(3.235.245.219) 您好!臺灣時間:2021/05/07 22:01
字體大小: 字級放大   字級縮小   預設字形  
回查詢結果

詳目顯示:::

我願授權國圖
: 
twitterline
研究生:張晉元
研究生(外文):Chin-Yuan Chang
論文名稱:具配位基交換機制之聚合物整體式管柱的製備及於毛細管電層析分離環狀與直鏈胜肽之應用
論文名稱(外文):Polymeric Monolithic Column with Ligand Exchange Property for Capillary Electrochromatographic Separation of Cyclic and Linear Peptides
指導教授:劉春櫻
指導教授(外文):Chuen-Ying Liu
學位類別:碩士
校院名稱:國立臺灣大學
系所名稱:化學研究所
學門:自然科學學門
學類:化學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2004
畢業學年度:92
語文別:中文
論文頁數:118
中文關鍵詞:配位基交換整體式管柱毛細管電層析胜肽
外文關鍵詞:PeptidesMonolithicCapillary ElectrochromatographyLigand Exchange
相關次數:
  • 被引用被引用:0
  • 點閱點閱:73
  • 評分評分:系統版面圖檔系統版面圖檔系統版面圖檔系統版面圖檔系統版面圖檔
  • 下載下載:0
  • 收藏至我的研究室書目清單書目收藏:0
本研究以亞胺二乙酸乙酯(diethyl iminodiacetate, DEIDA)與對氯乙烯苯(4-vinylbenzylchloride, VBC)反應作為聚合反應之單體,繼而以二乙烯苯(divinylbenzene, DVB)為交聯試劑,以正丙醇及甲苯為溶劑,用氮氣導入預先以γ-methacryloxypropyltrimethoxysilane (γ-MAPS)矽烷化之毛細管(75 �慆 ID),在聚合起始劑2,2’-偶氮雙異丁腈(?ㄐ?azobisisobutyronitrile)的催化下聚合成具多孔性整體式管柱,而後以NaOH(s)-EtOH(10 mM)將亞胺二乙酸乙酯水解為亞胺二乙酸,再與0.1 M CuSO4水溶液於58 ℃下錯合即完成銅-胺二乙酸基錯合物之整體式管柱的製備;本研究除了以三個含苯環胺基酸作為模型分子詳細探討聚合反應單體之組成、交聯試劑之百分比以及聚合與錯合時間之適當性外,並進而探討影響此管柱作為CEC分離之影響因素,如背景電解質之種類(phosphoric acid、Tris、imidazole、glycine、HEPES)、pH值(5-8)、濃度(2.5-100 mM),分離電壓(5-25 kV)之大小,以及有機修飾劑(ACN 10-50 %, v/v)、銅離子(0.1 mM)或氯化鈉(1-5 mM)等的添加,最後應用於環狀與直鏈胜肽的分析。研究結果發現管柱最佳製備步驟為矽烷衍生化: 10 % γ-MAPS,在120 ℃下矽烷化24小時,官能基化反應: DEIDA:VBC=3:1,60 ℃水浴反應60分鐘,管柱內聚合反應: 25 % DVB,70 ℃下聚合1小時,錯合反應: 0.1 M硫酸銅水溶液50 ℃下反應24小時。本研究所製備之管柱以Tris緩衝溶液(pH 7, 5 mM)和0.1 mM硫酸銅混合溶液為動相,施加15 kV電壓時,可對三個模型分子混合物作有效的分離,其流析順序為酪胺酸>苯丙胺酸>色胺酸;而以Tris緩衝溶液(pH 7, 5 mM),添加50 % ACN為動相,施加電壓25 kV時可使生理上有收縮血管弁鄋漕蒔馫蜂靺籅疣`肽[Deamino-Cys1,D-Arg8]-Vasopressin(c-Vas)與其結構類似胜肽Oxytocin acetate(c-OT)、Tocinoic acid(c-Toc),以及生理上具有相似血管收縮弁鄋漯衛嬲`肽Angiotensin II(Ag-II)、Angiotensin I(Ag-I)、[Sar1, The8]-Angiotensin II(Ag-ST),在短時間內達到基線分離,其流析順序為c-Vas > c-Ot > c-Toc > Ag-I > Ag-II > Ag-ST。本研究由上述分析物在管柱中之滯留行為,發現分離機制除了電泳之外,主要為配位基交換、疏水性作用,以及氫鍵等混合模式。
