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研究生:方靜文
研究生(外文):Jing-Wen Fang
論文名稱:金銀花活性成分綠原酸之定量研究
論文名稱(外文):Study on Quantitative Analysis of Active Component Chlorogenic Acid in Lonicera Flowers
指導教授:張淑貞張淑貞引用關係
指導教授(外文):Shu-Jen Chang
學位類別:碩士
校院名稱:中國醫藥大學
系所名稱:中國藥學研究所
學門:醫藥衛生學門
學類:藥學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2005
畢業學年度:93
語文別:中文
論文頁數:98
中文關鍵詞:金銀花綠原酸紫外光譜高效液相層析法
外文關鍵詞:Lonicera flowerschlorogenic acidUltraviolet Spectrometryhigh-performance liquid chromatography
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重要的中藥材金銀花為忍冬科忍冬屬植物若干品種的乾燥花,具有抗病毒、抗菌、抗發炎及抗SARS等效用,民間藥也用來治療腦炎、流行性感冒、肺炎、解毒、痢疾、癰腫、疔瘡等皮膚疾病。

綠原酸是忍冬植物活性成分之一,指標成分綠原酸的含量高低是評估金銀花或忍冬藥材品質的指標,先前的品管制及評估金銀花品質的方法都以紫外光譜法(UV)和高效液相層析法(HPLC)來分析測定綠原酸含量。

本研究目的為建立並確認利用UV和HPLC方法,來定量臺灣和大陸忍冬品種的綠原酸含量。新鮮及乾燥樣品用甲醇萃取後,在UV波長330 nm測總綠原酸含量;另由HPLC法測綠原酸含量,管柱為Synergi 4 μ Fusion-RP 80A,移動相為acetonitrile-0.05% H3PO4 溶液(15:85,v/v,pH=2.4),流速1.0 mL/min.,偵測極限為195 ng/mL,定量極限為3.125μg/mL,在測定範圍內檢量線均呈現良好的線性關係,UV為r2=0.9999,HPLC為r2=0.9996。HPLC法之回收率為95.1%,同日和間日之確效其標準偏差小於3,變異係數小於10。 UV和HPLC的分析法可以成功的測出不同時期和產地之金銀花綠原酸含量。

UV法所測之總綠原酸含量:臺灣產的新鮮毛忍冬七月採為1930- 600 μg/g,九月採為1340-420 μg/g,四月採為1190-290 μg/g。市售品分別購自大陸與臺灣,總綠原酸含量分別為河南品系之綠蕾為 1280 μg/g,葉為1520 μg/g,四川品系之花蕾為1890 μg/g,葉為2160 μg/g,藤為1880 μg/g,山東品系之白蕾為2440 μg/g,葉為2810μg/g,臺灣市售品之金銀花為1010 μg/g,忍冬藤為210 μg/g。

HPLC法所測之綠原酸含量:臺灣產新鮮毛忍冬七月採為843-275 μg/g,九月採為695-190 μg/g,四月採為346-99 μg/g。臺灣新鮮毛忍冬水分含量平均為76.7 %。大陸品種河南品系之綠蕾為498 μg/g,葉為450 μg/g,四川品系之花蕾為803 μg/g,葉為690 μg/g,藤為589 μg/g,山東品系之白蕾為1036 μg/g,葉為1003 μg/g,臺灣市售品之金銀花為590 μg/g,忍冬藤為40 μg/g。

UV及HPLC分析方法快速、靈敏、再現性高。由分析結果顯示臺灣產的金銀花品質良好,值得開發利用。
The impotant Chinese herb “Jin-Yin-Hua” is prepared from the flowers of Lonicera species (Caprifoliaceae), and used as an anti-viral, anti-bacterial, anti-inflammatory and anti-Sars agents, as well as folk medicine to treat encephalitia, influenza, pneumonia, detoxications, dysentery, carbuncles, boils and other skin eruptions.

Chlorogenic acid(CGA) is one of active components of Lonicera herb. It is necessary to determine the content of marker component chlorogenic acid as a index of quality. Previous quality control and evaluation of Lonicera flowers were generally concerned with ultraviolet spectrometry (UV) and high-performance liquid chromatography (HPLC).

