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研究生:游逸群
研究生(外文):Yu Yi Chun
論文名稱:氟白普洛芬於醇性溶媒之光解研究
論文名稱(外文):Photolytic Studies of Flurbiprofen in Alcoholic Solvents
指導教授:吳安邦
指導教授(外文):Wu An Bang
學位類別:碩士
校院名稱:臺北醫學大學
系所名稱:藥學系
學門:醫藥衛生學門
學類:藥學學類
論文種類:學術論文
論文出版年:2005
畢業學年度:93
語文別:中文
論文頁數:113
中文關鍵詞:氟白普洛芬光解反應非固醇類抗發炎藥高效液相層析法
外文關鍵詞:FlurbiprofenPhotolysisNSAIDsHPLC
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中文摘要
氟白普洛芬(FB)為一具有光敏感特性的非類固醇抗發炎藥物(NSAIDs)。為發展一敏感度高、準確的安定性指標之高壓液相層析分析法,並藉此來定量氟白普洛芬並觀察其光解反應。液相層析方法是使用Inertsil ODS-3V管柱,移動相組成為甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸)為2:4:4,UV檢測器波長設定在247nm。進而將氟白普洛芬檢量線作線性回歸、日內及日間精密度(Precision)試驗並予以確效。檢量線的R2值為0.9984,而日內、日間試驗的C.V.(%)值皆低於2.5% 和3.2%,模擬回收率亦在99.35%~101.61%之間。以上結果顯示,已發展出的HPLC分析方法具有良好的選擇性和專一性。
當將氟白普洛芬之甲醇溶液以Philips 400-W紫外燈照射,可觀察到氟白普洛芬有醇基(FB-1)、酮基(FB-2)及酯類(FB-3)三種光解衍生產物的產生。而當於乙醇溶液,酸性條件下,亦可觀察到氟白普洛芬乙基酯(FB-4)的生成。這些光解產物除以製備型高壓液相層析系統逐一單離,之後並藉由EI-MS、UV、IR、1H-,13C-NMR之檢測來解析其化學結構。
以不同濃度、不同溶媒的兩項變異,來觀察氟白普洛芬之光解動力學情形。結果發現,氟白普洛芬於高濃度對進行光分解會呈現零階次動力學模式,低濃度則較偏向一階次動力學模式;藉由使用不同醇類溶媒作仔細的觀察,則可看到其動力學模式,隨著溶媒極性的降低,而較偏向一階次動力學模式。
Abstract
Flurbiprofen (FB) is one of photosensitizing non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs). A sensitive, and accurate stability-indicating high performance liquid chromatography for determining the photodegradation of FB was developed and validated with linear regression of calibration curve, intra-day test, inter-day test. The quantitation for FB was monitored with an Inertsil ODS-3V column. The component of mobile phase was methanol- acetonitrile -deionized water (with 1% acetic acid added) = 2:4:4 and setting of UV detector was 247 nm. The R square of calibration curve regression was 0.9984 and the C.V. (%) of intra-day and inter-day tests was lower than 2.5% and 3.2%, respectively. The mimic percent recovery were between 99.35%~101.61%. The above results showed that our established HPLC assay method exhibit good selectivity and specificity.
When FB was irradiated with a Philips 400-W UV lamp in methanol, 3 photoproducts of FB; ketone (FB-1), aldehyde (FB-2) and methyl ester (FB-3) could be observed, respectively. FB-ethyl ester (FB-4) also could be observed, when FB was dissolved in ethanol in acidic condition. Using preparative HPLC system, the resulting photoproducts were isolated and their chemical structures were analyzed by EI-MS、UV、IR、1H-,13C-NMR spectroscopies.
Under the conditions of different concentrations and various alcoholic solvents, the photo-kinetic behaviors of FB were observed. The kinetics of FB under the photo-irradiation conditions followed the first order at lower concentrations. The kinetic results of FB followed the first order in n-propanol and zeroth order in methanol solutions.
目次

中文摘要……………………………………………………………… i
英文摘要……………………………………………………………… ii
目次…………………………………………………………………… iii
表目錄………………………………………………………………… v
圖目錄………………………………………………………………… vi

