylonitrile could be completely converted within 26.7 hours. On the other hand, the conversion rate of acrylonitrile would decrease as adding glucose and sodium pyruvate; 964.5 mg/l acrylonitrile was converted about 52.6% within 45.4 hours.
Addition of urea, propionaldehyde, or butyraldehyde could not only enhance the activity of NHase but inhibit the activity of amidase, therefore, acrylamide could be accumulated effectively and the percentage of acrylonitrile converted to acrylamide increased. Propionaldehyde was the most effective one among them. The percentage of acrylonitrile converted to acrylamide was almost 100% at 3.8 hours when propionaldehyde was added about 207.4 mg/l. Addition of benzaldehyde was unable to increase the percentage of acrylonitrile converted to acrylamide.
For the NHase of Mesorhizobium sp., cobalt ion was its cofactor and could increase the activity of NHase. EDTA, ε- caprolactam, and acrylamide were of no effect on the activity of NHase. However, 0.1 mg/l silver thiosulphate would slightly inhibit the activity of NHase and the conversion rate of 492.9 mg/l acrylonitrile was 54.9% at 29.1 hours. Moreover, the ability of the acrylonitrile biotransformation was completely inhibited if the concentration of the silver thiosulphate was above 0.5 mg/l.
If Mesorhizobium sp. was used in real wastewater treatment and acrylonitrile concentration of the wastewater was assumed as 495.0 mg/l, the optimal conditions could be set as follows:
First, remain the pH of the wastewater between 7.5 and 8.2, then add cobalt chemicals to activate NHase, and finally add propionaldehyde to inactivate amidase. Therefore, 605.6 mg/l acrylamide could be obtained within 3.8 hrs. By this means, Mesorhizobium sp. could convert acrylonitrile effectively and high- value acrylamide could be acquired.

中文摘要 I
英文摘要 III
目錄 VI
表目錄 X
圖目錄 XII
第一章 前言 1
第二章 文獻回顧 3
2-1 ABS樹脂之製造流程與特性 3
2-2 聚丙烯腈(PAN)人造纖維製造流程與特性 3
2-3 腈化物(nitriles)之特性與處理 4
2-3-1 腈化物之物化處理 7
2-3-2 腈化物之生物處理 7
2-4 腈化物(nitriles)分解菌 10
2-4-1 腈化物分解菌之代謝途徑 10
2-4-2 腈化物分解菌之特性研究 11
2-5 腈水合酶(NHase)之特性與影響因子 17
2-5-1 輔助因子 18
2-5-2 誘導物質 19
2-5-3 抑制物質 22
2-5-4 溫度與pH值 23
2-5-5 其他影響因子 24
2-6 醯胺酶(amidase)之特性與影響因子 27
2-7 丙烯腈與其中間產物的物化特性與研究 28
2-8 丙烯醯胺之重要性與相關研究 32
第三章 材料與方法 35
3-1 以丙烯腈為基質的丙烯醯胺生成菌之研究 35
3-1-1 菌種來源 35
3-1-2 菌種保存與方法 35
3-2 16S rRNA序列菌種鑑定 36
3-3 質體(plasmid)存在與否試驗 41
3-4 丙烯醯胺生成菌基本生理特性之研究 43
3-4-1 菌株最適生長溫度 43
3-4-2 液體培養與固態培養對菌株轉換丙烯腈之影響 45
3-4-3 菌株轉換丙烯腈累積丙烯醯胺之最適pH值 46
3-4-4 菌株對不同有機化合物的利用情形 50
3-4-4-1 革蘭氏染色 50
3-4-4-2 菌株對於95種不同有機化合物之利用情形 53
3-5 丙烯醯胺生成菌轉換丙烯腈累積丙烯醯胺特性之研究 55
3-5-1 丙烯腈濃度對菌株轉換丙烯腈之影響 55
3-5-2 丙烯酸對菌株轉換丙烯腈之影響 55
3-5-3 外加基質對菌株轉換丙烯腈之影響 56
3-6 影響丙烯醯胺生成菌腈水合酶活性之因子 59
3-6-1 金屬離子對菌株腈水合酶之影響 59
3-6-2 尿素對菌株轉換丙烯腈能力之影響 59
3-6-3 醯胺化物對菌株轉換丙烯腈能力之影響 60
3-6-3-1 己內醯胺對菌株轉換丙烯腈能力之影響 60
3-6-3-2 丙烯醯胺對菌株轉換丙烯腈能力之影響 60
3-6-4 EDTA對菌株轉換丙烯腈能力之影響 61
3-6-5 Ag2SO4對菌株轉換丙烯腈能力之影響 61
3-7 醛類對丙烯醯胺生成菌醯胺酶活性之影響 61
3-7-1 丙醛對菌株醯胺酶活性之影響 62
3-7-2 丁醛對菌株醯胺酶活性之影響 62
3-7-3 苯基醛對菌株醯胺酶活性之影響 62
3-8 分析方法 63
3-9 化學藥品、鹼洗液及實驗用水 66
第四章 結果與討論 69
4-1 丙烯醯胺生成菌之菌種來源與鑑定 69
