臺灣博碩士論文加值系統

本研究以養殖魚類吳郭魚為實驗動物，分別取淡水養殖之蜆及海水養殖之文蛤和花蛤，以其熱水抽出物先進行in vitro試驗後，再進行in vivo 及ex vivo試驗，評估貝類熱水抽出物抑制吳郭魚LDL氧化以推測其預防動脈硬化之效果，並推測以吳郭魚作為實驗動物替代哺乳類動物作為初步評估貝類對預防心血管功效之可行性。
取吳郭魚之LDL進行in vitro試驗，分別以蜆、文蛤及花蛤熱水抽出物抑制由銅離子誘導之LDL氧化作用，三者皆可明顯延長LDL之氧化遲滯期，隨添加濃度提高，遲滯期延長，與劑量成正比，具有dose-dependent趨勢，添加貝類熱水抽出物後，LDL氧化速率 (△A232 nm/min) 無明顯改變，氧化程度 (Max. △A232 nm) 則隨著添加濃度提高而明顯下降。
In vitro試驗中，以銅離子誘導人之LDL氧化，隨蜆及花蛤熱水抽出物添加之濃度提高，LDL氧化遲滯期皆明顯延長，具dose-dependent趨勢，氧化速率 (△A232 nm/min) 也會隨著蜆及花蛤熱水抽出物之添加而明顯下降，氧化程度 (Max. △A232 nm) 則不受影響。
In vivo試驗中，吳郭魚在餵食前血漿三酸甘油酯及膽固醇濃度分別為113.7和245.4 mg/dL，攝食含2% 蜆熱水抽出物之飼料60天後，血漿中三酸甘油酯濃度為142.7 ± 46.9 mg/dL，顯著低於控制組 (1397.0 ± 234.6 mg/dL)，血漿總膽固醇濃度為353.0 ± 71.9 mg/dL，也顯著低於控制組的924.1 ± 270.9 mg/dL，LDL膽固醇明顯較控制組低，HDL膽固醇則無顯著之差異。吳郭魚以含5% 花蛤熱水抽之飼料餵食60天後，血漿三酸甘油酯濃度為105.2 ± 42.7 mg/dL，明顯低於控制組，總膽固醇濃度為169.8 ± 26.1 mg/dL，也顯著低於控制組，LDL膽固醇濃度明顯低於控制組，HDL膽固醇則無顯著差異。
Ex vivo試驗中，以銅離子誘導LDL氧化，蜆組之氧化遲滯期及達1/2最大A232 nm的時間 (T1/2) 明顯較控制組長，花蛤組則略長於控制組，但無顯著差異；蜆及花蛤組LDL氧化加速期之氧化速率 (△A232 nm/min) 分別為1.1 ± 0.1及2.2 ± 0.0 (×10-3)，皆顯著低於控制組 (3.1 ± 0.0)，攝食蜆或花蛤熱水抽出物後，吳郭魚之LDL較不易被Cu2+誘導氧化；最大氧化程度分別為0.36和0.47，都明顯低於控制組 (0.8 ± 0.0)，較未攝食貝類熱水抽出物者不易被完全氧化。
餵食含蜆及花蛤熱水抽出物之飼料，可使吳郭魚之血脂降低，並保護LDL免於氧化，其中以花蛤保護LDL氧化之效果在in vitro及ex vivo中均較高。

目錄 I
表目錄 III
圖目錄 IV
中文摘要 V
英文摘要 VII
壹、前言 1
貳、文獻回顧 3
一、蜆及文蛤之生態 3
1. 蜆 3
2. 文蛤 4
二、蜆與文蛤萃取物之生理活性 5
1. 抗氧化能力 5
2. 抗癌 5
3. 其它 5
三、吳郭魚 6
四、低度密度脂蛋白 (LDL) 之構造 6
五、LDL氧化與心血管疾病之關係 7
1. 魚類之LDL 7
2. 氧化低密度脂蛋白 (ox LDL) 之形成 8
3. 動脈粥狀硬化過程中ox LDL的變化與生理意義 9
六、脂氧合酶 (LOX) 對LDL氧化之影響 9
1. 15-LOX之促氧化作用 9
2. 15-LOX參與動脈粥狀硬化之過程 10
參、材料與方法 12
一、材料 12
二、蜆及文蛤熱水抽出物之製備 12
三、吳郭魚 12
四、採血 13
五、脂蛋白的分離 13
六、脂蛋白電泳 15
七、LDL透析 15
八、膽固醇定量 16
九、三酸甘油酯定量 16
十、HDL cholesterol定量 17
十一、LDL cholesterol定量 18
十二、Cu2+誘導吳郭魚LDL之氧化反應 18
十三、LDL氧化遲滯期之計算 19
十四、維生素E測定 19
十五、LDL脂肪酸分析 20
十六、清除自由基 (DPPH) 能力之測定 21
十七、LOX 異構酶活性之測定 22
肆、結果與討論 23
一、抗氧化性 23
1. 掃除自由基 (DPPH) 能力 23
二、對脂氧合酶之抑制 26
1. 異構酶 26
三、對吳郭魚血漿LDL氧化之抑制 28
1. 吳郭魚 LDL 之分離與人 LDL 之比較 28
2. In vitro 29
a. 貝類抽出物對吳郭魚LDL氧化之影響 29
b. 貝類熱水抽出物對人LDL氧化之影響 34
3. in vivo 39
a. 對吳郭魚成長速率的影響： 39
b. 對血漿三酸甘酯濃度的影響： 41
c. 對血漿總抗氧化力之影響 43
d. 對LDL氧化之影響： 44
伍、結論 49
陸、參考文獻 51

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