The aim of this study was to set up and validate an UV and HPLC methods to quantify chlorogenic acid in Lonicera species from Taiwan and China. Fresh and dried samples were extracted with methanol. UV absorption was performed at l = 330 nm for total chlorogenic acid, HPLC analysis for chlorogenic acid was carried out on a Synergi 4m Fusion-RP 80A column (250 x 4.6 mm i.d., 4mm), with a mobile phase of acetonitrile-0.05% H3PO4 solution (15:85,v/v,pH=2.4) at the flow rate of 1 mL/min. The limit of detection(S/N =3) is 195 ng/mL and the limit of quantification is 3.125 mg/mL. All calibration curves show good linear regression(r2=0.9999 for UV and r2 = 0.9996 for HPLC) within test ranges. For HPLC method, recovery is 95.1 % , intra- and inter-day variations, S.D. and C.V. is less than 3 and 10, respectively. UV and HPLC analysis were successfully applied to quantify the chlorogenic acid in different stages and localittes of Lonicera flowers.

The content of total chlorogenic acid of fresh Lonicera species from Taiwan were 1930-600 mg/g (July), 1340 –420 mg/g (Septmber) and 1190-290 mg/g (April) for fresh flowers. Commercial samples collected in China and Taiwan, the content of total chlorogenic acid were 1280 mg/g for green bud and 1520 mg/g for leaves from Henan, 1890 mg/g for flower buds, 2160 mg/g for leaves and 1880 mg/g for stems from Sichuan, 2440 mg/g for white buds, 2810 mg/g for leaves from Shandong, and 1010 mg/g for flowers and 210 mg/g for stems from Taiwan.

The content of chlorogenic acid of fresh Lonicera species from Taiwan were 843-275 mg/g (July), 695-190 mg/g (Septmber) and 346-99 mg/g (April). The average of water content of the fresh plant was measured as 76.7 %. The content of chlorogenic acid of commercial samples were 498 mg/g for green bud and 450 mg/g for leaves from Henan, 803 mg/g for flower buds, 690 mg/g for leaves and 589 mg/g for stems from Sichuan, 1036 mg/g for white buds, 1003 mg/g for leaves from Shandong, and 590 mg/g for flowers and 40 mg/g for stems from Taiwan.

UV and HPLC analysis methods are fast, sensitive and reliable. From the resoluts indicate that the quality of Lonicera flowers from Taiwan are good, and is worth developing into a good source.
目錄 I
表目錄 III
圖目錄 IV
附圖目錄 V
中文摘要 VII
英文摘要… ..IX

第一章 緒言 1
第二章 總論 2
第一節 金銀花之研究概況 2
一、金銀花之本草文獻考察……………………………………………2
二、金銀花之藥用植物學考察…………………………………………5
三、金銀花之生藥學考察..……………………………………………12
四、金銀花之化學成分考察……..……………………………………16
五、金銀花之藥理學考察……………………………………………..19
第二節 國內金銀花之研究概況 22
一、天然物化學研究…………………………………………………. 22
二、金銀花及其製劑之品質評估……………………………………. 22
三、金銀花之藥理活性探討…………………………………………..23
四、金銀花藥品動力學之探討………………………………………..23
第三節 綠原酸定量方法之文獻回顧 24
一、綠原酸定量法文獻考察 …………………………………………24
二、綠原酸定量法之探討.…………………………………………….34
第四節 研究動機及目的 35
第三章 實驗材料及方法 37
第一節 實驗材料 37
一、研究材料…………………………………………………………..37
二、溶媒、試藥與層析材料…………………………………………..39
第二節 實驗儀器 40
第三節 實驗方法 42
一、新鮮毛忍冬植物的含水量測定…………………………………..42
二、忍冬植物指標成分綠原酸之定量分析方法……………………..43
第四章 結果與討論 52
第一節 結果 52
一、水分含量結果……………………………………………………..52
二、綠原酸之定量分析結果…………………………………………..53
第二節 討論 57
一、水分含量結果……………………………………………………..57
二、綠原酸之定量分析結果…………………………………………..57
第五章 結論 60
參考文獻 91
參考文獻
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