第一章 緒論………………………………………………………… 1
1.1 導論………………………………………………………… 1
1.2 非固醇類抗發炎藥物(NSAIDs)介紹…………………… 5
1.3 NSAID類藥物光解反應研究近況……………………… 8
1.4 氟白普洛芬(Flurbiprofen)簡介………………………… 10
1.5 氟白普洛芬研究動機與目的……………………………… 11
第二章 實驗材料與方法…………………………………………… 13
2.1 實驗材料與儀器…………………………………………… 13
2.1.1 試藥……………………………………………………… 13
2.1.2 實驗儀器………………………………………………… 14
2.2 實驗方法…………………………………………………… 17
2.2.1 光解產物單離………………………………………… 17
2.2.1.1 氟白普洛芬(FB)的樣品處理……………………… 17
2.2.1.2 光解產物之分離條件……………………………… 17
2.2.1.3 氟白普洛芬(FB)之HPLC系統適合參數…………… 20
2.2.2 單離產物結構確認……………………………………… 22
2.2.2.1 質譜儀(EI-MS)…………………………………… 23
2.2.2.2 核磁共振儀(NMR)………………………………… 23
2.2.2.3 紅外光光譜儀(IR)………………………………… 23
2.2.2.4 紫外光光譜儀(UV)………………………………… 24
2.2.3 虐待試驗(Stress Treatment)實驗步驟……………… 24
2.2.4 光安定性動力學實驗步驟……………………………… 25
第三章 結果與討論………………………………………………… 26
3.1 氟白普洛芬(FB)之檢量線實驗設計…………………… 26
3.2 檢量線之線性回歸(Regression)及The Lack-of-Fit Test 27
3.3 氟白普洛芬(FB)之日內及日間實驗(Precision)與再現率試驗Recovery test (Accuracy)……………………… 28
3.4 虐待試驗(安定性試驗)…………………………………… 32
3.5 氟白普洛芬(FB)的光安定性試驗……………………… 37
3.6 光解產物單離與結構鑑定………………………………… 42
3.6.1 光解產物FB-1構造式鑑定…………………………… 60
3.6.1.1 光解產物FB-1構造式之光譜解析………………… 60
3.6.2 光解產物FB-2構造式鑑定…………………………… 71
3.6.2.1 光解產物FB-2構造式之光譜解析………………… 71
3.6.3 光解產物FB-3構造式鑑定…………………………… 83
3.6.3.1 光解產物FB-3構造式之光譜解析………………… 83
3.6.4 光解產物FB-4構造式鑑定…………………………… 95
3.6.4.1 光解產物FB-4構造式之光譜解析………………… 95
第四章 結論………………………………………………………… 109
參考文獻……………………………………………………………… 110


