摘要..I
目錄..II
圖目錄..VI
表目錄..X
第一章 緒論..1
第一節 配位基交換於分離化學的應用..1
1-1層析系統..1
1.掌性靜相..1
2.掌性塗佈相..2
3.掌性動相..2
1-2毛細管電泳..3
1.毛細管區帶電泳..3
2.微胞電動層析..3
1-3毛細管電層析..4
第二節 毛細管電層析之介紹..5
2-1毛細管電層析簡史..6
2-2毛細管電層析原理..7
1.電泳..7
2.電滲流..8
3.分析參數..11
(1) HPLC..11
(2) CE..12
(3) CEC..13
2-3管柱型式..15
1.填充式管柱..15
2.開管式管柱..16
3.整體式管柱..17
(1)有機多孔性聚合物..17
1.1 polyacrylamides..18
1.2 poly(methacrylate esters)..20
1.3 polystyrenes..21
(2)多孔性二氧化矽溶膠凝膠..21
(3)固定粒子..22
第三節 分析物簡介..23
3-1胺基酸..23
3-2胜肽..27
第二章 實驗部分..31
第一節 儀器部分..31
1-1主要儀器裝置..31
1-2其他實驗操作儀器..33
1-3層析資料處理軟體..34
第二節 藥品..35
2-1合成試藥..35
2-2分析試藥..36
第三節 毛細管管柱靜相之製備與鑑定..36
3-1毛細管內部表面前處裡..36
3-2毛細管管壁表面矽烷基衍生化..37
3-3官能基化反應..37
3-4管柱內聚合反應..37
3-5水解反應..38
3-6錯合反應..38
3-7掃描式電子顯微鏡..39
第四節 毛細管電層析之實驗操作..39
4-1電滲流標記物之配製..39
4-2分析物之配製..40
4-3緩衝溶液之配製..42
4-4毛細管電層析之操作條件..44
第三章 結果與討論..46
第一節 毛細管管柱之製備..46
1-1毛細管內部表面前處理..46
1-2毛細管管壁表面矽烷基衍生化..46
1-3官能基化反應..47
1-4聚合反應..49
1-5水解反應..50
1-6錯合反應..51
1-7掃描式電子顯微鏡照片..52
第二節 毛細管管柱製程之探討..54
2-1初步管柱製作..56
1.磷酸緩衝溶液..57
(1)濃度..57
(2)有機修飾劑..58
2-2反應時間..59
1.磷酸緩衝液..59
(1)濃度..59
(2) pH..63
(3)有機修飾劑..66
2.三羥甲基胺基甲烷緩衝溶液..66
(1)濃度..67
(2) pH..68
(3)背景電解質添加物..78
3.其他緩衝溶液..78
2-3反應試劑比例..81
1.交聯劑比例..81
2.官能基化試劑比例..84
3.錯合時間..87
第三節 毛細管電層析之分離應用..97
3-1胜肽分子的分離..97
3-2分離機制探討..101
第四節 整體式管柱與開管式管柱比較..103
第四章 結論..107
參考文獻..108
1. V. A. Davankov, J. Chromatogr. A 2003, 1000, 891.
2. V.A. Davankov, J. D. Naviatil, H. F. Walton, Ligand Exchange Chromatography, CRC Press, Boca Raton, 1988.
3. F. Helfferich, Nature 1961, 189, 1001.
4. F. Helfferich, J. Am. Chem. Soc. 1962, 84, 3237.
5. F. Helfferich, J. Am. Chem. Soc. 1962, 84, 3242.
6. V.A. Davankov, S. V. Rogozhin, J. , Chromatogr. 1971, 60, 280.
7. C. Cheng, S. C. Wu, J. Chromatogr. A 2000, 896, 299.
8. G. Gubitz, S. Mihellyes, J. High Resolut. Chromatogr. 1994, 17, 733.
9. V. A. Davankov, A. S. Bochkov, A. A. Kurganov, P. Roumeliotis, K. K. Unger, Chromatographia 1980, 13, 677.
10. M. Remelli, D. Trombin, C. Conato, Chromatographia 2002, 55, 301.
11. S. Yamazaki, K. Ban’i, T. Tanimura, J. High Resolut. Chromatogr. 1999, 22, 487.
12. S. Yamazaki, K. Saito, T. Tanimura, J. High Resolut. Chromatogr. 1998, 21, 561.
13. K. Arai, D. Jin, F. Kusu, K. Takamura, J. Pharm. Biomed. Anal. 1997, 15, 1509.
14. M. H. Hyun, J. J. Ryoo, N. E. Lim, J. Liq. Chromatogr. 1993, 16, 3249.