4-2 丙烯醯胺生成菌是否具有質體 69
4-3 丙烯醯胺生成菌基本生理特性 71
4-3-1 丙烯醯胺生成菌最適生長溫度 71
4-3-2 液體培養與固態培養對菌株轉換丙烯腈之影響 72
4-3-3 菌株轉換丙烯腈累積丙烯醯胺之最適pH值 77
4-3-4 丙烯醯胺生成菌對95種不同有機化合物之利用能力 84
4-4 丙烯醯胺生成菌轉換丙烯腈累積丙烯醯胺特性之研究 87
4-4-1 丙烯腈濃度對菌株轉換丙烯腈之影響 87
4-4-2 丙烯酸對菌株轉換丙烯腈之影響 92
4-4-3 外加基質對菌株轉換丙烯腈之影響 98
4-5 影響丙烯醯胺生成菌腈水合酶活性之因子 103
4-5-1 金屬離子對菌株轉換丙烯腈能力之影響 103
4-5-2 尿素對菌株轉換丙烯腈能力之影響 107
4-5-3 醯胺化物對菌株轉換丙烯腈能力之影響 114
4-5-3-1 添加己內醯胺對菌株轉換丙烯腈能力之影響 114
4-5-3-2 添加丙烯醯胺對菌株轉換丙烯腈能力之影響 121
4-5-4 EDTA對菌株轉換丙烯腈能力之影響 126
4-5-5 Ag2SO4對菌株轉換丙烯腈能力之影響 131
4-6 醛類對丙烯醯胺生成菌醯胺酶活性之影響 138
4-6-1 丙醛對菌株醯胺酶活性之影響 138
4-6-2 丁醛對菌株醯胺酶活性之影響 143
4-6-3 苯基醛對菌株醯胺酶活性之影響 149
4-7 綜合討論 154
第五章 結論與建議 158
5-1 結論 158
5-2 建議 160
參考文獻 162
表 目 錄
表2-1 腈化物物化處理之原理及其優缺點 9
表2-2 丙烯腈、丙烯醯胺、丙烯酸之物化特性 29
表2-3 丙烯腈、丙烯醯胺、丙烯酸之反應特性 30
表2-4 丙烯腈、丙烯醯胺、丙烯酸對健康危害效應 31
表3-1 Phosphate buffered medium (PBM)成份及濃度 47
表3-2 GN2 MicroplateTM中96孔內之有機化合物成分 51
表3-3 GP2 MicroplateTM中96孔內之有機化合物成分 52
表4-1 液體或固態預培養及以液體預培養後利用無機鹽液清洗菌體次數之菌株轉換丙烯腈累積丙烯醯胺變化情形 77
表4-2 菌株以商用接種液作為接種液情形下對於95種不同有機物之判讀結果 86
表4-3 菌株以含氮源之磷酸鹽無機鹽液作為接種液情形下對於95種不同有機物之判讀結果 86
表4-4 菌株Mesorhizobium sp.於添加與未添加丙烯酸時，其轉換丙烯腈累積丙烯醯胺的變化情形 94
表4-5 菌株Mesorhizobium sp.於額外添加濃度494.0 mg/l酵母抽出物、葡萄糖、丙酮酸鈉與未額外添加基質時，其轉換濃度964.5 mg/l丙烯腈與累積丙烯醯胺的變化情形 103
表4-6 菌株Mesorhizobium sp.於含鐵與鈷離子、僅含鈷離子與僅含鐵離子之磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈的變化情形 107
表4-7 菌株Mesorhizobium sp.於添加不同濃度尿素與未添加尿素時，其轉換丙烯腈、丙烯醯胺與丙烯酸的變化情形 114
表4-8 菌株Mesorhizobium sp.於添加不同濃度己內醯胺與未添加時，其轉換濃度638.0 mg/l丙烯腈與累積丙烯醯胺的變化情形 121
表4-9 菌株Mesorhizobium sp.於添加不同濃度丙烯醯胺與未添加時，其轉換丙烯腈與累積丙烯醯胺的變化情形 126
表4-10 菌株Mesorhizobium sp.於添加濃度182.9 mg/l EDTA與未添加時，其轉換濃度488.1 mg/l丙烯腈與累積丙烯醯胺的變化情形 133
表4-11 菌株Mesorhizobium sp.於添加丙醛與未添加時，其轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈與累積丙烯醯胺的變化情形 143
表4-12 菌株Mesorhizobium sp.於添加丁醛與未添加時，其轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈與累積丙烯醯胺的變化情形 145
表4-13 菌株Mesorhizobium sp.於添加苯基醛與未添加時，其轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈與累積丙烯醯胺的變化情形 153
表4-14 菌株Mesorhizobium sp.與Nocardioides jensenii的實驗結果整理 156
表4-15 不同金屬離子與化學物質對腈水合酶與醯胺酶活性影響之實驗結果整理 157
圖 目 錄
圖2-1 ABS樹脂之製造流程 5
圖2-2 PAN製造流程圖 6
圖2-3 腈化物之生物轉換途徑 13
圖2-4 腈化物分解菌之三種主要用途 14
圖2-5 菌株Brevibacterium R312之腈水合酶催化腈化物分解機制 20
圖2-6 對菌株Agrobacterium tumefaciens B-261的NHase具有誘導能力的三種類型之醯胺 21
圖2-7 菌株Rhodococcus sp. N-771之腈水合酶的-subunit光反應作用 26
圖3-1 丙烯醯胺生成菌最適生長溫度實驗 44
圖3-2 丙烯醯胺生成菌轉換丙烯腈之最適pH值 49
圖3-3 菌株對於95種不同有機化合物利用情形之實驗流程圖 54
圖3-4 丙烯腈濃度對丙烯醯胺生成菌轉換情形影響之批次實驗流程圖 57
圖3-5 丙烯酸對丙烯醯胺生成菌轉換丙烯腈影響之批次實驗流程圖 58
圖4-1 菌株Mesorhizobium sp.及E. coli puc18利用QIAprep Spin Miniprep Kit抽取質體後，與supercoiled DNA ladder一起經瓊脂糖凝膠電泳後所得之電泳層析圖 70
圖4-2 菌株Mesorhizobium sp.之最適生長溫度 71
圖4-3 30oC密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.經液體預培養後進行1次清洗下於含鈷離子之磷酸鹽緩衝溶液中轉換丙烯腈濃度976.2 mg/l之各項監測值變化情形 74
圖4-4 30oC密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.經液體預培養後進行2次清洗下於含鈷離子之磷酸鹽緩衝溶液中轉換丙烯腈濃度976.2 mg/l之各項監測值變化情形 75
圖4-5 30oC密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.經固體預培養後於含鈷離子之磷酸鹽緩衝溶液中轉換丙烯腈濃度976.2 mg/l之各項監測值變化情形 76
圖4-6 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 4.7之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 79