表目錄

表1.1 數類具光敏感性特質之藥物……………………………………… 3
表1.2 數類具光敏感性特質之藥物……………………………………… 4
表2.1 氟白普洛芬(FB)光解產物之分析型HPLC分析條件………… 18
表2.2 氟白普洛芬(FB)光解產物之製備型HPLC分析條件………… 19
表2.3 氟白普洛芬(FB)於甲醇溶液中光解產物之滯留時間………… 19
表2.4 氟白普洛芬(FB)於乙醇溶液中光解產物之滯留時間………… 20
表2.5 氟白普洛芬(FB)之HPLC 系統適合參數……………………… 20
表3.1 氟白普洛芬(FB)檢量線變異分析…………………………………… 29
表3.2 氟白普洛芬(FB)日內與日間確效試驗…………………………… 30
表3.3 氟白普洛芬(FB)經虐待試驗後之剩餘百分比…………………… 35
表3.4 氟白普洛芬(FB)波峰面積以247/230 nm作一比值……………… 36
表3.5 Comparison between the peak area ratio of flurbiprofen determined
at 230 and 247 nm by ANOVA analysis……………………………
36
表3.6 不同氟白普洛芬(FB)濃度於甲醇溶液中光降解的零階次與
一階次作圖方程式…………………………………………………… 39
表3.7 氟白普洛芬(FB)於不同醇性溶媒中光降解的零階次與一階次作圖方程式……………
41
表3.8 氟白普洛芬(FB)之光譜數據表………………………………… 46
表3.9 氟白普洛芬(FB)之1H-與13C-NMR數據比較……………………… 47
表3.10 氟白普洛芬(FB)之質譜積分表…………………………………… 51
表3.11 FB與其醇性溶媒中光解產物FB-1的光譜數據比較表………… 63
表3.12 氟白普洛芬(FB)與其醇性溶媒光解產物FB-1 NMR數據比較… 64
表3.13 FB-1之質譜積分表………………………………………………… 66
表3.14 FB與其醇性溶媒中光解產物FB-2的光譜數據比較表………… 74
表3.15 氟白普洛芬(FB)與其醇性溶媒中光解產物FB-2之NMR數據比較……………………………………………………………………
75
表3.16 FB-2之質譜積分表………………………………………………… 77
表3.17 FB與其醇性溶媒中光解產物FB-3的光譜數據比較表………… 85
表3.18 氟白普洛芬(FB)與醇性溶媒光解產物FB-3之NMR數據比較… 86
表3.19 FB-3之質譜積分表………………………………………………… 88
表3.20 FB與乙醇溶媒酸試驗產物FB-4之光譜數據比較……………… 98
表3.21 FB與乙醇溶媒酸試驗產物FB-4之NMR數據比較……………… 99
表3.22 FB-4之質譜積分表………………………………………………… 101


圖目錄

圖1.1 NSAID抑制COX-1與COX-2之藥理作用途徑……………… 7
圖1.2 Butibufen 之光化學反應機制圖……………………………… 9
圖1.3 氟白普洛芬(FB)化學結構式……………………………… 10
圖3.1 氟白普洛芬(FB)於甲醇溶液之濃度檢量線 (n = 5)…… 28
圖3.2 以HPLC分析Flurbiprofen標準溶液在20%甲醇溶液中(100 μM),分析條件為:移動相—甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸)= 2:4:4,層析管柱為Inertsil 5 ODS-3V (4.6 i.d. x 250 mm)……………………………………………… 32
圖3.3 以HPLC分析Flurbiprofen及其內部標準品Naproxen在
20%甲醇溶液中(100 μM),分析條件為移動相—甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸) = 2:4:4,層析管柱為Inertsil 5 ODS-3V(4.6 i.d. x 250 mm)………………………………


33
圖3.4 以HPLC分析Flurbiprofen在60℃酸性 (0.2 N HCl)之20%甲醇溶液中(100 μM)狀態下三天,分析條件為移動相—甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸)= 2:4:4,層析管柱為Inertsil 5 ODS-3V(4.6 i.d. x 250 mm)…………………


33
圖3.5 以HPLC分析Flurbiprofen在60℃鹼性(0.2 N NaOH)之20%甲醇溶液中(100 μM)狀態下三天,分析條件為移動相—甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸)= 2:4:4,層析管柱為Inertsil 5 ODS-3V (4.6 i.d. x 250 mm)…………………


34
圖3.6 以HPLC分析Flurbiprofen在20%甲醇溶液中(100 μM)照光1小時,分析條件為移動相—甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸)= 2:4:4,層析管柱為Inertsil 5 ODS-3V (4.6 i.d. x 250 mm)………………………………………………………


34
圖3.7 不同濃度之氟白普洛芬(FB)於甲醇溶液中之光降解連結圖 38
圖3.8 不同濃度之氟白普洛芬(FB)於甲醇溶液中光降解零階次
作圖……………………………………………………………
38
圖3.9 不同濃度之氟白普洛芬(FB)於甲醇溶液中光降解一階次
作圖……………………………………………………………
39
圖3.10 氟白普洛芬(FB)於不同醇性溶媒之光降解連結圖………… 40
圖3.11 氟白普洛芬(FB)於不同醇性溶媒之光降解零階次作圖…… 40
圖3.12 氟白普洛芬(FB)於不同醇性溶媒之光降解一階次作圖…… 41
圖3.13 非類固醇抗發炎藥物於甲醇溶液中廣為被接受之反應機轉 43
圖3.14 以HPLC分析氟白普洛芬於甲醇溶液中(0.5mM)照光
14天後之光解情形,分析條件為移動相—甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸)=2:4:4,層析管柱為Inertsil 5 ODS-3V
(4.6 i.d. x 250 mm)


