臺灣博碩士論文加值系統

蛋白質在溶液中並非靜態的，而是具有非常複雜的動態(dynamics)行為。這些分子內的運動對蛋白質的功能具有重大影響，例如扮演生物功能的殘基，常具有較大的靈活性。使用核磁共振弛豫(NMR relaxation)方法可測量蛋白質分子內每個殘基的局部運動，以及整個蛋白質分子的整體運動。本研究藉由測量眼鏡蛇毒蛋白CTXn中α-13C的縱向鬆弛時間(T1)，橫向鬆弛時間(T2)，1Hα -13Cα NOE，可求得三個運動參數，全轉動相關時間參數τm描述分子在溶液中翻滾的速度，有效相關時間τe描述分子內運動的速度，序參數S2描述各殘基運動的有序度。上述運動參數隨殘基所在位置（結構區和無規區）以及殘基的種類而改變。

壹、緒論…………………………………………………………………..1
一、氨基酸簡介…………………………………………………….1
二、蛇毒簡介……………………………………………………….5
三、心臟蛇毒蛋白簡介…………………………………………….6
四、心臟蛇毒蛋白CTXn…………………………………………..7
貳、核磁共振弛豫理論………………………………………………….9
一、晶格－自旋弛豫………………………………………………10
二、自旋－自旋弛豫………………………………………………11
三、T1的測量方法…………………………………………………12
四、T2的測量方法…………………………………………………13
五、T1ρ的測量方法……………………………………………….15
六、Steady-State Nuclear Overhauser Effect………………………16
參、蛋白質動態行為之研究……………………………………………18
一、分子的運動……………………………………………………18
二、蛋白質的運動…………………………………………………20
三、與模型無關方法………………………………………………21
四、異核核磁共振弛豫……………………………………………27
五、非線性分析方法………………………………………………29
肆、二維異核核磁共振實驗簡介………………………………………32
一、INEPT…………………………………………………………32
二、HSQC………………………………………………………….33
三、α-13C的T1二維實驗………………………………………..34
四、α-13C的T2二維實驗………………………………………...35
五、Hα -13Cα NOE二維實驗………………………………………36
伍、實驗部分……………………………………………………………37
一、實驗藥品………………………………………………………37
二、樣品的製備……………………………………………………37
三、儀器設備及裝置………………………………………………37
四、核磁共振實驗…………………………………………………37
陸、結果與討論…………………………………………………………39
一、質子化學位移的判定…………………………………………39
二、α-13C化學位移的判定……………………………………….46
三、α-13C的T1實驗測量結果…………………………………….49
四、α-13C的T2實驗測量結果………………………………….....56
柒、總結…………………………………………………………………65
捌、未來展望……………………………………………………………66
玖、參考文獻……………………………………………………………67
附錄……………………………………………………………..………69
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