15. M. H. Hyun, D. H. Yang, H. J. Kim, J. J. Ryoo, J. Chromatogr. A 1994, 684, 189.
16. W. Lindner, J. LePage, G. Davies, D. Seitz, B. L. Karger, J. Chromatogr. 1979, 185, 433.
17. G. Galaverna, R. Corradini, E. deMunari, A. Dossena, R. Marchelli, J. Chromatogr. A 1993, 657, 43.
18. A. Dossena, G. Galaverna, R. Corradini, R. Marcelli, J. Chromatogr. A 1993, 653, 229.
19. R. Marchelli, A. Dossena, Trends Food Sci. Technol. 1996, 7, 113.
20. G. Galaverna, R. Corradini, A. Dossena, E. Chiavaro, R. Marcelli, F. Dallavalle, G. Folesani, J. Chromatogr. A 1998, 829, 101.
21. G. Galaverna, R. Corradini, F. Dallavalle, G. Folesani, A. Dossena, R. Marcelli, J. Chromatogr. A 2001, 922, 151.
22. G. Bazylak, J. Chromatogr. A 1994, 665, 75. G. Bazylak, J. Chromatogr. A 1994, 668, 519.
23. E. Gassman, J. E. Kuo, R. N. Zare, Science 1985, 230, 813.
24. N. Grobuschek, M. G. Schmid, C. Tuscher, M. Ivanova, G. Gubitz, J. Pharm. Biomed. Anal. 2002, 27, 599.
25. S. Kodama, A. Yamamoto, A. Matsunaga, T. Soga, K. Hayakawa, Electrophoresis 2001, 22, 3286.
26.M. G. Schmid, G. Gubitz, Enantiomer 1996, 1, 23.
27. Z. L. Chen, J.M. Lin, K. Uchiyama, T. Hobo, Chem. J. Chin.Univ.
1999, 20, 186.
28. Z. Chen, J. M. Lin, K. Uchiyama, T. Hobo, J. Microcol. Sep. 1999,
11, 534.
29. A. S. Cohen, A. Paulus, B. L. Karger, Chromatographia 1987, 24,
15.
30. N. G. Sundin, T. M. Dowling, N. Grinberg, G. Bicker, J. Microcol. Sep.1996, 8, 323.
31. M .G. Schmid, N. Grobuschek, C. Tuscher, G. Gubitz, A. Vegvary, E. Machtejevas, A. Maruska, S. Hjerten, Electrophoresis 2000, 21 , 143.
32. Z. Chen, T. Hobo, Anal. Chem. 2001, 73, 3348.
33. K. D. Bartle, P. Myers, Capillary Electrochromatography, Royal Society of Chemistry, Cambridge, 2001.
34. M. G. Cikala, K. D. Bartle, M. M. Robson, P. Myers, M. R. Euerby,
Analyst 1998 , 123, 87R.
35. S. F. Y. Li, Capillary Electrophoresis: principles, practice and applications, Elservier Science: Amsterdam, 1993.
36. S. Comptom, R. Brownlee, Biotechniques 1988, 6, 432.
37. Kendall, C. Crittenden, Proc. Nat. Acad. Sci. 1907, 9, 86.
38. C. W. Field, O. Teague, J. Exp. Med. 1907, 9, 86.
39. T. B. Coolidge, J. Biol. Chem. 1939, 127, 551.
40. S. Hjerten, Chromatogr. Rev. 1967, 9, 122.
41. F. M. Everaerts, Hoving-Keulemans, W. M. L., Sci. Tools 1970, 1,
25.