圖4-7 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 5.7之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 80
圖4-8 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 6.7之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形。 81
圖4-9 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 7.5之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 82
圖4-10 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 8.2之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 83
圖4-11 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 7.5之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度1446.7 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 88
圖4-12 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 7.5之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度1906.0 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 89
圖4-13 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於pH 7.5之含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度2354.4 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 90
圖4-14 30oC之密閉系統下，額外添加濃度220.4 mg/l丙烯酸於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度971.5 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 95
圖4-15 30oC之密閉系統下，額外添加濃度384.3 mg/l丙烯酸於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度968.0 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 96
圖4-16 30oC之密閉系統下，額外添加濃度492.9 mg/l丙烯酸於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度965.0 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 97
圖4-17 30oC之密閉系統下，額外添加濃度494.0 mg/l酵母抽出物於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度964.5 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 100
圖4-18 30oC之密閉系統下，額外添加濃度494.0 mg/l葡萄糖於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度964.5 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 101
圖4-19 30oC之密閉系統下，額外添加濃度494.0 mg/l丙酮酸鈉於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度964.5 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 102
圖4-20 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於含鈷與鐵離子之磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈過程中各項監測值變化情形 105
圖4-21 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於僅含鐵離子之磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度976.2 mg/l丙烯腈過程中各項監測值變化情形 106
圖4-22 30oC之密閉系統下，額外添加濃度92.0 mg/l尿素於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度491.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 110
圖4-23 30oC之密閉系統下，額外添加濃度182.9 mg/l尿素於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度488.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形。 111
圖4-24 30oC之密閉系統下，額外添加濃度361.4 mg/l尿素於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度488.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形。 112
圖4-25 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度494.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 113
圖4-26 30oC之密閉系統下，額外添加濃度204.7 mg/l己內醯胺於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度638.0 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 116