44
圖3.15 以HPLC分析氟白普洛芬於乙醇溶液中(0.5mM)照光10天後之光解情形,分析條件為移動相—甲醇:氰甲烷:純水(加入1%醋酸)=2:4:4,層析管柱為Inertsil 5 ODS-3V
(4.6 i.d. x 250 mm)……………………………………………


45
圖3.16 氟白普洛芬(FB)之結構式………………………………… 49
圖3.17 氟白普洛芬(FB)之質譜斷裂圖……………………………… 50
圖3.18 氟白普洛芬(FB)之質譜斷裂圖……………………………… 52
圖3.19 氟白普洛芬(FB)之UV-VISIBLE光譜圖…………………… 53
圖3.20 氟白普洛芬(FB)之IR光譜圖…………………………… 54
圖3.21 氟白普洛芬(FB)之1H-NMR圖譜一…………………………… 55
圖3.22 氟白普洛芬(FB)之1H-NMR圖譜二………………………… 56
圖3.23 氟白普洛芬(FB)之1H-NMR圖譜三………………………… 57
圖3.24 氟白普洛芬(FB)之13C-NMR圖譜一………………………… 58
圖3.25 氟白普洛芬(FB)之13C-NMR圖譜二………………………… 59
圖3.26 FB-1…………………………………………………………… 62
圖3.27 FB-1之質譜圖………………………………………………… 65
圖3.28 FB-1之質譜斷裂圖…………………………………………… 67
圖3.29 FB-1之UV-VISIBLE吸收光譜圖…………………………… 68
圖3.30 FB-1之1H-NMR圖譜………………………………………… 69
圖3.31 FB-1之13C-NMR圖譜……………………………………… 70
圖3.32 FB-2…………………………………………………………… 73
圖3.33 FB-2之質譜圖………………………………………………… 76
圖3.34 FB-2之UV-VISIBLE光譜吸收圖…………………………… 78
圖3.35 FB-2之1H-NMR圖譜一……………………………………… 79
圖3.36 FB-2之1H-NMR圖譜二……………………………………… 80
圖3.37 FB-2之13C-NMR圖譜一…………………………………… 81
圖3.38 FB-2之13C-NMR圖譜二……………………………………… 82
圖3.39 FB-3………………………………………………………… 84
圖3.40 FB-3之質譜圖………………………………………………… 87
圖3.41 FB-3之UV-VISIBLE吸收光譜圖…………………………… 89
圖3.42 FB-3之1H-NMR圖譜一……………………………………… 90
圖3.43 FB-3之1H-NMR圖譜二……………………………………… 91
圖3.44 FB-3之1H-NMR圖譜三…………………………………… 92
圖3.45 FB-3之13C-NMR圖譜一…………………………………… 93
圖3.46 FB-3之13C-NMR圖譜二…………………………………… 94
圖3.47 FB-4………………………………………………………… 97
圖3.48 FB-4之質譜圖……………………………………………… 100
圖3.49 FB-4之UV-VISIBLE光譜吸收圖………………………… 102
圖3.50 FB-4之1H-NMR圖譜一……………………………………… 103
圖3.51 FB-4之1H-NMR圖譜二……………………………………… 104
圖3.52 FB-4之1H-NMR圖譜三……………………………………… 105
圖3.53 FB-4之13C-NMR圖譜一……………………………………… 106
圖3.54 FB-4之13C-NMR圖譜二……………………………………… 107
圖3.55 FB-4之13C-NMR圖譜三……………………………………… 108
圖4.1 FB於醇類溶液下之光解途徑………………………………… 109
參考文獻

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