42. R. Virternen, Acta Polytech. Scand. 1974, 123, 1.
43. H. H. Strain, J. Am. Chem. Soc. 1939, 61, 1292.
44. J. Kowalcxyk, J. Chromatogr. 1964, 14, 411.
45. V. Pretorius, B. J. Hopkins, J. D. Schieke, J. Chromatogr. 1974, 99, 23.
46. J. W. Jorgenson, K. D. Lukacs, J. Chromatogr. 1981, 218, 209.
47. J. W. Jorgenson, K. D. Lukacs, Anal. Chem. 1983, 53, 1298.
48. J. W. Jorgenson, K. D. Lukacs, J. High Resolut. Chromatogr. Comm. 1981, 4, 230.
49. T. Tusda, Anal. Chem. 1987, 59, 521.
50. J. H. Knox, I. H. Grant, Chromatographia 1987, 24, 135.
51. J. H. Knox, I. H. Grant, Chromatographia 1991, 32, 317.
52. N. W. Smith, M. B. Evans, Chromatographia, 1994, 38, 649.
53. N. W. Smith, M. B. Evans, Chromatographia 1995, 41, 197.
54. C. Yan, D. Schaufelberger, F. Erni, J. Chromatogr. 1994, 60. 15.
55. W. F. Smyth, S. McClean, Electrophoresis 1998, 19, 2870.
56. A. Karcher, Z. El Rassi, Electrophoresis 1999, 20, 3280.
57. G. W. Sovocool, W. C. Brumley, J. R. Donnelly, Electrophoresis 1999, 20, 3297.
58. Z. El Rassi, Electrophoresis 1999, 20, 3134.
59. V. Schurig. D. Wistuba, J. Chromatogr. A 2000, 875, 255.
60. K. D. Altria, J. Chromatogr. A 1999, 856, 443.
61. A. R. Timerbaev, O. A. Shpigun, Electrophoresis 2000. 21, 4179.
62. C. Y. Liu, Electrophoresis 2001, 22, 612.
63. C. P. Kapnissi-Christodoulou, X. Zhu, I. M. Warner, Electrophoresis 2003, 24, 3917.
64. S. Eeltink, G. P. Rozing, W. T. Kok, Electrophoresis 2003, 24, 3935.
65. P. Spege, L. Schweitz, S. Nilsson, Electrophoresis 2003, 24, 3892.
66. J. Kang, D. Wistuba, V. Schurig, Electrophoresis 2002, 23, 4005.
67. E. Dabek-Zlotorzynska, H. Chen, L. Ding, Electrophoresis 2003, 24, 4128.
68. D. Allen, Z. E. Rassi, Electrophoresis 2003, 24, 3962.
69. D. N. Heiger, High Performance Capillary Electrophoresis: An Introduction, 2nd , Hewlett-Packard Co.:Walbronn, 1993.
70. H. Engehardt, W. Beck. T. Schmitt, Capillary Electrophoresis: Methods and Potentials, Vieweg: Lengerich, 1996.
71. A. S. Rathore, C. Horvath, Electrophoresis 2002, 23, 1211.
72. M. Bedair, Z. E. Rassi, Electrophoresis 2002, 23, 2983.
73. M. M. Dittmann, K. Masuch, G. P. Rozing, J. Chromatogr. A 2000, 887, 209,
74. A. S. Rathore, C. Horvath, J. Chromatogr. A 1996, 743, 231.
75. J. C. Reijenga, E. Kenndler, J. Chromatogr. A 1994, 659, 403.
76. J. Jiskra, H. A. Claessens, C. A. Cramers, J. Sep. Sci. 2003, 26, 1305.
77. L. A. Colon, G. Burgos, T. D. Maloney, J. M. Cintron, R. L. Rodriguez, Electrophoresis 2000, 21, 3965.