圖4-27 30oC之密閉系統下，額外添加濃度406.4 mg/l己內醯胺於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度638.0 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 117
圖4-28 30oC之密閉系統下，額外添加濃度605.3 mg/l己內醯胺於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度638.0 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 118
圖4-29 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp.於含鈷離子之磷酸緩衝溶液中轉換濃度638.0 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形。 119
圖4-30 30oC之密閉系統下，額外添加濃度145.8 mg/l丙烯醯胺於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度972.7 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 123
圖4-31 30oC之密閉系統下，額外添加濃度290.6 mg/l丙烯醯胺於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度969.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 124
圖4-32 30oC之密閉系統下，額外添加濃度434.3 mg/l丙烯醯胺於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度965.6 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 125
圖4-33 30oC之密閉系統下，額外添加濃度182.9 mg/l EDTA-Fe於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度488.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 129
圖4-34 30oC之密閉系統下，額外添加濃度182.9 mg/l EDTA-Na於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度488.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 130
圖4-35 30oC之密閉系統下，額外添加濃度182.9 mg/l EDTA-Mg於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，對菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度488.1 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 131
圖4-36 30oC之密閉系統下，菌株Mesorhizobium sp. 於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中轉換濃度488.1 mg/l丙烯腈過程之各項監測值變化情形 132
圖4-37 30oC之密閉系統下，額外添加濃度0.1 mg/l Ag2SO4於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度492.9 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形。 135
圖4-38 30oC之密閉系統下，額外添加濃度0.5 mg/l Ag2SO4於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度492.9 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形。 136
圖4-39 30oC之密閉系統下，額外添加濃度1.0 mg/l Ag2SO4於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度482.2 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形。 137
圖4-40 30oC之密閉系統下，額外添加濃度70.5 mg/l丙醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 139
圖4-41 30oC之密閉系統下，額外添加濃度139.0 mg/l丙醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 140
圖4-42 30oC之密閉系統下，額外添加濃度207.4 mg/l丙醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 141
圖4-43 30oC之密閉系統下，額外添加濃度71.4 mg/l丁醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 146
圖4-44 30oC之密閉系統下，額外添加濃度140.7 mg/l丁醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 147
圖4-45 30oC之密閉系統下，額外添加濃度210.0 mg/l丁醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 148
圖4-46 30oC之密閉系統下，額外添加濃度71.4 mg/l苯基醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 150
圖4-47 30oC之密閉系統下，額外添加濃度140.6 mg/l苯基醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 151
圖4-48 30oC之密閉系統下，額外添加濃度210.0 mg/l苯基醛於含鈷離子磷酸鹽緩衝溶液中，菌株Mesorhizobium sp.轉換濃度493.8 mg/l丙烯腈的各項監測值變化情形 152

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