78. N. W. Smith, M. B. Evans, J. Chromatogr. A 1999, 832, 41.
79. L. A. Frame, M. L. Robinson, W. J. Lough, J. Chromatogr. A 1998, 798, 243.
80. T. Zimina, R. M. Smith, P. Myers, J. Chromatogr. 1997, 758, 191.
81. P. D. A. Angus, C. W. Demarest, T. Catalano, J. F. Stobaugh, J. Chromatogr. A 2000, 887, 347.
82. R. A. Shalliker, B. S. Broyles, G. Guiochon, J. Chromatogr. A 2000, 878, 153.
83. M. Mazereeuw, V. Spikmans, U. R. Tjaden, J. van der Greef, J. Chromatogr. A 2000, 879, 219.
84. R. Stol, M. Mazereeuw, U. R. Tjaden, J. van der Greef,J. Chromatogr. A 2000, 873, 293.
85. S. Roulin, R. Dmoch, R. Carney, K. D. Bartle, P. Myers, M. R. Euerby, C. Johnson, J. Chromatogr. A 2000, 887, 307.
86. K. J. Reynolds, T. D. Maloney, A. M. Fermier, L. M. Colon, Analyst 1998, 123, 1493.
87. J. Ding, B. Ning, G. Fu, Y. Lu, S. Dong, Chromatographia 2000, 52, 285.
88. T. D. Maloney, L. A. Colon, Electrophoresis 1999, 20, 2360.
89. J. R. Chen, M. T. Dulay, R. N. Zare, F. Svec, E. Peters, Anal. Chem. 2000, 72, 1224.
90. A. S. Rathore, C. Horvath, Anal. Chem. 1998, 70, 3069.
91. G. A. Lord, D. B. Gordon, P. Mayer, B. W. King, J. Chromatogr. A 1997, 768, 9.
92. G. Choudhary, C. Horvath, J. F. Banks, J. Chromatogr. A 1998, 828,
469.
93. S. Hjerten, A. Vegvari, T. Srichaiyo, H. X. Zhang, C. Ericson, D. Eaker, J. Cap. Electrophoresis 1998, 1/2, 13.
94. K. Mistry, I. Krull, N. Grinberg, J. Sep. Sci. 2002, 25, 935.
95. H. Xou, X. Huang, M. Ye, Q. Luo, J. Chromatogr. A 2002, 954, 5.
96. F. Svec, J. M. J. Frechet, Ing. Eng. Che. Res. 1999, 38, 34.
97. C. Fujimoto, J. High Resolut. Chromatogr. 2000, 23, 89.
98. C. Fujimoto, Anal. Chem. 1995, 67, 2050.
99. C. Ericson, J. L. Liao, K. I. Nakazato, S. Hjerten, J. Chromatogr. A 1997, 767, 33.
100. C. Ericson, S. Hjerten, Anal. Chem. 1999, 71, 1621.
101. C. Fujimoto, Y. Fujise, E. Matsuzawa, Anal, Chem. 1996, 68, 2753.
102. J. L. Liao, N. Chen, C. Ericson, S. Hjerten, Anal. Chem. 1996, 68, 3468.
103. A. Palm. M. V. Novotny, Anal. Chem. 1997, 69, 4499.
104. D. Hoegger, R. Freitag, Electrophoresis 2003, 24, 2958.
105. M. T. Dulay, J. P. Quirino, B. D. Bennett, M. Kato, R. N. Zare, Anal. Chem. 2001, 73, 3921.
106. R. Wu, H. Zou, M. Ye, Z. Lei, J. Y. Ni, Electrophoresis 2001, 22, 544.
107. R. Shediac, S. M. Ngola, D. J. Throckmorton, D. S. Anex,T. J. Shepodd, A. K. Singh, J. Chromatogr. A 2001, 925, 251.
108. E. C. Peters, M. Petro, F. Svec, J. M. J. Frechet, Anal. Chem. 1997, 69, 3646.
109. E. C. Peters, M. Petro, F. Svec, J. M. J. Frechet, Anal. Chem. 1998, 70, 2288.
110. E. C. Peters, M. Petro, F. Svec, J. M. J. Frechet, Anal. Chem. 1998, 70, 2296.
111. C. Yu, F. Svec, J. M. J. Frechet, Electrophoresis 2000, 21,120.
112. B.Scherer. F. Steiner. J. Chrmmatogr. A. 2001, 924, 197.
113. A. H. Que, T. Konse, A. G. Baker, M. V. Novotny, Anal. Chem. 2000, 72, 2703.
114. T. Koide, K. Ueno, J. HighResol. Chromatogr. 2000, 23, 59. T. Koide, K. Ueno, J. Chromatogr. A 2001. 909, 305.
115. I. Guset, X. Huang, C. Horvath, J. Chromatogr. A 1999, 855, 273.
116. B. Xiong, L. Zhang, Y. Zhang, H. Zou, J. Wang, J. High Resol. Chromatogr. 2000, 23, 67.
117. Y. Liu, D. J. Oietrzyk, J. Chromatogr. A 2001, 920, 367.
118. K. Hosoya, H. Ohta, K. Yoshizako, K. Kimata, T. Ikegami, N, Tanaka, J. Chromatogr. A 1999, 853, 11.
119. N. Ishizuka, H. Minakuchi, K. Nakanishi, N. Soga,H. Nagayama, K. Hosoya, N. Tanaka, Anal. Chem. 2000, 72, 1275.
120. J. D. Hayes, A. Malik, Anal. Chem. 2000, 72, 4090.
121. N. Tanaka, H. Nagayama, H. Kobayashi, T. Ikegami, K. Hosoya, N. Ishizuka, H. Minakuchi, K. Nakanishi, K. Cabrera, D. Lubda, J. High Reaolut. Chromatogr. 2000, 23, 111.
122. S. Suzuki, Y. Kuwahara, K. Makiura, S. Honda, J. Chromatogr. A 2000, 873, 247.
123. R. Asiaie, X. Huang, D. Farnan, C. Horvath, J. Chromatogr. A 1998, 806, 251.
124. T. Adam, K. K. Unger, M. M. Dittmann, G. P. Rozing, J. Chromatogr. A 2000, 887, 327.
125. D. Wistuba, V. Schurig, Electrophoresis 2000, 21, 3152.
126. G. S. Chirica, V. T. Remcho, Electrophoresis 1999, 20, 50.
127. G. S. Chirica, V. T. Remcho, Anal. Chem. 2000, 72 , 3605.
128. Q. Tang, M .L. Lee, J. High Resolut. Chromatogr. 2000, 23, 73.
129. Q. Tang, N. Wu, M. L. Lee, J. Microcol. Sep. 1999, 11, 550.
130. Q. Tang, B. Xin, M. L. Lee, J. Chromatogr. A 1999, 837, 35.
131. Q. Tang, M. L. Lee, J. Chromatogr. A 2000, 887, 265.
132. C. K. Ratnayake, C. S. Oh, M. P. Henry, J. Chromatogr. A 2000, 887, 277.
133. C. K. Ratnayake, C. S. Oh, M. P. Henry, J. High Resolut. Chromatogr.2000, 23, 81.
134. M. T. Dulay, R. P. Kulkarni, R. N. Zare, Anal. Chem. 1998, 70, 5103.
135. M. Kato, M. T. Dulay, B. D. Bennett, J. Chen, R. N. Zare, Electrophoresis 2000, 21, 3145.
136. R. Boyer, Concepts in Biochemistry; Brooks/Cole, Pacific Grove, 1998.
137. D. L. Nelson, M. M. Cox, Lehninger Principles of Biochemistry, 3rd Ed., Worth, New York, 2000.
138. K. Kovacs, L. Kohidai, E. Pallinger, G. Csaba, ACTA Protozool. 2002, 41, 191.
139. J. W. Liu, N. B. Jonathan, Endocrinology 1994, 134, 114.
140. X. Huang, C. J. Horvath, J. Chromatogr. A 1997, 788, 155
141. S. Budavari, M. J. O''Neil, A. Smith, P. E. Heckelman, The Merck Index: An Encyclopedia of Chemicals, Drugs, and Biologicals; Merck & Co., Rahway, N.J., U.S.A, 1989.
142. O. Brüggemann, R. Freitag, M. J. Whitcombe, E. N. Vulfson, J. Chromatogr. A 1997, 781, 43.
143. T. W. G. Solomon, Organic Chemistry, 6thEd, Wiley, New York, 1996.
144. A. E. Martell, R. M. Smith, Critical Stability Constants V. 6, Plenum Press, New York, 1974-1989.
145. S. C. Chuang, C. Y. Chang, C. Y. Liu. J. Chromatogr. A 2004, 1044, 231.
QRCODE
 
 
 
 
 
                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
第一頁 上一頁 下一頁 最後一頁 top
系統版面圖檔 系統版面圖檔